диссертации / 60

полудесмосэпитевгэтойпластинкиубьцитов,мпер,есекая

направляютсятонкиеякорныефиламенты.

Темнаяпластинка

— толщина50

-60нм,представляетсобой

мелкозернилиф брсл,иколлясйрастоыйпоныйдложен

светлпластинкойбращ

енвсторонусоединительнойткани.В

пластинкувплетаютсяякорныефибриллы,имеющиевидпетель

(образовколлVIIтипа)Тг.ныепластинканоммнаясостоитизколлагена

IV,энтактина,

атакже

гепарансульфата.

КоллагенIV

типаобеспечивает

механипрочноескую

стьмембр.Энтсаныктин

вязываетмеждусобой

ламинины,они

представляютсобойгликсостизα1,αо2,ящиетеиды

α3,α5,β1,β2,γ1цепей,инаходяпровстбяжсяейременностивнии

базальноймембране, исключениемпериодаформированияновых

ворсин[

25,

108]. Такжеламининыбазальнмембранытрофобластай

обеспечиваютвязьсэкстравиллезнымЦТ[109].

Гепарансульфат

участвуетклеточнойадгезииобладаетангигеннымисвойствами.

Ретикулярпластинкаая

— состоитизретикулярволоконых

соединительнойтк

ани,которыесвязанныякорнымифибриллами.

Вгестационномсроке3

-4-инеделибазальнаямембрана

представлколлагенома

IV типа,ввидетонкой,прерывистойнити

неравнометолщины,котосреднемсоставиланойая0,17±0,007мкм[8].

На5 -6-йнедееетолщинасоставляетях0,21мкм., ±0,013

7 - 9

недель

гестации - это волокли,состниизстаякоящаяллагена

IV

типа,

толщинойсоставляет0,23±0,21мкм. Кконцу[8]вто. риместраого

беременносэпителиябазальнаямембрана

составляет0,

30±0,022мкм..

В

доношенплацепроисходитслияниеойтебазальныхмембран

трофобластэпителическогоя

ибазальмембрэндотелияойкапилляраны.

Взоне

синцитио-капиллярных мембран

толщина базальной мембраны

составлясинцитио0,21внзоные±0,017,

-капиллярныхмембран

-

0,46±0,024мкм. [8].

31

эмбриона и плода

Увсехмлекопитающпитаниебластоцвначалеистых

осущегист,когдаиотрофновляетсяфагоцитируетобластсекрет,

продуцируемый маточныжелезамипридо8 ерно

-йнедели[44]После.

имплантацвлениястанхориоаллаплаценалаживаетсятыо сной

транзитгемохориальпитания,которыйустанмеждуогоавливается

матерьюиплодом.Учеловекаэтотпроцессинвазирвной

оды

реализуетсятольковконце

I триместра.Вовремяраннейбеременности

материнсбелкиизбирательноккумулируютсяиевжидкость

экстраэмбриональногоцел,котораявдальнейшемматранспортируется

плодучерезвторичныйжелточныймешок.Гисттипотрофный

итания

обеспечиваетплвремяд

I триместра,причемэтотобменпроисходит

при низкойконцентрациикисл.П казанорода

,чтовсрокедо10

-12

недельгестациинапряженнкислорвматеринскойплазме,дасть

окружающейхориальворсинки,ме ыеее

20 mm Hg,чт оуменьшаетрискраннихоксидантныхповрежденийво

времяответственпериодаорганогенеза.Затемогоапряженность

кислорповышд 40дается

-80 mm Hg иостаковойетсятечение

следвухтриместровующих[91,Этиданные105, 167].

согласуются

болееранн

ими

работами,авткоторых

спомощьюкислородного

электродаизмепа илициавплениеьноеацентарнойткани

I

триместрабеременуста,чтвносроке8вилисти

-10недельгестации

уровенькислородаплацентенизкий, 12

-13неделямувеличивается,что

,

по-видимому,связаноначаломнепрерывматочного

-плацентарного

кровотока [152].

Гемохориатиппитаниястановитсягльныйавнымво

II

триместребеременности,когдаматочно

-плациркуляцияентарная

стабилизируется[44]

.Несмонадостприведенряоверность

ныхфактов,

32

онсопоставленыидинразвитмикойворсдереваплацентыянчатого

истроениемэпителворс. ян

Анализ литературныхданныхпоказал,

чтоизучениюплаценты

посвященомножесработкакотечественныхво,такизарубежных

ученых.Новсеэтиисследованияимеютфрагментарныйхарактер:

изучаютсяотдельныекомпонеплацент,чащевсегобсстызыналок

гестацвозраст,либоуказоннпостываетсяй

менструальныйрок

беременностидажедляплацент

I триместра,ч о переводагобует

постовуляционсрок,частоиспользуютграколичествониченноеый

методик,чтонедаетполногопредставленияморфологической

дифференцировке эпитеворслиацентыя

всвязименяющимися

потребностямиэмбриона,впоследствплода.Этозначиительной

мерезатрудняетсозданиецелостно

гопредставленияоб

особенностях

морфологической структуры эпитеворслацентывия

разныепериоды

физиологическойбеременности

,

ин епозволяетточнооценитьпатологию

плацентразличныхакушерских

осложнениях.Все

вышеперечобусловилиыеаспектынашнткдаепроблеменнрес.ой

Глава2М.

АТЕРИМЕТОДЫИССЛЕДОВАНИЯАЛЫ

2.1. Группы исследуемого материала

Длярешенияпостзабылидачвленныхсобраныматериалы

медицинскихабортовуздоровыхженщин,пожелавшихпрервать

беременаразсрокахн.Особоеностьыхвниманиеобруточнениещали

гестационсрока.Подборжеосущеснщиноговсооствлялиетствии

клиническимипротивопоказаниями.Дляуточнения

гестационногосрокапередмедицинскимабортом

у женщинспомощью

УЗИопртемяделяли

-копчиковразэмебКТРр)иы(еона

рассчитывалимен труальныйрокминуснедели2 .

1группа

– 10наблюдраннле енийго

карственногоаборта

помощьювведенияженщинампрепаратаМиф« »в 4 гинд(.е)дли

послеплодотворения(..);выкидышпроисходилчерез1

-2сутокобычно

ввидецелогохориальногомешка.

2группа

– 10наблюдраннлекарнийгоабортаственного

помощью введенияженщинампрепаратаМиф« »в5..о.последгин

предварительногоУЗИэмбриона.

3группа

– 9наблюдениймедицинскихаборпувакуумтемов

-

экстраисосизполостикцииобаматкуздоровыхженщиннанед6.п..

Уточнениесрокапроповыяводилени

июэритробластовядерных(

эритроцитов)узкихкапиллярах[10].

4группа

– 8наблюданалогмедицинскихабортовчйна7ых

нед.п.о.Уточнениесроковповыявлпервыхб зъядернию

ных

эритроцитовкапиллярах[10

].

5группа

– 9наблюданалогмедицчныхй

инскихабортовна8

нед.п.о.Срокуточнялипопреобладаниюбезъядеэритв ныхоцитов

капиллярнойсетиворсин.

6группа – 10наблюдений9

-10нед.п.о.СрокуточнялипоУЗИ

разэме.брионаов

34

7группа

– 11наблюпозмеденийабортовцинскихна18

-24

недбеременностиляхпостменструальный( срок,..)здоровыхженщин

помедицинскпоказаниямпомощьювведпрепарЭнзапростния« » та

воколво. плодныеды

8группа

– 9наблюденийсамостоятельныхродовсроке39

-40

особенностямивзятияматериала.Вчастности,в1

-ойи2 -ойгруппахцелые

хориальныемешкипомещаливфизиологическийрастворчашкахПетри,

гдевизуальновыявлял

игладкхорснебольшимйонколичеством

генерацийотходящихворсинветвистыйхорион

– противоположный

маркировкой.Спо37

-уюгруппыматериалсоскобапредварительно

отмыкровиыборочноализабиралифрагменты,напоминающие

«икру»,т.е.ворсиныплаценты.В 7

- 8-ойгруппевыдцелыеяли

плаценты,изкоторыхзабитканьизраучастковлизныхменее7

-8

кусочков.Забор

сочковтканиплаценты,размеромх1,0х0,5см0,5

осущизцествлялипарацентральной, краевойчастей.Кроме

тодин, гокусочекбралихориальнойпластинкой,другой

– с

материнскойповерхности.

парафин.Изпарафинблокготсрезыовтолщинойилиых5

-6мкми

Дляэлектронно

-микросследованиякопического

отбиралипо5

случаев

изкаждойгруппы

плацент.Вырезаликусочки1

мм³,

префиксировали их в2,5%раствореглутаровогоальдегиданафосфатном

буфере,промывалидофиксировали1%раствчетырехокисиосмия,

контрастироваликусочкахуранилацп слебезвоживаниятатом

заливалисмесьэпонааралди.Ульсрезытконтрастировалиоматонкие

цитратомсвинцапометодуРейнольдса

ипросматривалиэлектронном

микроскопе«

Jem – 100B»празличныхувеличениях.

2.4. Иммуногистохимический метод

Иммуногистохимисследованвыполнялина ческое

депарафинизированныхсрезахнепряиммуноперымметодом. ксидазным

Для характеристотдельныхкомпонэпиворскителнтовия

исполедующантителаьзовалитехнологическиедетал

и:

1. АнтителопротивплацентарчнойщелфосфатазыПЩФ( )для

выявлениящеточнойкаймы(

Novocastra,клон RTU - PLAP-8А9).

2. Антителопротивβсубъедхоригонницическадотрогопина

человека(

β-ХГЧ)всинцитиотрофобластеворсин

(Novocastra NCLHCGp)

(послевоздействиятрипсина);

.

3Маркер. (

Ki67)длявыявленияпролц ферациитотрофобласта

(Novocastra,клонММ1).

Длядемантигенскирстеклсосрезамивнаниягревали

микроволновойпечис0,01М(

pH 6,0)цитратнымбуфернымраствором

течениемин10

утпримощностиВт450ПЩФ(),затемпоследоливки

буфераеще10минпримощности300Вт(

Ki – 67,β

-ХГЧ)Дляподавления.

активностиэндогеннойпероксидазысрезыинкубм10.0,5%нровали

растворомперекисиводоропредотвращения,для неспецифической

(ПЩФ,

Ki – 67)имин30.β(

-ХГЧ).

Послекаждпроцедурыбрай

ботки

срезыпромывали

TBS

(Трис -буфере)

pH 7,6втечение2

-5мин.

Инкубациясвтор отинилированнымичнымиантителамипри

комнатемпвтенойчениературемин10.Длявизуализациииммунной

реакциииспользовали3,3

– диаминобсистдетекцинзидмуиновую

(СубстратнаясистемаDABПлюс/ DABЗатемPlus Substrate System).

докрашивалисргематоксилиномзыМайера.

Степеньокрашивания

оценивалибаллах

(Рис. 2) ,к ак

отрицательнуюнегативную( ) (0

), слабую(1),умеренную(2)ивыраженную

(3).

«-»

«+»

«++»

«+++»

Рис.1Шкаладля. оценкииммуноэкспрессиивбаллах.

2.5. Морфометрический метод

Спомощьюикроскопа

Leica DM 2500сцифровойотокамерой

изображворспрувиенличении

х100передавалосьнаэкран

компьютера.

Попрограмме

Adobe Photoshop Cs3

Extended проводили

морфометричеоценкуновыхгенерацийворсинпоперечномкую

сечении,аимеворсинебольшокруглойнодиаметра, илив льной

формы,определяли: по1)внешконтуруэпителиальногоемупокрова

–

площадьворсинмкм²();повнутреннему2)

егок нтуру

– площадьстромы

(мкм²);поих3)разнице

– площадьэпителиямкм²().

Рис. Схема2.

в

2.6.

былипровенаноренымальность

при

-Смирнова программе

Statistica

ворсиннакаждыйгестационныйсрок.

,

,

Всравнивагруоппахемыхделяли

среднюю

m), при

t-

,а р

ющемсяот

,

критерийМанна

-Уитни.Разлсчичиятали

при

подсчетаих на

,

в

омпро,счеткойтранстве

кайми

-либопризнаковстромы

и

,

мел.

Ki – 67

38

Наданнсрокех риальныемешкипредставлялисобой

центральнуюсвободнуюполосостенкой, тьостоящейиз

экстраэмбмезенхимыввидерыхлорасположенныхиональнклет йк

длиннымиотростками,соединявшимиэтиклеткидругдругом.Изнутрик

мезенхимеприле

галамниотическаямембрана,такжеотд льные

фрагментыжелточногомешкаиэмбриона.Снаружистенкахор ального

мешкапредставленаотходящимивыростамимезенх,которыемы

покрытыдвухслойнымтрофобластическимэпителием,тоесть

вторичнымиили

езенхимальнымиворс(.ис3нами

А)Приизучении.

хорионавыявлечеткаязколичницагенвторичныхествераций

ворсгладкветвистомн отдме.Есшкалевглахорионедком

ворсиныбылипредставленылишь2

-3генерациями,товветвистом

хорионенасчитывалось

4-5генерацийвторичныхворспр знакам

и

васкулогенезастр(.омеис3

Б)Особое. внимабылообрнаиещено

структурутрофобластэпителворсдансрокеического,средняяом

площадькоторого

составила4863±248р>0,05) ((

табл.

2).

Вструктурном

отношениитрофобластворс н

мелдвухслойное

строениеРис. ( 4

А)сосплошнымповерхностнымслоем

синцитСТ)итесноотр(распофобластак еткамиоженными

цитотрофобластаЦТ().

Важноотметить,чтона4

-ойнеделегестациивСТвыявляются

локальныескопления

дер,такназываемыесинтициальныепочки.Также

Б

Рис. 3.Ворсинчатоедерево

плаценты нанеделеп4

осле оплодотворения.

Окраскагем

атоксилиномэозиномх

200:,

А - стенкахориального

мешка→()с2

-3-ягенерацмелкворсинямих

состглхорионадкогове;

Б - группаболеекрупныхстенкиального→),(

составляющаяветвистыйхорион.

200 200

40