2 курс / Нормальная физиология / Физа 2

УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ ПОД КОНТРОЛЕМ ПРЕПОДАВАТЕЛЯ

Модуль № 1. Физиология систем крови, дыхания, кровообращения и лимфообращения

Тема занятия: Физиология групп крови и системы гемостаза.

Цель занятия: 1. Изучить основные характеристики групп крови человека и правила

переливания крови.

2. Изучить механизмы гемостаза и фибринолиза.

Рекомендуемая литература:

1. Конспект лекции по нормальной физиологии.

2. Учебник «Физиология человека» (Под ред. Покровского В.М. и Коротько Г.Ф.). М.: Медицина, 2003; 2011.

3. Учебник «Нормальная физиология» (Под ред. Орлова Р.С. и Ноздрачева А.Д.). М., 2006.

4. Чеснокова С.А. Шастун С.А. Атлас по нормальной физиологии. Учебное пособие (под ред. Н.А. Агаджаняна). М.: МИА, 2007.

5. Электронные образовательные ресурсы

http://normfiziologia.ru/jelektronnye-obrazovatelnye-resursy/

Задания для самоподготовки и контроля знаний:

Вопросы

1. Группы крови по системе АВ0.

2. Группы крови по системе резус (Rh -hr).

3. Правила проведения гемотрансфузии.

4. Cистема гемостаза. Стадии гемостаза.

5. Сосудисто-тромбоцитарный гемостаз:

1. Характеристика фаз сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.

2. Механизмы сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.

6. Клеточные факторы свертывания крови.

7. Плазменные факторы свертывания крови.

8. Коагуляционный гемостаз:

   1. Характеристика фаз коагуляционного гемостаза.

   2. Внешний и внутренний механизмы коагуляционного гемостаза.

9. Противосвертывающая система крови. Естественные антикоагулянты.

10. Фибринолиз, его фазы и механизмы.

11. Регуляция свертывания крови.

12. Регуляция фибринолиза.

Ситуационные задачи

1. У пациента М. для организации переливания крови определяли группу крови с помощью моноклональных антител (цоликлонов анти-А и анти-В). При этом реакции агглютинации эритроцитов не было обнаружено. Какая группа крови по системе AB0 у пациента М.?

2. Перед проведением гемотрансфузии врач определил группу и резус-принадлежность крови пациента, и подобрал одноименную донорскую кровь. Какие пробы необходимо провести прежде, чем приступить к гемотрансфузии? Как они проводятся? Какие проявления при этих пробах будут свидетельствовать о несовместимости переливаемой крови?

3. Известно, что у человека при интенсивных физических нагрузках или при резкой боли свертываемость крови увеличивается. Объясните механизм изменения свертывания крови при этом. Назовите этапы гемостаза. Укажите норму времени свертывания крови по Сухареву.

Учебно-исследовательские работа

Техника определения группы крови человека по системе АВО с помощью моноклональных антител (цоликлонов анти-А, анти-В, анти -АВ).

Цель: ознакомиться с методикой определения группы крови человека по системе АВО.

Оборудование: цельная кровь или эритроцитарная масса, цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ, лабораторная тарелка (планшет), стеклянные палочки, пипетки, физиологический раствор.

Ход работы:

Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15-25°С. Для определения используют следующий алгоритм:

Алгоритм определения групповой принадлежности по системе АВО с использованием моноклональных антител (цоликлонов).

1. Промаркировать планшет (ФИО исследуемого лица, специфичность реагентов анти-А, анти-В, анти-АВ)

2. Нанести на планшет (в разные лунки) по одной большой капле (0,1мл) цоликлона анти-А, анти-В, анти-АВ

3. Рядом с каждым реагентом нанести по одной маленькой (0,01-0,05мл) капле исследуемой крови

4. Смешать отдельными чистыми стеклянными палочками каждую каплю исследуемой крови с соответствующим реагентом

5. Слегка покачать планшет в течение 2,5 минут

6. Наличие агглютинации свидетельствует о положительном результате (+), а ее отсутствие - об отрицательном (-)

7. Сделать заключение о группе крови (таблица №1)

Таблица №1

Реагенты				Группа крови
анти-А	анти-В	анти-АВ
-	-	-	О (I)
+	-	+	А (II)
-	+	+	В (III)
+	+	+	АВ (IV)

8. При получении положительного результата одновременно со всеми цоликлонами (анти-А, анти-В, анти-АВ), для исключения неспецифической реакции провести исследование с 0,9% NaCl.

8.1 . Нанести на планшет одну большую каплю (0,1мл) 0,9% NaCl

8.2. Рядом нанести одну маленькую (0,01-0,05мл) каплю исследуемой крови

8.3. Смешать чистой стеклянной палочкой каплю исследуемой крови с 0,9% NaCl

8.4. Мягко покачать пластину в течение 2,5 минут

8.5. Оценить результат (таблица №2)

Таблица №2

Реакция с 0,9% NaCl	Группа крови
-	АВ (IV)
+	Неспецифическая агглютинация группа крови не определяется.

8.6. При выявлении неспецифической реакции провести исследования (п.п. 1 – 7) с трижды отмытыми эритроцитами

9. При выявлении группы А (II) или АВ (IV), для уточнения варианта антигена А и выявления подгруппы А2(II) или А2В (IV), провести исследование с цоликлоном

Анти – А1 или лектином Анти – А1

9.1. Нанести на планшет по одной большой капле (0,1мл) цоликлона анти-А1, или лектина Анти – А1

9.2. Рядом с каждым реагентом нанести по одной маленькой (0,01-0,05мл) капле исследуемой крови

9.3. Смешать отдельными чистыми стеклянными палочками каждую каплю исследуемой крови с соответствующим реагентом

9.4. Мягко покачать планшет в течение 2,5 минут

9.5. Оценить результат исследования (таблица №3)

Таблица № 3

Исходная группа	Реакция с цоликлоном или лектином анти-А1	Группа крови
А (II)	+	А (II)
	-	А2 (II) (подгруппа)
АВ (IV)	+	АВ (IV)
	_	А2В (IV) (подгруппа)

Рекомендации к оформлению работы: наблюдаемые результаты исследования (рис.1.) описывают в протоколе и зарисовывают реакцию агглютинацию. Делают вывод о групповой принадлежности крови.

Рисунок 1. Результат исследования групповой принадлежности крови по системе АВ0

Правила проведения гемотрансфузии

Гемотрансфузия – лечебный метод, заключающийся во введении в кровеносное русло больного человека (реципиента) цельной крови или ее компонентов, заготовленных от донора или самого реципиента (аутогемотрансфузия). В настоящее время гемотрансфузию следует расценивать как операцию по трансплантации ткани со всеми вытекающими из этого последствиями (возможность отторжения клеточных, плазменных компонентов крови, развития аллосенсибилизации к антигенам крови и белкам плазмы), в том числе уголовно-процессуального характера.

При проведении гемотрансфузии должны быть соблюдены следующие правила:

1. Правила асептики и антисептики.

2. Иметь гарантию, что донорская кровь и ее компоненты получены у человека, не болевшего СПИД-ом, ВИЧ-инфекцией, сифилисом, гепатитом.

3. Определить группу крови реципиента по системе АВО и сверить полученный результат с данными об этом в истории болезни.

4. Определить группу крови донора, а если донорская кровь консервированная сверить полученный результат с данными об этом на этикетке флакона или контейнера.

5. Определить резус-принадлежность крови реципиента и сверить полученный результат с данными об этом в истории болезни.

6. Определить резус-принадлежность крови донора, а если донорская кровь консервированная сверить полученный результат с данными об этом на этикетке флакона или контейнера.

7. Если имеются расхождения между полученными результатами о принадлежности крови реципиента и/или донора, исследование следует повторить.

8. Провести пробы на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента по системе АВО и резус-фактору. Эта проба в клинических условиях выполняется с сывороткой крови реципиента, получаемой путем центрифугирования, и кровью донора. В условиях лабораторного занятия с этой целью используют имеющиеся стандартные сыворотки различных групп крови (в качестве сыворотки крови реципиента) и консервированную донорскую кровь. На предметное стекло, под которое подкладывают белую бумагу, наносят 5 капель сыворотки реципиента, к которой добавляют 1 каплю одногруппной консервированной крови донора и перемешивают их. Затем в течение 5 мин стекло покачивают и наблюдают за реакцией. Отсутствие агглютинации свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента по системе АВО. Появление агглютинации указывает на их индивидуальную несовместимость и на недопустимость переливания данной донорской крови.

9. Провести биологическую пробу. Эту пробу проводят следующим образом: струйно переливают 10-15 мл крови (эритроцитарной массы, ее взвеси, плазмы). Затем в течение не менее 3-х мин наблюдают за состоянием больного. При отсутствии клинических проявлений (снижение артериального давления, учащение пульса, дыхания, гиперемии лица и т.д.) струйно вводят вновь 10-15 мл крови и в течение 3 мин наблюдают за больным. Такую процедуру проводят в 3-й раз, после чего принимают решение о возможности переливания данной крови.