диссертации / 25
.pdf161
У потомства крыс 17-й группы количество эритроидных клеток не отличается от
14-й и 15-й группы. Поступление альфа-токоферола во время патологической бе-
ременности не предотвращает снижение описываемого показателя по сравнению с 14-й группой. В тоже время, достоверно возрастает содержание клеток эритро-
идного ряда (32,8 ± 1,59 %) в красном костном мозге крысят 16-й группы под вли-
янием оксида азота.
Содержание эритроидных клеток в красном костном мозге на 30-й день постнатального периода развития крысят имеет сходные значения во всех экспе-
риментальных группах.
Как показало исследование интенсивности кроветворения в печени плодов,
НМПК вызывает возрастание активности эритропоэза в этом органе у плодов (см.
табл. 26, 27, рис. 34). Так количество эритроидных элементов в печени у потом-
ства с ЗВУР составляет 29,8 ± 1,35% и достоверно превышает этот показатель
(26,2 ± 1,02%) у плодов группы контроля. Значения исследуемого показателя у других групп не отличаются от интактных плодов.
Эритропоэз в печени крысят после НМПК на 2-й день жизни также остается более активным, как и плодов, составляя 23,5 ± 1,52%, в сравнении с его выра-
женностью у животных 14-й группы (19,2 ± 1,37%). В тоже время, под влиянием
«Депонит-10» у крысят 16-й группы отмечается усиление кроветворения в пече-
ни. В этой экспериментальной группе содержание клеток эритроидного ряда со-
ставляет 24,7 ± 1,99%, тогда как в контроле он находится на уровне 19,2 ± 1,37%.
Укрысят 18-й и 19групп показатели не отличаются от контрольных значений.
К15-му дню постнатального развития интенсивность эритропоэза в печени крысят, развивавшихся в условиях НМПК, снижается по сравнению с его актив-
ностью у животных группы контроля (от 2,24 ± 0,36% до 1,06 ± 0,26%). К тому же, использование «Депонит-10» вызывает снижение концентрации эритроидных клеток в печени крысят 17-й группы до 1,07 ± 0,25%, при их содержании в печени интактных крысят 2,24 ± 0,36%.
|
|
|
|
162 |
|
|
Печеночное кроветворение на 30-й день развития крысят практически от- |
||||||
сутствует, не достоверны все межгрупповые различия в его интенсивности. |
||||||
290 |
|
|
|
|
|
|
% |
|
|
|
|
|
|
240 |
|
|
|
|
|
|
190 |
|
|
|
|
|
НМПК |
140 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
К+Д |
90 |
|
|
|
|
|
|
40 |
|
|
|
|
|
НМПК+Д |
* |
* |
* |
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
-10 |
|
|
|
|
|
|
|
пл. 22 д. |
2 д. |
15 д. |
30 д. |
|
|
-60 |
|
|
|
* |
* |
|
100 |
|
|
|
|
|
|
% |
|
|
|
|
|
|
80 |
|
|
|
|
|
|
60 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
НМПК |
40 |
|
|
|
|
|
|
|
|
* |
|
|
|
|
20 |
* |
* |
|
|
|
К+ТФ |
|
|
|
|
|
||
0 |
|
|
|
|
|
|
|
пл. 22 д. |
2 д. |
15 д. |
30 д. |
НМПК+ТФ |
|
-20 |
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
-40 |
|
|
|
|
|
|
-60 |
|
|
|
* |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Рис. 34. Содержание эритроидных клеток в печени у 22-х дневных плодов и |
||||||
2-х, 15-ти, 30-ти дневных крысят 15-й (НМПК), 16-й (К+Д), 17-й (НМПК+Д), |
||||||
18-й (К+ТФ), 19-й (НМПК+ТФ) групп по сравнению с 14-й группой. * - до- |
||||||
стоверное отличие от контрольных значений (р < 0,05). |
|
|||||
163
У потомства белых крыс изучение активности процесса эритропоэза в селе-
зенке выявляет отсутствие межгрупповых различий в интенсивности процесса во все периоды наблюдения (см. табл. 26, 27).
Таблица 26
Содержание эритроидных клеток у плодов и крысят, развивавшихся
вусловиях НМПК на фоне поступления «Депонит-10»,
вкрасном костном мозге, печени и селезенке
|
|
|
Группы |
|
||
Показатели |
Возраст |
|
|
Контроль |
НМПК |
|
|
|
Контроль |
НМПК |
+ |
+ |
|
|
|
|
|
«Депонит» |
«Депонит» |
|
Эритроидные |
22 дн. плоды |
6,00±0,98 |
8,72±0,69* |
8,23±0,91 |
9,56±0,71* |
|
клетки красного |
2 дневные |
15,6±1,36 |
23,7 |
18,7±1,32 |
14,3±1,32# |
|
|
|
±1,32* |
|
|
||
|
|
|
|
|
||
костного мозга |
15 дневные |
25,5±1,28 |
20,1 |
32,8 |
22,9±1,33 |
|
(%) |
|
|
±0,07* |
±1,59* |
|
|
30 дневные |
34,8±2,02 |
35,3±2,01 |
38,1±1,79 |
36,9±1,77 |
||
|
||||||
Эритроидные |
22 дн. плоды |
26,2±1,02 |
29,8 |
25,3±1,11 |
27,4±1,16 |
|
клетки |
|
|
±1,35* |
|
|
|
2 дневные |
19,2±1,37 |
23,5 |
24,7 |
21,7±1,30 |
||
|
||||||
печени (%) |
|
|
±1,52* |
±1,99* |
|
|
|
15 дневные |
2,24±0,36 |
1,06±0,26* |
1,50±0,29 |
1,07±0,25* |
|
|
30 дневные |
0,07±0,07 |
0,14±0,10 |
0,07±0,07 |
0,27±0,15 |
|
Эритроидные |
22 дн. плоды |
31,6±1,14 |
29,4±0,99 |
30,3±1,53 |
32,5±1,40 |
|
клетки |
2 дневные |
27,6±1,27 |
27,1±1,46 |
26,1±1,30 |
25,9±1,50 |
|
15 дневные |
17,3±0,98 |
15,2±0,94 |
19,5±1,56 |
18,7±1,70 |
||
|
||||||
селезенки (%) |
30 дневные |
8,1±1,03 |
7,1±0,85 |
6,7±0,93 |
6,8±0,88 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Примечание: * - достоверное отличие от контрольных значений, # - достоверное отличие НМПК+Депонит от НМПК (р < 0,05).
164
Таблица 27 Содержание эритроидных клеток у плодов и крысят, развивавшихся
вусловиях НМПК на фоне введения альфа-токоферола,
вкрасном костном мозге, печени и селезенке
|
|
|
Группы |
|
|
Показатели |
Возраст |
|
|
Контроль |
НМПК |
|
|
Контроль |
НМПК |
+ |
+ |
|
|
|
|
токоферол |
токоферол |
Эритроидные |
22 дн. плоды |
6,00±0,98 |
8,72±0,69* |
5,93±0,80 |
8,27±0,58* |
клетки красного |
2 дневные |
15,6±1,36 |
23,7 |
15,5±1,15 |
20,7 |
костного мозга |
|
|
±1,32* |
|
±0,55*# |
(%) |
15 дневные |
25,5±1,28 |
20,1 |
24,6±1,48 |
21,9±1,02* |
|
|
|
±0,07* |
|
|
|
30 дневные |
34,8±2,02 |
35,3±2,01 |
34,1±1,90 |
33,6±1,95 |
Эритроидные |
22 дн. плоды |
26,2±1,02 |
29,8 |
26,8±1,07 |
29,9±1,37* |
клетки |
|
|
±1,35* |
|
|
печени |
2 дневные |
19,2±1,37 |
23,5 |
19,1±1,21 |
23,2±1,46 |
(%) |
|
|
±1,52* |
|
|
|
15 дневные |
2,24±0,36 |
1,06±0,26* |
2,36±0,37 |
1,33±0,28 |
|
30 дневные |
0,07±0,07 |
0,14±0,10 |
0,14±0,09 |
0,14±0,09 |
Эритроидные |
22 дн. плоды |
31,56±1,14 |
29,38±0,99 |
31,1±1,12 |
28,5±0,89 |
клетки |
2 дневные |
27,64±1,27 |
27,14±1,46 |
27,7±1,35 |
28,8±1,59 |
селезенки |
15 дневные |
17,33±0,98 |
15,18±0,94 |
17,7±1,18 |
2,36±0,37 |
(%) |
30 дневные |
8,06±1,03 |
7,14±0,85 |
27,0±1,55 |
25,9±1,81 |
Примечание: * - достоверное отличие от контрольных значений, # - достоверное отличие НМПК+Токоферол от НМПК (р < 0,05).
Активность клеточных механизмов эритродиереза у крысят после НМПК на
15-й день жизни значительно повышается (табл. 28, 29, рис. 35). Уменьшено чис-
ло макрофагов без эритроцитов от 80,1 ± 2,75% до 47,3 ± 4,76%, возрастает про-
цент розеток 1-го типа от 18,7 ± 2,57% до 36,6 ± 2,51%, 2-го типа от 1,00 ± 0,38%
до 14,6 ± 1,97%, 3-го типа от 0,07 ± 0,07% до 1,40 ± 0,47%. ИАФА увеличивается более, чем в 5,5 раз. Использование «Депонита-10» у 17-й группы снижает актив-
ность перитонеальных макрофагов по сравнению с 15-й группой (МФ0 становит-
ся 69,0 ± 3,30%, МФ1 - 28,7 ± 2,77%, МФ2 - 2,14 ± 0,95%, МФ3 -0,21 ± 0,15%, ин-
тегральный показатель меньше на 71%), но уровня контроля она не достигает. У
крысят, развивавшихся в условиях дефицита кислорода на фоне введения альфа-
токоферола показатели клеточного эритродиереза меньше, чем у крысят после
165
НМПК (МФ0 составляет 67,9 ± 3,98%, МФ2 - 3,50 ± 1,11%, МФ3 – 0,07 ± 0,07%,
ИАФА ниже на 66%), но уровня контроля также не достигают. Адгезионная ак-
тивность у 16-й группы не отличается от контроля. Эритрофагоцитоз у крысят 18-
й группы повышен (уменьшен МФ0 до 63,0 ± 4,91%, увеличены МФ1 до 33,4 ± 4,34%, МФ3 до 0,64 ± 0,22%). Интегральный показатель фагоцитоза больше кон-
трольного на 189%.
600 |
|
|
|
|
* |
|
|
|
|
% |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
500 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
400 |
|
|
|
15 д. |
|
|
|
||
300 |
|
|
|
|
|
|
|
||
* |
|
|
|
|
200 |
|
|
30 д. |
|
|
|
|||
|
|
|||
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
* |
|
|
|
100 |
* |
|
|
|
|
|
|
|
0 |
|
|
|
|
|
|
НМПК |
К+Д |
НМПК+Д |
К+ТФ |
НМПК+ТФ |
-100 |
* |
|
|
|
|
Рис. 35. Индекс адгезионно-фагоцитарной активности перитонеальных мак-
рофагов у 15-ти и 30-ти дневных крысят 15-й (НМПК), 16-й (К+Д), 17-й
(НМПК+Д), 18-й (К+ТФ), 19-й (НМПК+ТФ) групп по сравнению с 14-й груп-
пой. * - достоверное отличие от контрольных значений (р < 0,05).
К 30-му дню жизни активность перитонеальных макрофагов у крысят после НМПК значительно снижается и становится даже меньше, чем у контрольных животных (МФ0 у 14-й группы 77,7 ± 3,46%, у 15-й группы 86,9 ± 1,86%, МФ1 –
18,6 ± 2,10% и 12,7 ± 1,74%, МФ2 – 3,20 ± 1,29% и 0,30 ± 0,11% соответственно,
интегральный показатель меньше на 60%). Использование «Депонита-10» на фоне НМПК эритрофагоцитоз стимулирует по сравнению с изолированным НМПК
(МФ0 снижается до 72,9 ± 2,50%, МФ1 увеличивается до 25,4 ± 2,17%, МФ2 – до
166
1,43 ± 0,41%, ИАФА возрастает почти в 1,5 раза), но не отличается от контроля.
При введении беременным крысам альфа-токоферола на фоне НМПК отмечается небольшое повышение фагоцитарной активности по сравнению с 15-й группой за счет розеток 1-го типа, процент которых составляет 28,0 ± 2,38%.
Таблица 28
Фагоцитарная активность перитонеальных макрофагов у крысят,
развивавшихся в условиях НМПК на фоне поступления «Депонит-10»
|
|
|
Группы |
|
|
Показатели |
Возраст |
|
|
Контроль |
НМПК |
|
|
Контроль |
НМПК |
+ |
+ |
|
|
|
|
«Депонит» |
«Депонит» |
|
|
|
|
|
|
МФ0, % |
15 дневные |
80,1±2,75 |
47,3±4,76* |
72,1±3,99 |
69,0±3,30*# |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
77,7±3,46 |
86,6±1,86* |
78,9±3,54 |
72,9±2,50# |
|
|
|
|
|
|
МФ1, % |
15 дневные |
18,7±2,57 |
36,6±2,51* |
25,1±3,51 |
28,7±2,77*# |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
18,6±2,10 |
12,7±1,74* |
18,6±2,42 |
25,4±2,17*# |
|
|
|
|
|
|
МФ2, % |
15 дневные |
1,00±0,38 |
14,6±1,97* |
2,14±0,81 |
2,14±0,95# |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
3,20±1,29 |
0,30±0,11* |
2,00±1,10 |
1,43±0,14# |
|
|
|
|
|
|
МФ3, % |
15 дневные |
0,07±0,07 |
1,40±0,47* |
0,43±0,19 |
0,21±0,15# |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
0,40±0,23 |
0,07±0,06 |
0,38±0,26 |
0,21±0,15 |
|
|
|
|
|
|
ИАФА |
15 дневные |
0,29±0,05 |
1,90±0,32* |
0,51±0,10 |
0,55±0,10*# |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
0,41±0,11 |
0,20±0,03* |
0,37±0,12 |
0,43±0,05# |
|
|
|
|
|
|
Примечание: * - достоверное отличие от контрольных значений, # - достоверное отличие НМПК+Депонит от НМПК (р < 0,05).
167
Таблица 29
Фагоцитарная активность макрофагов у крысят, развивавшихся
в условиях НМПК на фоне поступления альфа-токоферола
|
|
|
Группы |
|
|
Показатели |
Возраст |
|
|
Контроль |
НМПК |
|
|
Контроль |
НМПК |
+ |
+ |
|
|
|
|
токоферол |
токоферол |
|
|
|
|
|
|
МФ0, % |
15 дневные |
80,1±2,75 |
47,3±4,76* |
63,0±4,91* |
67,9±3,98*# |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
77,7±3,46 |
86,6±1,86* |
78,7±5,40 |
69,3±2,86# |
|
|
|
|
|
|
МФ1, % |
15 дневные |
18,7±2,57 |
36,6±2,51* |
33,4±4,34* |
28,7±3,32*# |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
18,6±2,10 |
12,7±1,74* |
18,0±3,71 |
28,0±2,38*# |
|
|
|
|
|
|
МФ2, % |
15 дневные |
1,00±0,38 |
14,6±1,97* |
1,00±0,38 |
3,50±1,11 |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
3,20±1,29 |
0,30±0,11* |
2,77±1,45 |
2,55±0,58# |
|
|
|
|
|
|
МФ3, % |
15 дневные |
0,07±0,07 |
1,40±0,47* |
0,07±0,07 |
0,07±0,07# |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
0,40±0,23 |
0,07±0,06* |
0,46±0,30* |
0,09±0,09 |
|
|
|
|
|
|
ИАФА |
15 дневные |
0,29±0,05 |
1,90±0,32* |
0,83±0,17* |
0,63±0,13*# |
|
|
|
|
|
|
|
30 дневные |
0,41±0,11 |
0,20±0,03* |
0,53±0,24 |
0,52±0,06# |
|
|
|
|
|
|
Примечание: * - достоверное отличие от контрольных значений, # - достоверное отличие НМПК+Токоферол от НМПК (р < 0,05).
Исследование содержания суммарных нитратов и нитритов, как конечных продуктов метаболизма оксида азота показывает, что их концентрация в крови 22-
дневных плодов всех групп имеет сходные значения и достоверных различий не имеет (табл. 30, 31, рис. 36).
Ко 2-му дню жизни в группе крысят с ЗВУР наблюдается гиперпродукция
NO. В крови крысят этой группы концентрация суммарных нитратов и нитритов составляет 343,8 ± 24,18 мкМ/л, и эта величина больше их содержания у ново-
рожденных контрольной группы 146,1 ± 13,1 мкМ/л. Под влиянием экзогенного оксида азота у крысят с ЗВУР отмечается увеличение уровня NO в крови до 246,7
± 46,1 мкМ/л, что значительно превышает их содержание в контроле и не отлича-
ется от НМПК. У крысят 19-й группы также повышена концентрация суммарных нитратов и нитритов до 327,7 ± 12,5 мкМ/л, что достоверно отличается от кон-
168
троля, но не от НМПК. Также повышение уровня NOx отмечается у интактных крысят до 219,1 ± 14,7 мкМ/л, чьи матери получали альфа-токоферол, но эта ве-
личина гораздо меньше 15-й и 19-й групп.
На 15-й день развития крысят 14-й, 15-й, 16-й, 17-й, 18-й групп концентра-
ции суммарных нитратов и нитритов достоверно не отличаются, но у животных
19-й группы наблюдается значительное снижение описываемого показателя по сравнению как с контролем, так и с НМПК.
К 30-му дню концентрация NOx в крови животных с ЗВУР продолжает сни-
жаться, достигая 136,4 ± 30,26 мкМ/л, эта величина ниже содержания оксида азо-
та в контрольной группе 244,5 ± 44,41 мкМ/л. Экзогенный NO и альфа-токоферол способствуют повышению концентрации суммарных нитратов и нитритов в крови крысят, развивавшихся в условиях НМПК по сравнению с их содержанием в кро-
ви животных с НМПК.
Таблица 30
Концентрация суммарных нитратов и нитритов у плодов и крысят,
развивавшихся в условиях НМПК на фоне поступления «Депонит-10»
|
|
Группы |
|
|
Возраст |
|
|
Контроль |
НМПК |
|
Кон- |
НМПК |
+ |
+ |
|
троль |
|
«Депо- |
«Депо- |
|
|
|
нит» |
нит» |
22 дн. плоды |
194,3 |
177,1 |
247,4 |
237,6 |
|
±21,48 |
±23,66 |
±31,11 |
±51,18 |
2 дневные |
146,1 |
343,8 |
215,3 |
246,7 |
|
±13,1 |
±24,18* |
±34,25 |
±46,14* |
15 дневные |
210,3 |
196,5 |
187,1 |
202,7 |
|
±31,15 |
±28,23 |
±51,36 |
±24,53 |
30 дневные |
244,5 |
136,4 |
269,2 |
290,7 |
|
±44,41 |
±30,26* |
±35,17 |
±56,29# |
Примечание: * - достоверное отличие от контрольных значений, # - достоверное отличие НМПК+Депонит от НМПК (р < 0,05).
169
Таблица 31
Концентрация суммарных нитратов и нитритов у плодов и крысят,
развивавшихся в условиях НМПК на фоне введения альфа-токоферола
|
|
Группы |
|
|
Возраст |
|
|
Контроль |
НМПК |
|
Кон- |
НМПК |
+ |
+ |
|
троль |
|
токофе- |
токофе- |
|
|
|
рол |
рол |
22 дн. плоды |
194,3 |
177,1 |
184,5 |
189,0 |
|
±21,48 |
±23,66 |
±9,21 |
±21,81 |
2 дневные |
146,1 |
343,8 |
219,1 |
327,7 |
|
±13,12 |
±24,18* |
±14,65* |
±12,47* |
15 дневные |
210,3 |
196,5 |
170,8 |
128,2 |
|
±31,15 |
±28,23 |
±14,13 |
±12,60*# |
30 дневные |
244,5 |
136,4 |
269,3 |
314,4 |
|
±44,41 |
±30,26* |
±15,73 |
±25,63# |
Примечание: * - достоверное отличие от контрольных значений, # - достоверное отличие НМПК+Токоферол от НМПК (р < 0,05).
|
|
170 |
|
150 |
|
|
|
% |
* |
|
|
130 |
|
|
|
110 |
|
|
|
90 |
|
|
НМПК |
|
* |
|
|
|
|
|
|
70 |
|
|
|
50 |
|
|
К+Д |
30 |
|
|
|
10 |
|
|
НМПК+Д |
|
|
|
|
-10 пл. 22 д. |
2 д. |
15 д. |
30 д. |
-30 |
|
|
|
-50 |
|
|
* |
%150 |
* |
|
|
130 |
* |
|
|
|
|
|
|
110 |
|
|
|
90 |
|
|
НМПК |
|
|
|
|
70 |
|
|
|
50 |
* |
|
К+ТФ |
|
|
||
30 |
|
|
|
10 |
|
|
НМПК+ТФ |
|
|
|
|
-10 пл. 22 д. |
2 д. |
15 д. |
30 д. |
-30 |
|
|
|
-50 |
|
* |
* |
|
|
||
Рис. 36. Концентрация суммарных нитратов и нитритов у 22-х дневных пло- |
|||
дов и 2-х, 15-ти, |
30-ти дневных крысят 15-й (НМПК), 16-й (К+Д), 17-й |
||
(НМПК+Д), 18-й (К+ТФ), 19-й (НМПК+ТФ) групп по сравнению с 14-й |
|||
группой. * - достоверное отличие от контрольных значений (р < 0,05). |
|||
