2 курс / Микробиология 1 кафедра / Экзамен микробик / metodichka_2

Исследование воздуха проводят аспирационным методом в аппарате Кро-

това, который устроен таким образом, что воздух с заданной скоростью (25

л/мин) всасывается через клиновидную щель крышки аппарата, под которой находится чашка Петри с питательной средой. При этом частицы аэрозоля, со-

держащие микроорганизмы, равномерно распределяются по всей поверхности среды благодаря постоянному вращению чашки. Для определения микробного числа используют МПА, а для определения S.aureus – желточно-солевой агар

(ЖСА). После посева чашки с МПА и ЖСА термостатируют при температуре

370С в течение 24-48 часов, затем подсчитывают количество колониеобразую-

щих единиц (КОЕ) в 1 м3 воздуха.

Аппарат Кротова (1 – клиновидная щель, 2 – место для чашки Петри с

питательной средой, 3 – шкала скорости всасывания воздуха).

4

Таблица 1 – Критерии оценки микробной чистоты воздуха в хирургических

и акушерских стационарах (СанПиН, 2010 г.)

6. Микрофлора воды.

Микрофлора воды отражает микробный пейзаж почвы. Микробная обсе-

мененность воды открытых водоемов зависит от поступления в них ливневых,

талых и сточных вод. В связи с этим через воду могут передаваться возбуди-

тели холеры, брюшного тифа, дизентерии, лептоспироза, энтеровирусных ин-

фекций и др.

1. Микробиологические показатели оценки качества питьевой воды.

Санитарно-показательными микроорганизмами питьевой воды явля-

ются колиформные бактерии: эшерихии, клебсиеллы, цитробактеры, энтеро-

бактеры и др. Обнаружение их в воде указывает на наличие свежего фекаль-

ного загрязнения.

Оценку микробиологической доброкачественности питьевой воды в Рос-

сии проводят по нескольким показателям (Таблица 2), предусмотренным соот-

ветствующими санитарными правилами и нормами (СанПиН, 2010 г.).

5

Таблица 2 – Микробиологические нормативы качества питьевой воды

8. Микрофлора почвы.

Почва является основной средой обитания неболезнетворных микробов,

принимающих участие в процессах формирования и самоочищения почвы, а

также в круговороте веществ в природе (азотфиксирующие, нитрифицирующие и другие бактерии).

Болезнетворные бактерии попадают в почву с испражнениями человека и животных, а также обнаруживаются в местах захоронения животных, погибших от инфекций. Чаще это споровые бактерии (возбудители газовой гангрены,

столбняка, ботулизма, сибирской язвы), которые могут годами сохраняться в почве. Реже обнаруживают возбудителей кишечных инфекций (холера, дизен-

терия, брюшной тиф и др.). Сроки их сохранения в почве варьируют от не-

скольких часов до нескольких месяцев.

Санитарно-показательными микроорганизмами почвы являются: коли-

формные бактерии (эшерихии, клебсиеллы, цитробактеры, энтеробактеры), воз-

будитель газовой гангрены (C.perfringens), а также термофильные бактерии,

растущие при температуре 600С.

6

9. Микробиологические показатели доброкачественности пищевых

продуктов

Оценка качества пищевых продуктов проводится согласно санитарным правилам и нормам (СанПин, 2010 г.) (Таблица 3).

Таблица 3 – Микробиологические показатели качества пищевых продуктов

10. Микробиота (нормальная микрофлора) организма человека.

Организм человека заселен (колонизирован) многочисленными видами микробов. Они представляют собой сообщества (микробиоценозы), образую-

щие устойчивую к различным воздействиям биологическую пленку на коже,

слизистых оболочках открытых полостей организма. Плотность популяции микробов и их взаимоотношения определяются понятием Quorum Sensing (чув-

ство «кворума»). Чувство «кворума» – способность некоторых бактерий об-

щаться и координировать свое поведение за счет секреции молекулярных сиг-

налов.

Национальным институтом здоровья США (2008-2012г.г.) был иницииро-

ван крупномасштабный проект («Human microbiome projеct») по изучению мик-

7

робиома человеческого организма. Микробиом человека – общий генетиче-

ский материал микробных сообществ, населяющих человеческий организм.

Основные результаты изучения микробиома человека:

1.В организме одного человека живут 1014 (100 триллионов) бактерий.

2.В организме человека обитают более 10 000 видов бактерий.

3.Бактериальная масса в макроорганизме составляет около 3 кг.

4.На каждую клетку человека приходится 10 бактериальных клеток.

5.На каждый ген человека приходится 100 бактериальных генов.

Всоставе микробиоты человека выделяют:

резидентную (облигатную) микрофлору, которая в норме присутствует постоянно, в значительных количествах и выполняет ряд полезных функций для организма;

факультативную (необязательную) микрофлору, которая в норме либо отсутствует, либо присутствует в незначительных количествах. Это группа ус-

ловно-патогенных микробов, которая при снижении сопротивляемости орга-

низма может вызывать различные патологические процессы.

транзиторную микрофлору, которая не способна к длительному сущест-

вованию в организме.

Микробиота различных биотопов организма

Микробиота кожи.

Основное место обитания микроорганизмов кожи – роговой слой, протоки сальных желез и волосяные фолликулы. Кожа является внешним покровом, со-

стояние которого во многом зависит от состояния здоровья человека. Основны-

ми представителями микробиоты кожи являются S.epidermidis, Micrococcus spp., Corynebacterium spp., Propionibacterium spp., Peptococcus spp. Реже на коже ре-

гистрируют S.aureus, S.pyogenes. Candida spp. и другие микроорганизмы.

8

9

При ослаблении иммунитета микробиота кожи первой сигнализирует о возникновении патологического процесса в организме. Например, при сахарном диабете на коже могут возникать фурункулы и карбункулы (возбудитель –

S.aureus), при иммунодефицитном состоянии могут развиваться рожистое вос-

паление (возбудитель – S.pyogenes), герпетическое и папилломавирусное пора-

жения кожи.

Микробиота конъюнктивы.

Конъюнктива содержит небольшое количество микроорганизмов за счет действия лизоцима и других бактерицидных факторов слезной жидкости. Ос-

новными представителями данного биотопа являются коринебактерии и стафи-

лококки.

Микробиота верхних дыхательных путей.

Верхние дыхательные пути колонизированы широким спектром симбионт-

ных микроорганизмов (стафилококки, стрептококки, нейссерии, пептострепто-

кокки, бактероиды, пропионибактерии, фузобактерии, эубактерии и др.). В

бронхах и альвеолах микроорганизмы регистрируют реже.

Микробиота полости рта.

В 1 мл слюны содержится до 108 различных видов микроорганизмов. Пре-

обладают анаэробы (эубактерии, фузобактерии, лактобактерии, бифидобакте-

рии, бактероиды, анаэробные кокки), из аэробных бактерий в ротовой полости чаще присутствуют стафилококки, стрептококки и др. При нарушении микро-

биоценоза полости рта возможно возникновение зубного камня, кариеса, гинги-

вита, парадонтита и др.

10

Микробиота желудка.

В 1 мл желудочного сока содержится менее 103 микроорганизмов. В основ-

ном это лактобактерии, сарцины и кокки, устойчивые к низким значениям рН желудочного сока. При гастритах, язвенной болезни желудка обнаруживаются спириллы рода Helicobacter, количество которых резко увеличивается при этой патологии.

Микробиота тонкого кишечника.

В верхних его отделах присутствуют те же виды симбионтов, как в желуд-

ке, в нижних отделах – как в толстом кишечнике.

11

Микробиота толстого кишечника.

Общая масса микрофлоры этого биотопа составляет от 1 до 5 кг и представлена более чем 500 видами микроорганизмов. 1 г фекалий содержит около 1011

бактерий. Более 90% фекальной микрофлоры составляют анаэробы. Наиболее значимые микроорганизмы представлены в Таблице 4.

Таблица 4 – Качественный и количественный состав микрофлоры толстой кишки у здоровых людей*

*- отраслевой стандарт «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника». ОСТ 915000.11.0004-2003, Приказ МЗ РФ № 231 от 09.06.2003.

**- представители родов Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Morganella, Providencia, Citrobacter и др.

12

До недавнего времени считалось, что кишечник новорожденного стерилен, а

заселение его бактериями происходит после рождения. В конце прошлого века появились данные о наличии в первичном кале (меконии) некоторых видов бак-

терий. В настоящее время существует доказательная база о нестерильности плода, что свидетельствует о внутриутробной бактериальной транслокации

(проникновении бактерий из кишечника матери к плоду).

После рождения процесс колонизации толстого кишечника микробами

включает четыре этапа:

Первый этап происходит от момента рождения до двух недель жизни (чаще обнаруживают стрептококки, кишечные палочки, бактероиды, клостридии и другие бактерии). При естественном вскармливании преобладают бифидобакте-

рии, при искусственном – лактобактерии.

Второй этап продолжается до введения прикорма. В этот период увеличи-

вается количество бактероидов.

Третий этап длится до завершения грудного вскармливания и характеризу-

ется повышением количества бактероидов, пептококков и пептострептококков.

Четвертый этап соответствует окончанию грудного вскармливания и со-

храняется в течение жизни.

У детей, находящихся на искусственном вскармливании, завершение фор-

мирования микробиоты кишечника происходит в более ранние сроки.

13