Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Техника безопасности при работе в лаборатории. Классификация и номенклатура ферментов

.pdf
Скачиваний:
6
Добавлен:
23.06.2023
Размер:
187.58 Кб
Скачать

Техника безопасности при работе в лаборатории. Классификация и номенклатура ферментов.

1.Техника безопасности при работе в лаборатории

Во время работы следует соблюдать порядок, чистоту и аккуратность

Работы в лаборатории должны проводиться в халатах, а при необходимости – с использованием соответствующих индивидуальных средств защиты.

Запрещается: пробовать на вкус любые реактивы, пить, есть в лаборатории, за пределами специально отведенных для этого мест.

Использованная посуда должна сразу после проведения анализов мыться или складываться в специально отведенном месте для грязной посуды во избежание её повторного использования.

Во время нагревания жидких и твердых веществ в пробирках и колбах

нельзя:

o направлять их отверстия на себя или других людей.

oзаглядывать сверху в открыто нагреваемые сосуды во избежание возможных травм при выбросе горячей массы из сосуда.

Брать в руки сосуды с любыми веществами и реагентами следует одной рукой за горлышко, а другой – аккуратно поддерживая сосуд снизу за дно.

Нюхать вещества можно, лишь осторожно направляя на себя пары или газы легким движением руки, но ни в коем случае не наклоняясь к сосуду

ине вдыхая пары (газы) полной грудью.

Пролитые жидкие вещества (реагенты), обладающие опасными свойствами, следует немедленно нейтрализовать (например, пролитые едкие вещества необходимо засыпать песком, удалить, место разлива промыть водой), посуду тщательно обезвредить и очистить, запачканную одежду – обезвредить.

При использовании для дозирования жидких реактивов пипеток категорически запрещается затягивать реактивы в пипетки ртом.

Категорически запрещается уже отмеренные реактивы сливать (высыпать) обратно в сосуды, из которых их отмеряли.

Легковоспламеняющиеся вещества запрещается помещать в термостат.

При работе с едкими веществами необходимо пользоваться индивидуальными средствами защиты (перчатки, защитные очки).

Запрещается приливать воду к кислоте.

При работе с едкими и летучими веществами запрещается пользоваться контактными линзами.

Запрещается выливать в раковины концентрированные растворы щелочей

икислот, органические растворители, легковоспламеняющиеся, горючие

ивзрывоопасные вещества, щелочные металлы. Все указанные отходы должны обязательно собираться в специальные ёмкости.

При эксплуатации приборов и аппаратов следует руководствоваться инструкциями и правилами, изложенными в их техническом паспорте и руководстве по эксплуатации.

В процессе эксплуатации аппаратуры должна быть исключена возможность её падения. Запрещается прикасаться к движущимся и вращающимся частям используемого оборудования.

Все электрические приборы должны быть заземлены, если отсутствие заземления не предусмотрено их конструкцией. По возможности следует избегать использования удлинителей.

Электроплитки и иные электронагревательные приборы должны быть размещены на термоизолирующем материале.

Недопустимо оставлять во включенном состоянии без присмотра электронагревательные приборы, за исключением тех, что по своему предназначению и конструкции предназначены для круглосуточной работы.

Требование безопасности в аварийных ситуациях:

При воспламенении в помещении следует воспользоваться средствами противопожарной защиты (песок, огнетушитель), которые находятся в учебной комнате 21 и коридоре.

Загорание в помещениях лаборатории необходимо немедленно ликвидировать, при этом:

oлегковоспламеняющиеся и горючие жидкости, электропроводку и оборудование, находящееся под напряжением, следует гасить ТОЛЬКО ПЕСКОМ, огнезащитной тканью или ПОРОШКОВЫМИ огнетушителями.

oОбесточенные электропроводку и приборы можно гасить водой.

Загорание в вытяжном шкафу ликвидируется первичными средствами пожаротушения ТОЛЬКО ПОСЛЕ ОТКЛЮЧЕНИЯ ВЕНТИЛЯТОРА.

План эвакуации сотрудников при возникновении пожара и иных чрезвычайных ситуаций, требующих немедленно покинуть помещение размещен в коридоре.

Требование безопасности по окончании работы:

По окончании работ необходимо проверить отключение электроприборов, закрытие газовых и водопроводных кранов.

Все химические вещества, представляющие опасность должны быть убраны в места их постоянного хранения.

Номенклатура и классификация ферментов

Любой фермент имеет два названия: рабочее – удобное в использовании и систематическое, применяемое для идентификации фермента.

Рабочее название фермента состоит из названия субстрата, к которому присоединяется окончание (суффикс) «аза». Так, фермент, ускоряющий гидролиз крахмала, получил название амилаза (лат.: amylum - крахмал), гидролиз жиров - липаза (греч.: λίπος - жир) , белков (протеинов)- протеаза и т. п. Однако, для некоторых ферментов сохранилось тривиальное название: пепсин, трипсин.

В 1961 году Международный союз по биохимии разработал систематическую номенклатуру, согласно которой все ферменты на основании катализируемых реакций разделены на шесть классов, расположенных в следующем порядке:

1)

оксидоредуктазы,

2)

трансферазы,

3)

гидролазы,

4)

лиазы,

5)

изомеразы,

6)

лигазы (синтетазы).

Каждый класс подразделяется на подклассы, а каждый подкласс - на подподклассы. Индивидуальный фермент имеет кодовое число (шифр) со стоящими перед ним буквами КФ (англ. ЕС). Шифр каждого фермента содержит четыре числа, разделенных точками. Первое число указывает к какому из шести классов принадлежит данный фермент. Второе число обозначает подкласс. Третье число обозначает подподкласс, а четвертое - порядковый номер фермента в данном подподклассе.

Например, фермент КФ.1.1.1.1 имеет рекомендуемое (рабочее) название алкогольдегидрогеназа, систематическое название алкоголь:НАД оксидоредуктаза. Этот фермент относится к классу оксидоредуктаз (1), действует на СН ОН группу доноров (1.1), акцептором водорода служит НАД (1.1.1); четвертая цифра шифра - порядковый номер фермента в пределах подподкласса.

Классы ферментов:

1. Оксидоредуктазы - ускоряют ОВР с участием двух субстратов. Название фермента:

систематическое: донор : акцептор-оксидоредуктаза рабочее: субстрат +тип реакции+аза.

В состав данного класса входят подклассы:

Подкласс

Пример

 

 

Дегидрогеназы

(ДГ): Катализируют реакции дегидрирования:

(реакции

 

дегидрирования)

 

 

Рабочее название: название донора атомов водорода

 

+ дегидрогеназа: малатдегидрогеназа

 

Систематическое: малат:НАД+-оксидоредуктаза

 

 

Редуктазы:

Восстановление -связи:

(реакции

восстановле-

RCH=CH-СООН +2H -редуктаза-> RCH2-CH2R

ния с участием

атома

Рабочее название - название субстрата+редуктаза:

водорода)

 

 

еноилредуктаза

 

 

 

Оксидазы:

 

реакции окисления

(осуществляют

 

О2+4Н+ +4е -цитохромоксидаза->2О

перенос электронов на

 

кислород)

 

 

 

 

 

 

Оксигеназы

 

Если в субстрат внедряется:

(кислород

внедряется

один атом кислорода-моно-оксигеназы (гидроксилазы)

в субстрат)

 

RH+1/2O2 -гидроксилаза->ROH

 

 

 

два атома кислорода – диоксигеназы:

 

 

 

RH2+O2 -диоксигеназа->R(OH)2

 

 

 

Цитохромы

(cit)

Транспорт электронов

(переносят электроны)

Цитохром с-е->Цитохром аа3

 

 

 

 

2. Трансферазы (ТФ)- катализируют реакции переноса групп атомов от донора к акцептору.

Название фермента:

систематическое: донор : акцептор + переносимая группа + трансфераза рабочее: донор+переносимая группа + трансфераза.

В состав данного класса входят подклассы:

Подкласс

Пример

 

 

Аминотрансферазы

перенос аминогрупп:

(АТ)

RNH2+R`H<- аминотрансфераза ->RH + R`NH2

 

 

метилтрансферазы

перенос метильных групп

 

RСH3+R`H<- метилтрансфераза ->RH + R`СH3

 

 

киназы

перенос остатков фосфорной кислоты от НТФ

(фосфотрансферазы)

(реакция фосфорилирования):

 

ROH + ATФ –киназа->ROPO3H2+АДФ;

 

 

3. Гидролазы - ускоряют реакции гидролиза сложных веществ.

Название фермента:

систематическое: название субстрат + тип связи + гидролаза рабочее: название типв связи + аза

Делят на подклассы по типу гидролизуемой связи.

Подкласс

Пример

 

 

пептидазы

гидролиз пептидных связей

 

белок+Н2О-пептидаза-> пептиды

 

 

гликозидазы

гидролиз гликозидных связей

 

мальтоза +Н2О -мальтоза-> 2глю

 

Систематическое мальтозогликозидгидролаза

 

 

эстеразы

Гидролиз сложноэфирных связей:

 

Эфир холестерина +Н2О -холестеролэстераза-> холесте-рин+ВЖК

 

 

фосфатазы

Гидролиз эфиров фосфор-ной кислоты:

 

Глю-6-Ф+H2O –глю-6-ф-фосфатаза-> глю + Н3РО4;

 

Систематическое: Глю-6-ф-фосфогидролаза

 

 

4. Лиазы - ускоряют негидролитическое отщепление групп атомов с образованием новой связи или присоединение групп атомов без участия макроэгра. Систематическое название – название субстрата: название удаляемой группы + лиаза.

Рабочее название – название удаляемой группы + аза.

Подкласс

Пример

 

 

Декарбоксилазы

отщепление СО2:

 

гистидин-гистидиндекарбоксилаза-> гистамин+СО2

 

 

Гидратазы

присоединение Н2О

 

Фумарат+Н2О -фумараза-> L-малат

 

 

Синтазы

АсКоА+оксалоацетат -цитратсинтаза-> цитрат

 

Рабочее название: название продукта +синтаза

 

 

5. Изомеразы - катализируют взаимные превращения изомеров: Систематическое название - название субстрата : продукта + изомераза

Рабочее - название субстрата + изомераза.

Подкласс

Пример

 

 

изомеразы

взаимопревращение классов (аль в он):

 

глюкозо-6-фосфат <- фосфолюкоизомераза->фруктозо-6-фосфат

 

 

мутазы

перенос групп внутри молекулы:

 

глюкозо-6-фосфат <-фосфоглюкомутаза->глюкозо-1-ф

 

 

эпимеразы

Взаимопревращения эпимеров:

 

Рибулоза-5-фосфат <-эпимераза-> ксилулоза-5-фосфат

 

 

6. Лигазы (синтетазы) - катализируют реакции присоединения с участием макро-эрга.

Систематическое название - название субстратов + лигаза + источник энергии. Рабочее название – название продукта реакции + синтетаза.

L-глутамат + NH4+ + АТФ -> L-глутамин + АДФ + Фн

Систематическое: L-глутамат: аммиаклигаза (АТФ → АДФ + Фн) Рабочее: глутаминсинтетаза.