презы Зорникова / 13. Культуральная диагностика
.pdf
Единственный рутинный способ обнаружения исключительно живого возбудителя
Культуральная диагностика инфекционных заболеваний
Зорников Данила Леонидович, кандидат медицинских наук,
доцент по специальности микробиология
Екатеринбург, 2022
Видеозапись лекции размещена на rutube-канале https://rutube.ru/channel/23831108/
Плейлисты серии «Микробиология для медиков, 2022»
Основной смысл
•Шаг 1: инокуляция исследуемого материала на подходящую питательную среду
•Шаг 2: выделение чистой культуры микроба из подозрительной изолированной колонии
•Шаг 3: идентификация выделенной культуры микроорганизма с определением чувствительности к антимикробным препаратам
Необходимые условия для культивирования микроорганизма
•Соответствующая питательная среда
–Набор необходимых питательных веществ
–Значение pH (возможно с буферной системой)
•Соответствующий состав газовой смеси
–С атмосферной концентрацией кислорода
–С пониженной концентрацией кислорода
–С максимально низкой концентрацией кислорода (отсутствием кислорода)
•Оптимальная температура (обычно 35-37°С)
Напоминание: пять групп микроорганизмов в
зависимости от потребности в кислороде
https://doi.org/10.1007/978-94-017-9118-2_17
Микробная колония
•Видимое невооруженным глазом и произошедшее из одной материнской клетки скопление микроорганизмов на питательной среде
Типы питательных сред
•Обогащенные
–содержат питательные вещества, обеспечивающие рост многих микроорганизмов (в т.ч. некоторых труднокультивируемых)
•Селективные
–обеспечивают рост определенных микроорганизмов, подавляя рост других
•Дифференциально-диагностические
–позволяют выявлять определенные биохимические или другие фенотипические свойства микроорганизмов (используется в целях дифференцировки микробов)
•Питательные среды могут быть жидкими, полужидкими или плотными
Примеры питательных сред
•Мясопептонный бульон
•Мясопептонный агар
•Кровяной агар
•Шоколадный агар
•Кровяно-теллуритовый агар
•Сывороточный агар
•Желточно-солевой агар
•Агар Эндо
•Агар Плоскирева
•Среда Левенштейна-Йенсена и др.
Пример: HiCrome UTI agar позволяет дифференцировать большинство патогенов, вызывающих инфекции мочевыводящих путей
Тип исследуемого материала определяет
тип используемых питательных сред
•Стерильные образцы (например, кровь или ликвор)
–Обычно не содержат живых микроорганизмов у здоровых людей
–Могут содержать относительно небольшие количества патогенных или оппортунистических микроорганизмов у больных людей
–Для выделения патогена обычно используют обогащенные
питательные среды
•Образцы с высокой микробной обсемененностью
(например, фекалии, носоглоточные и вагинальные мазки)
–Содержат большие количества непатогенных и оппортунистических микроорганизмов у здоровых людей и у пациентов с патологией
–Для выделения патогена обычно используют селективные
питательные среды
Основные критерии для предварительной идентификации микроба
•Соответствующие форма, размер, цвет и другие характеристики колонии
•Соответствующая морфология микроорганизма из данной колонии при окрашивании методом Грама (для большинства бактерий) или ЦиляНильсена (для кислото-устойчивых микроорганизмов)
•Соответствующие результаты оксидазного и каталазного тестов