
Иллюстрационное пособие по общей микробиологии
.pdf
531
|
Окуляр |
|
|
Тубус |
|
|
Тубусодержатель |
|
Револьвер |
|
|
|
Штатив |
|
Объективы |
|
|
Предметный |
Корпус |
|
столик |
|
|
Конденсор |
Макрометрический |
|
винт |
||
|
||
Зеркало |
|
|
|
Микрометрический |
|
|
винт |
|
|
Основание |
Устройство светового микроскопа.
Иммерсионное масло.
Нанесение на препарат иммерсионного масла.

532
Микроскопирование препарата с иммерсионной системой.
Грамположительные (синие) и грамотрицательные (розовые) клетки при иммерсионной микроскопии.
533
Тема 3: Приготовление препарата для микроскопического исследования. Окраска препарата по Граму.
Цель занятия: Обучить студентов методике приготовления препарата для микроскопического исследования и технике окраски препарата по Граму.
Задачи занятия:
1.Освоение студентами методики приготовления препаратов для микроскопического исследования.
2.Освоение методики окраски препарата по Граму.
После изучения темы студент должен:
знать:
-правила приготовления препаратов для микроскопического исследования;
уметь:
-пользоваться световым микроскопом;
владеть:
-методикой окраски препарата по Граму;
-техникой микроскопирования с иммерсионной системой.
Справочные материалы
Приготовление препаратов. Для приготовления препарата на обезжиренное предметное стекло наносят каплю воды или изотонического раствора хлорида натрия, в которую бактериологической петлей вносят исследуемый материал и круговыми движениями петли распределяют его таким образом, чтобы получить тонкий и равномерный мазок диаметром 1-1,5 см. Если исследуют жидкий материал, то его наносят на предметное стекло непосредственно петлей и готовят мазок. После приготовления препарата петлю прокаливают в пламени спиртовки. Для приготовления препарата из жидкой микробной культуры можно использовать пастеровскую пипетку, которую после нанесения капли на стекло помещают в емкость с дезинфицирующим раствором. Приготовленные мазки высушивают на воздухе при комнатной температуре. Для ускорения высыхания препарат можно осторожно подогреть в струе теплого воздуха высоко над пламенем спиртовки. Правильно высушенный препарат имеет вид сплошного белого налета на поверхности предметного стекла.
Фиксацию препарата осуществляют физическим методом: предметное стекло медленно проводят 3 раза через пламя спиртовки.
Методика окрашивания бактерий по Граму:
1.На фиксированный препарат наносят несколько капель раствора генцианового фиолетового или помещают полоску фильтровальной бумаги, на которую наливают раствор красителя. Краситель выдерживают в течение 1-2 минут, после чего избыток красителя сливают или снимают фильтровальную бумагу.
2.Не промывая препарата, наносят несколько капель раствора Люголя и выдерживают в течение 1-2 минут до почернения препарата. Избыток красителя сливают.
3.На препарат наносят несколько капель этилового спирта (96%) и выдерживают в течение 30 секунд. После этого спирт сливают, препарат промывают водой, избыток воды сливают.


535
5
1
6
2
7
3
4 |
8 |
Этапы приготовления препаратов для микроскопического исследования.
Этапы окраски препарата по Граму.

536
Нанесение на предметное стекло воды.
Отбор культуры с питательной среды.
Фиксирование препарата.

537
Смачивание водой бумажки Синева.
Нанесение раствора Люголя.
Нанесение спирта.

538
Промывание препарата водой.
Нанесение раствора фуксина.
Промывание препарата.

539
Высушивание препарата.
Нанесение на препарат иммерсионного масла.
Микроскопирование препарата с иммерсионной системой.