Занятие 1 тема: микроорганизмы окружающей среды. Распространенность микробов в природе. Микрофлора воздуха.

Цель занятия: изучить экологическую роль микробов в круговороте веществ в природе, оценить значение микрофлоры воздуха в эпидемиологии инфекционных заболеваний, освоить методы изучения загрязнения воздуха, научиться оценивать санитарно-гигиеническое состояние исследуемого воздуха.

План занятия

1. Экология микроорганизмов. Санитарная микробиология: цели и задачи.

Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах.

2. Роль микробов в круговороте веществ в природе. Микроорганизмы и биосфера.

3. Качественный состав микрофлоры воздуха.

4. Оценка воздуха - как среды обитания микроорганизмов.

5. Санитарно-бактериологические показатели чистоты воздуха.

6. Методы определения бактериальной загрязненности воздуха: а) седиментационный метод; б) аспирационный метод.

7. Значение микрофлоры воздуха в эпидемиологии инфекционных заболеваний.

Задания для выполнения лабораторной работы.

1. Провести посев воздуха учебной комнаты методом Коха.

Две чашки Петри с мясо-пептонным агаром (МПА) оставляют открытыми на 60 мин, после чего посевы инкубируют в термостате при температуре 37°С. Результат оценивают по суммарному числу колоний, выросших на обоих чашках: чистый воздух – менее 250, средней степени загрязненности – 250-500, загрязненный – более 500 колоний.

2. Определить общее количество микроорганизмов, образующих колонии на питательной среде в воздухе учебной комнаты (ОМЧ – общее микробное число).

Посев воздуха осуществляется по методу Коха. Чашки устанавливаются в открытом виде на различной высоте от пола. В среднем рекомендуется отбирать 1 пробу на каждые 20 м² помещения. Срок экспозиции зависит от предполагаемого обсеменения воздуха, чашки выдерживают открытыми от 5 до 40 минут. Посевы помещают в термостат на 24 часа и дополнительно выдерживают 48 часов на рассеянном свету при комнатной температуре, после чего подсчитывают число колоний с помощью аппарата для подсчета колоний и изучают характер микрофлоры, описывая выросшие колонии разных видов, готовят мазки, выделяют чистые культуры и их идентифицируют. При определение микробного числа методом седиментации по Коху подсчитывают колонии, выросшие на мясо-пептонном агаре в чашках Петри и расчет ведется по В.Л. Омелянскому. По его представлению, на поверхность площадью 100 см ² за 5 минут оседает такое количество микробов, которое содержится в 10 л воздуха.

Диаметр чашки (в см)	Площадь чашки (см2)
8	50
9	63
10	78,5

Формула В.Л. Омелянского

Микробное Ах100х1000х5

число (Х) ------------------------------------------------------, где

воздуха Вх10хt

Х - количество микробов в 1 м ³,

А - количество колоний на агаре в чашке,

В - площадь чашки,

t - время (в минутах) экспозиции,

5 - время Омелянского,

10 - объем воздуха,

100 - площадь (коэффициент),

1000 - искомый объем в литрах

Учет результатов:

Пример расчета. В чашки Петри диаметром 10 см выросло 35 колоний.

Площадь чашки (пr²) составляет 3,14 х 5² = 78,5 (см²).

Далее подсчитывают число клеток на 100 см² (равнозначных 10 л или 0,01 м³ воздуха).

78,5 см² воздуха содержит 35 клеток

100 см² ------------------------ х клеток

100 х 35

х= ----------------- = 45 (клеток)

78,5

Таким образом, в 0,01 м³ воздуха находится 45 клеток, а в 1м³ их будет в 100 раз больше – 4500.

Помещение	Диаметр чашки	Площадь Чашки	Количество колоний	Микробное число воздуха
	8	50
	9	63
	10	78,5

Заключение:____________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3. По демонстрационным препаратам изучить результаты опыта по проведению санитарно-бактериологического исследования воздуха.