ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА №1 (1 семестр) Тема Устройство светового микроскопа и техника микроскопирования. Клеточный уровень организации биологических систем

Общее увеличение микроскопа равно произведению показателя окуляра на показатель объектива. Например, увеличение окуляра х7 х увеличение объектива х8 =56 крат, т.е. общее увеличение микроскопа 56 раз. Диаметр поля зрения малого увеличения (х8) больше, чем поле зрения большого увеличения (х40). Поэтому при переводе с малого на большое увеличение необходимо проводить центровку препарата.

Изображение в микроскопе обратное. Например, если объект на микропрепарате виден в левом верхнем углу, то на предметном стекле он расположен в нижнем правом.

К осветительной части относятся: зеркало, конденсор с ирисовой диафрагмой. Зеркало имеет две поверхности – плоскую (используется при ярком освещении) и вогнутую (используется при слабом искусственном свете). Конденсором регулируют освещенность поля зрения, при его опускании – уменьшается, при поднятии – увеличивается. Диафрагма помогает регулировать количество света проходящего через конденсор на изучаемый объект.

Задание 2. Обозначьте основные детали микроскопа на рисунке:

1.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

11.

12.

13.

14.

15.

Рис. Строение микроскопа

Задание 3. Правила работы с микроскопом

Перепишите и выучите правила работы с микроскопом.

Подготовка микроскопа к работе

1.Поставьте микроскоп штативом к себе, предметным столиком от себя, примерно на 10 см от края стола (на ширину ладони).

2.Поднимите с помощью макрометрического винта объектив над предметным столиком примерно на 0,5 – 1,0 см. Откройте диафрагму, поднимите конденсор до уровня предметного столика.

Правила работы с микроскопом на малом увеличении (7 х 8)

1.Установите в рабочее положение объектив малого увеличения (х8), повернув револьвер до щелчка, фиксация объектива над отверстием в

предметном столике. Запомните, что изучение любого объекта начинается

смалого увеличения.

2.Глядя в окуляр левым глазом, направляют вогнутую поверхность зеркала на источник света, пока поле зрения не будет освещено ярко и равномерно.

3.Положите на предметный столик микропрепарат покровным стеклом вверх. Объект должен находился в центре отверстия предметного столика.

4.Переведите глаз с окуляра на объектив (смотреть сбоку микроскопа) и медленно опустите тубус с помощью макрометрического винта, чтобы объектив находился на расстоянии 2-3 мм от микропрепарата.

5.Смотрите в окуляр и одновременно медленно поднимайте тубус (только на себя) с помощью макрометрического винта до тех пор, пока в поле зрения объектива не появится изображение объекта. Запомните, что фокусное расстояние для малого увеличения равно примерно 5 мм. Далее вращая в ту или другую стороны макровинт добиваются четкого изображения.

Правила работы с микроскопом на большом увеличении (7 х 40)

1.При рассмотрении объекта на большом увеличении необходимо центрировать препарат (поместить его в центр поля зрения объектива). Для этого, глядя в окуляр, передвигайте препарат с помощью винтовпрепаратоводителей либо рукой, пока объект не займёт нужное положение. Если объект не отцентрировать, то при переводе объектива с малого на большое увеличение он окажется вне поля зрения.

2.Вращая револьвер, переведите в рабочее положение объектив большого увеличения (х40). Помните, что фокусное расстояние для объектива большого увеличения равно примерно 1 мм. Будьте осторожны! Можно

раздавить препарат и повредить объектив микроскопа.

3.Для тонкой фокусировки используйте только микрометрический винт, вращая его не более чем на пол-оборота.

Правила работы с иммерсионным объективом (7 х 90).

1.На большом увеличении центрируют интересующий участок микропрепарата.

2.Поворотом револьвера смещают объектив большого увеличение в свободное (нефиксированное) состояние.

3.На покровное стекло микропрепарата наносят каплю иммерсионного масла. 4.Фиксируют иммерсионный объектив над объектом.

5.Наблюдая в окуляр, с помощью микрометрического винта добиваются четкого изображения объекта.

6.Для зарисовки препарата смотрите в окуляр левым глазом, а в альбом правым глазом.

Завершение работы с микроскопом

1.Поднимите тубус на 2–3 см от предметного столика.

2.Переведите на объектив с малым увеличением.

3.Уберите микропрепарат.

4.При транспортировке микроскопа в шкаф, держите его правой рукой за штатив, а левой поддерживайте основание микроскопа (подставку).

Устранение ошибок, встречающихся при работе с микроскопом

1. При наведении света:

а) часть поля зрения затенена, так как объектив не зафиксирован на оптической оси микроскопа. Для устранения затенения повернуть револьвер до щелчка; б) в поле зрения видны предметы окружающей обстановки: переплеты

оконных рам, светильники). Для устранения помех опустить конденсор до исчезновения изображения предметов.

2. При переходе с малого увеличения на большое:

а) объектив упирается в предметное стекло препарата. Причина – препарат лежит на предметном столике покровным стеклом вниз; б) микроскоп не фокусируется на большом увеличении. Проверить на малом

увеличении: - центрирование объекта; -не положен ли препарат покровным стеклом вниз.

Задание 4. Сравнительная характеристика про- и эукариотической клеток

Заполните табл.1, указав особенности строения прокариотических и эукариотических клеток.

Задание 5. Временные микропрепараты клеток растений

Микропрепарат - это биологический или иной объект, заключённый в капле воды или канадского бальзама между покровным и предметным стеклом. Препараты бывают временными и постоянными.

Временный микропрепарат - исследуемый объект заключённый в капле воды между предметным и покровным стеклом.

Постоянный микропрепарат – биологический объект, прошедший фиксацию «предохранение от разрушения ткани», окрашивание на выявление различных структур и локализацию химических компонентов клетки,

просветление толуолом или ксилолом и заделку в канадский бальзам. Постоянные микропрепараты хранятся в специальных закрывающихся коробочках, защищающих их от света и случайных механических повреждений. Постоянные микропрепараты хранятся длительное время.

Изучите строение эукариотических клеток на примере:

А) Клетки пленки лука

Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1-клеточную стенку; 2-цитоплазму; 3-ядро; 4-ядрышко; 5-вакуоль

\

Б) Хлоропласты в клетках листа элодеи

Зарисуйте несколько клеток при большом увеличении микроскопа и обозначьте: 1-клеточную стенку; 2-цитоплазму; 3-хлоропласты

Задание 6. Клетки клубня картофеля

Скальпелем сделать тонкий срез (или соскоб) с поверхности клубня картофеля и поместить его на предметное стекло в каплю водной настойки йода (йод – качественный реактив на крахмал, поэтому зёрна крахмала окрашиваются в синий цвет). Накрыть покровным стеклом. Изучить и зарисовать на большом увеличении микроскопа. Обратить внимание, что при соскабливании (а не срезе!) клетки клубня картофеля могут разрушиться и поэтому клетки в микроскопе не всегда видны, а наблюдаются крахмальные зёрна.

Рис. Клетки клубня картофеля ок.7х об.40

Рис. Клетки клубня картофеля ок.7х об.40

Задание 7. Постоянные микропрепараты клеток крови человека и лягушки

Изучите постоянные микропрепараты на примере крови человека и лягушки. Зарисуйте и запишите различия между микропрепаратами.

Задание 8. Электронограммы органоидов эукариотической клетки

Изучите на электронограммах строение органоидов эукариотической клетки и определите эти органоиды (табл. 2).

Таблица 2 Электронограммы органоидов эукариотической клетки

4.

5.

6.