2 курс / Микробиология 1 кафедра / Экзамен микробик / metodichka_4

Рисунок 14 – Определение чувствительности бактерий к антибиотикам ме-

тодом серийных разведений

Диско-диффузионный метод. Производят посев выделенной от больно-

го культуры бактерий сплошным газоном на пластинчатый МПА. Затем на по-

сев помещают стандартные бумажные диски, пропитанные различными анти-

биотиками, и термостатируют при 370С 24 часа.

Учет результатов проводят по диаметру зон отсутствия роста бактерий во-

круг дисков (рисунок 15). Размеры зон подавления роста сравнивают со стан-

дартами и определяют антибиотик, который необходим для лечения.

Рисунок 15 – Определение чувствительности бактерий к антибиотикам диско-диффузионным методом

18

Осложнения и последствия антибиотикотерапии

Аллергические реакции (крапивница, анафилактический шок и др.). Могут вы-

зывать большинство антибиотиков.

Иммунотоксическое действие на клеточный и гуморальный иммунитет, а так-

же фагоцитоз (тетрациклины, левомицетин и др.).

Токсические реакции в связи с органотропным действием антибиотиков при длительном лечении: поражение печени (тетрациклин, рифампицин), почек

(стрептомицин, полимиксин), костного мозга (левомицетин) и др.

Эндотоксический шок. Развивается в тех случаях, когда под влиянием анти-

биотика происходит массовое разрушение грамотрицательных бактерий и по-

ступление в кровь их эндотоксинов.

Дисбактериозы. Развиваются после длительного применения антибиотиков,

подавляющих резидентную микрофлору организма.

Формирование антибиотикоустойчивых микробов.

Практическая работа

1. Определение фаготипа бактерий.

Провести фаготипирование культур микроорганизмов, выделенных от больного и предполагаемого источника инфекции для выявления эпидемиоло-

гической цепочки при вспышке инфекционного заболевания. Учет фаготипиро-

вания культур S.typhi, выделенных от больных брюшным тифом и брюшноти-

фозного носителя по демонстрации.

2. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам.

Метод серийных разведений.

I этап исследования. Приготовить двукратные разведения антибиотика

(гентамицин) в МПБ в объеме 2 мл (таблица 8). Затем во все опытные пробирки внести по 0,2 мл суточной бульонной культуры испытуемых бактерий (E. coli).

Поставить контроль бактерий (КБ) на наличие роста. Пробирки поместить в термостат при 370С на 24 часа.

Таблица 8 – Схема определения чувствительности бактерий к антибиотикам

19

II этап исследования. Учет результатов. КБ – диффузно-мутящий рост. Определение минимальной подавляющей концентрации антибиотика

(МПК), которая еще полностью задерживает рост бактерий (визуально – прозрачный МПБ).

Диско-диффузионный метод.

I этап исследования. На поверхность плотной питательной среды в чашке Петри произвести посев исследуемой культуры (S.aureus) сплошным газоном. Затем на поверхность среды с помощью стерильного пинцета поместить диски с различными антибиотиками: ампициллином, оксациллином, эритромицином, рифампицином, цефотаксимом. Диски помещать на равном (2 см) расстоянии друг от друга и на расстоянии 2 см от края чашки. Посевы поставить в термостат при 370С на 24 часа.

II этап исследования. Учет результатов производить путем измерения зон задержки роста микробов вокруг дисков, включая диаметр диска. На основании полученных результатов определить чувствительность S.aureus к конкретным антибиотикам, исходя из данных, указанных в инструкции (таблица 9).

Таблица 9 – Минимальные зоны задержки роста чувствительных и устойчивых культур S.aureus к различным антибиотикам