Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Скачиваний:
10
Добавлен:
15.04.2023
Размер:
5.7 Mб
Скачать

101

Таблица 12 Влияние различных веществ на активность перитонеальных макрофагов

у небеременных и беременных крыс

Группа

Вещество

МФ0, %

МФ1, %

МФ2, %

МФ3, %

ИАФА

1

Контроль

64,8±2,97

28,2

5,21

0,63

0,64

 

 

 

±1,53

±1,82

±0,21

±0,10

2

 

55,1 ±2,64

34,6

7,67

1,67

1,13 ±0,14

 

 

 

±2,12

±0,94

±0,50

 

1

Trolox

65,8

25,8

8,00

0,20

0,67

 

1 мкМ

±2,81

±1,43

±2,76

±0,18

±0,11

2

 

70,3

29,9

3,14

0,29

0,60

 

 

±5,10*

±4,66*

±1,04*

±0,26*

±0,12*

1

Trolox

61,4

28,8

8,00

0,00

0,73

 

25 мкМ

±1,25

±2,44

±2,47

 

±0,08

2

 

67,7

29,0

4,00

0,14

0,63

 

 

±4,33*

±2,94

±1,50*

±0,13*

±0,17*

1

SOD

63,5

34,5

2,00

0,00

0,63

 

10 Ед./мл

±5,30

±5,30

±0,32

 

±0,10

2

 

70,9

24,7

3,00

0,57

0,53

 

 

±3,23*

±2,50*

±1,07*

±0,34*

±0,10*

1

SOD

69,5

30,0

0,50

0,00

0,45

 

100 Ед./мл

±1,25

±1,00

±0,25

 

±0,03

2

 

80,4

17,1

1,00

0,00*#

0,30

 

 

±3,04*#

±2,99*#

±0,53*#

 

±0,07*#

1

ЛПС

48,8

32,2

16,8

2,24

1,71

 

10 нг/мл

±5,08*

±1,80

±4,48

±0,66

±0,43

2

 

53,6

34,0

10,2

2,00

1,20

 

 

±3,69

±3,78

±1,51

±0,85

±0,18

1

ЛПС

51,6

31,4

11,4

2,01

1,22

 

100 нг/мл

±3,86*

±2,17

±1,19*

±0,94

±0,16*

2

 

48,0

34,3

16,1

1,29

1,50

 

 

±1,21*

±1,24

±1,27*#

±0,26

±0,08*

1

L-NAME

72,8

18,8

8,43

0,51

0,55

 

0,1 мМ

±4,71

±2,18*

±2,96

±0,25

±0,14

2

 

57,5

35,5

6,33

0,50

0,97

 

 

±5,34

±4,36

±1,26

±0,45

±0,18

1

L-NAME

52,6

33,4

13,4

1,64

1,30

 

1 мМ

±3,38*#

±3,05#

±4,22

±1,04

±0,23*#

2

 

65,5

28,0

6,00

0,33

0,67

 

 

±3,31

±2,38

±2,00

±0,19

±0,11

1

Эстрадиол

56,0

29,8

12,1

2,25

1,28

 

10 нМ

±6,13

±4,79

±5,30

±1,43

±0,48

102

 

 

 

продолжение табл. 12

 

2

 

51,9

36,6

9,26

1,86

1,52

 

 

±6,09

±3,72

±2,69

±0,84

±0,41

1

Эстрадиол

45,2

34,6

18,0

2,22

1,72

 

100 нМ

±0,72*

±5,16

±4,28*

±1,56

±0,16*

2

 

51,9

31,9

13,3

2,43

1,53

 

 

±4,90

±2,66

±3,79

±0,97

±0,36

1

Прогестерон

72,0

21,8

5,42

0,61

0,50

 

10 нМ

±4,01

±4,34

±1,73

±0,36

±0,09

2

 

51,0

32,1

12,1

2,57

1,61

 

 

±4,04

±1,97

±2,71

±1,18

±0,39

1

Прогестерон

71,4

20,0

6,61

0,40

0,50

 

100 нМ

±3,23

±2,32*

±1,93

±0,36

±0,10

2

 

58,1

30,0

8,14

1,00

1,07

 

 

±5,20

±3,62

±2,85

±0,67

±0,31

Примечание: * - достоверное отличие от контроля соответствующей группы (р < 0,05); # - достоверное отличие от более низкой концентрации (р < 0,05).

103

Таблица 13

Влияние различных веществ на активность плацентарных макрофагов у крыс

Вещество

МФ0, %

МФ1, %

МФ2, %

МФ3, %

ИАФА

 

 

 

 

 

 

Контроль

81,1±4,17

16,7±3,17

1,78±0,91

0,33±0,31

0,31±0,10

 

 

 

 

 

 

Trolox

69,9±4,78

28,8±3,84

3,67±1,50

0,44±0,42

0,63±0,14

1 мкМ

 

 

 

 

 

Trolox

74,7±1,69

24,4±1,80

1,56±0,42

0,11±0,10

0,39±0,04

25 мкМ

 

 

 

 

 

SOD

77,4±3,86

20,6±3,13

1,78±0,72

0,11±0,10

0,36±0,09

10 Ед./мл

 

 

 

 

 

SOD

86,1±2,13

12,2±1,71

1,00±0,54

0,11±0,10

0,18±0,04

100 Ед./мл

 

 

 

 

 

ЛПС

52,8

33,4

11,0

2,11

1,48

10 нг/мл

±4,55*

±2,99*

±1,26*

±0,60*

±0,40*

ЛПС

45,11

35,22

17,3

1,67

2,26

100 нг/мл

±5,25*

±2,96*

±3,38*

±0,47*

±0,64*

L-NAME

73,6±2,21

24,7±1,85

1,56±0,69

0,11±0,10

0,40±0,05

0,1 мМ

 

 

 

 

 

L-NAME

69,4±4,48

25,4±3,93

4,67±1,04

0,11±0,10

0,58±0,12

1 мМ

 

 

 

 

 

Эстрадиол

54,2

32,0

10,1

2,89±1,08

1,41

10 нМ

±4,99*

±2,68*

±1,73*

 

±0,30*

Эстрадиол

45,7

31,9

17,8

4,00

2,27

100 нМ

±5,72*

±2,84*

±3,34*

±1,36*

±0,49*

Прогестерон

55,6

35,9

6,80

1,67

1,02

10 нМ

±2,15*

±2,56*

±1,31*

±0,27*

±0,09*

Прогестерон

50,6

33,1

12,4

3,33

1,49

100 нМ

±3,13*

±2,88*

±2,38*

±0,94*

±0,16*

Примечание: * - достоверное отличие от контроля (р < 0,05).

104

Влияние биологически активных веществ на активность

перитонеальных и плацентарных макрофагов

при нарушении маточно-плацентарного кровообращения

При НМПК trolox тормозит активность перитонеальных макрофагов только в высокой концентрации (табл. 14, рис. 6). При этом увеличивается количество клеток, не адгезирующих эритроциты от 68,9 ± 3,53% до 85,4 ± 3,82%, МФ1 сни-

жается от 25,0 ± 2,72% до 12,4 ± 3,24%, МФ2 – от 4,89 ± 1,54% до 1,43 ± 0,53%.

ИАФА меньше контроля в 3 раза. Активность плацентарных макрофагов умень-

шается только под воздействием trolox в низкой концентрации за счет уменьше-

ния МФ2 от 1,20 ± 0,42% до 0,20 ± 0,13% (табл. 15, рис. 7).

Выраженность ингибирующего влияния SOD на перитонеальные макрофаги не зависит от ее концентрации в инкубационной среде (см. табл. 14, рис. 6). При действии этого антиоксиданта МФ0 составляет 85,4 ± 3,82% (10 ед./мл) и 85,3 ± 3,65% (100 ед./мл) при 68,9 ± 3,53% в контроле, одновременно снижается процент макрофагов, образующих розетки 1-го типа, ИАФА меньше контроля на 66 и 64%

соответственно. В отношении плацентарных макрофагов супероксиддисмутаза оказывает сходный эффект: концентрации 10 ед./мл и 100 ед./мл по сравнению с

10-й группой увеличивают процент МФ0 от 69,6 ± 2,65% до 84,6 ± 2,51% и 81,0 ± 2,55% соответственно; снижают количество МФ1 от 24,0 ± 2,35% до 13,8 ± 2,34%

и 16,4 ± 2,31%; а также МФ3 в низкой концентрации от 1,20 ± 0,42 до 0,20 ± 0,13%. ИАФА в первом случае уменьшается на 63%, во втором – на 51% (см. табл. 15, рис. 7).

При НМПК, как и при физиологической беременности, активность пери-

тонеальных макрофагов увеличивается только при высокой концентрации ЛПС

(см. табл. 14, рис. 6). В этом случае количество фагоцитов без адгезированных клеток составляет 51,6 ± 4,39%, в контроле 68,9 ± 3,53%. Увеличивается процент

105

макрофагов, образующих розетки 2-го типа – от 4,89 ± 1,54% до 13,7 ± 1,92%, 3-го типа – от 1,22 ± 0,44% до 3,86 ± 0,77%, ИАФА повышается на 151%. На плацен-

тарные макрофаги ЛПС достоверного влияния не оказывает (см. табл. 15, рис. 7). L-NAME при НМПК на перитонеальные макрофаги крыс в обеих концен-

трациях не влияет, но имеется дозозависимый эффект в отношении МФ1: 1мМ L- NAME достоверно увеличивает их количество по сравнению с 0,1 мМ L-NAME от

24,3 ± 2,01% до 31,0 ± 1,84% (см. табл. 14, рис. 6). На плацентарные макрофаги антагонист оксида азота оказывает тормозное влияние только в высокой концен-

трации, увеличивая МФ0 от 69,6 ± 2,65% до 84,1 ± 2,62%, снижая процент розеток

1-го типа от 24,0 ± 2,35% до 15,0 ± 2,60%, 2-го типа от 4,80 ± 1,63% до 0,30 ±

0,14%, 3-го типа от 1,20 ± 0,42 до 0,10 ± 0,09%, ИАФА уменьшается на 65%. Эти изменения сопровождаются достоверной разницей между влияниями двух кон-

центраций L-NAME в отношении МФ0, МФ1, МФ2, ИАФА (см. табл. 15, рис. 7).

У животных с НМПК эстрадиол достоверно не влияет на активность пери-

тонеальных фагоцитов (см. табл. 14, рис. 6). Однако активность плацентарных макрофагов этот эстроген повышает в обеих концентрациях (см. табл. 15, рис. 7).

В концентрации 10 нМ и 100 нМ по сравнению с 10-й группой снижается процент МФ0 от 69,6 ± 2,65% до 44,5 ± 4,04% и 44,3 ± 4,93% соответственно; увеличивает-

ся количество МФ1 от 24,0 ± 2,35% до 38,7 ± 2,65% и 40,8 ± 3,87%; возрастает МФ2 от 4,80 ± 1,63% до 13,8 ± 2,20% и 12,6 ± 1,76%, ИАФА в первом случае воз-

растает почти в 3 раза, во втором – более, чем в 2 раза.

Чувствительность перитонеальных макрофагов к прогестерону повышена в обеих концентрациях и влияние их сходно: снижается процент клеток без эритро-

цитов от 68,9 ± 3,53% до 50,6 ± 4,75% (10 нМ) и 51,5 ± 6,18% (100 нМ), возрастает количество макрофагов, образующих розетки 2-го типа от 4,89 ± 1,54% до 13,8 ± 2,85% (10 нМ) и 12,3 ± 2,18% (100 нМ) (см. табл. 14, рис. 6), ИАФА достоверно меняется только в высокой концентрации. На плацентарные макрофаги прогесте-

рон достоверно не влияет (см. табл. 15, рис. 7).

106

200

%

*

150

*

100

50

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

-50

*

* *

-100

Рис. 6. Изменение ИАФА при воздействии на перитонеальные макрофаги крыс с НМПК различными веществами (1, 2 – разные концентрации липопо-

лисахарида; 4, 5 – разные концентрации L-NAME; 7, 8 – разные концентра-

ции Trolox; 10, 11 – разные концентрации SOD; 13, 14 – разные концентрации прогестерона; 16, 17 – разные концентрации эстрадиола) (* - р < 0,05).

300

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

*

 

%

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

250

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

*

200

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

150

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

100

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

50

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

-50

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

*

 

 

 

 

*

*

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

-100

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рис. 7. Изменение ИАФА при воздействии на плацентарные макрофаги крыс с НМПК различными веществами (1, 2 – разные концентрации липополиса-

харида; 4, 5 – разные концентрации L-NAME; 7, 8 – разные концентрации

Trolox; 10, 11 – разные концентрации SOD; 13, 14 – разные концентрации прогестерона; 16, 17 – разные концентрации эстрадиола) (* - р < 0,05).

107

Таблица 14

Влияние различных веществ на активность перитонеальных макрофагов при НМПК у крыс

Вещество

МФ0, %

МФ1, %

МФ2, %

МФ3, %

ИАФА

 

 

 

 

 

 

Исходное

68,9±3,53

25,0

4,89±1,54

1,22±0,44

0,67±0,11

 

 

±2,72

 

 

 

Trolox

73,6±6,29

21,9±4,71

4,25±1,68

0,13±0,12

0,59±0,25

1 мкМ

 

 

 

 

 

Trolox

81,1

15,3

3,25±0,61

0,25±0,15

0,29

25 мкМ

±1,74*

±1,41*

 

 

±0,04*

SOD

85,4

12,4

1,43±0,53

0,71±0,52

0,22

10 Ед./мл

±3,82*

±3,24*

 

 

±0,06*

SOD

85,3

12,0

1,67±0,77

0,50±0,31

0,24

100 Ед./мл

±3,65*

±2,80*

 

 

±0,08*

ЛПС

65,6±1,67

26,6±1,57

6,25±1,37

1,50±0,50

0,68±0,07

10 нг/мл

 

 

 

 

 

ЛПС

51,6

29,3±2,67

13,7

3,86

1,67

100 нг/мл

±4,39*#

 

±1,92*#

±0,77*#

±0,39*#

L-NAME

69,3±2,57

24,3±2,01

5,88±0,80

0,63±0,25

0,57±0,07

0,1 мМ

 

 

 

 

 

L-NAME

62,3±2,10

31,0

6,25±0,58

0,88±0,21

0,75±0,06

1 мМ

 

±1,84#

 

 

 

Эстрадиол

70,1±5,22

23,3±2,82

4,86±1,96

1,63±0,86

0,67±0,21

10 нМ

 

 

 

 

 

Эстрадиол

63,8±5,68

26,8±2,30

6,67±2,45

1,67±0,73

0,89±0,27

100 нМ

 

 

 

 

 

Прогестерон

50,6

31,8±1,44

13,8

2,63±1,29

1,75±0,48

10 нМ

±4,75*

 

±2,85*

 

 

Прогестерон

51,5

34,3±6,22

12,3

1,33±0,61

1,50

100 нМ

±6,18*

 

±2,18*

 

±0,36*

Примечание: * - достоверное отличие от исходного значения (р < 0,05); # -

достоверное отличие от более низкой концентрации (р < 0,05).

108

Таблица 15

Влияние различных веществ на активность плацентарных макрофагов при НМПК у крыс

Вещество

МФ0, %

МФ1, %

МФ2, %

МФ3,

ИАФА

 

 

 

 

%

 

 

 

 

 

 

 

Исходное

69,6±2,65

24,0±2,35

4,80±1,63

1,20

0,59±0,10

 

 

 

 

±0,42

 

Trolox

78,9±3,68

17,7±2,64

3,10±1,03

0,20

0,36±0,09

1 мкМ

 

 

 

±0,13*

 

Trolox

77,8±3,77

17,1±2,55

4,50±1,73

0,30

0,42±0,13

25 мкМ

 

 

 

±0,14

 

SOD

84,6

13,8

1,30±0,53

0,20

0,22

10 Ед./мл

±2,51*

±2,34*

 

±0,13*

±0,04*

SOD

81,0

16,4

2,20±0,58

0,30

0,29

100 Ед./мл

±2,55*

±2,31*

 

±0,14

±0,05*

ЛПС

65,2±4,20

27,4±3,04

6,30±1,77

1,00

0,79±0,20

10 нг/мл

 

 

 

±0,35

 

ЛПС

64,5±2,34

26,3±1,66

7,40±1,27

1,60

0,76±0,10

100 нг/мл

 

 

 

±0,65

 

 

 

 

 

 

 

L-NAME

63,9±3,06

29,0±2,53

6,50±0,91

0,60

0,74±0,11

0,1 мМ

 

 

 

±0,25

 

L-NAME

84,1

15,0

0,30

0,10

0,21

1 мМ

±2,62*

±2,60*

±0,14*

±0,09*

±0,04*

Эстрадиол

44,5±4,04*

38,7±2,65*

13,8±2,20*

2,20

2,24±0,61*

10 нМ

 

 

 

±0,90

 

Эстрадиол

44,3±4,93*

40,8±3,87*

12,6±1,76*

2,00

1,88±0,25*

100 нМ

 

 

 

±0,77

 

Прогестерон

74,6±3,19

21,9±2,91

2,80±1,04

0,50

0,43±0,06

10 нМ

 

 

 

±0,25

 

Прогестерон

66,6±2,81

28,4±2,68

4,30±0,72

1,00

0,64±0,08

100 нМ

 

 

 

±0,20

 

Примечание: * - достоверное отличие от исходного значения (р < 0,05).

109

Влияние биологически активных веществ на активность перитонеальных и плацентарных макрофагов при физиологической

беременности и беременности с нарушением маточно-плацентарного кровообращения на фоне введения альфа-токоферола

При физиологической беременности на фоне введения альфа-токоферола активность перитонеальных макрофагов под влиянием ЛПС, L-NAME, эстрадио-

ла, прогестерона не отличается от значений интактных макрофагов крыс 8-й

группы (табл. 16, рис. 8).

Активность плацентарных макрофагов в этих условиях меняется (табл. 17,

рис. 8). Они остаются чувствительны к ЛПС в высокой концентрации: снижается процент макрофагов без эритроцитов от 69,2 ± 3,70% до 45,2 ± 2,37%, увеличива-

ется количество розеток 1-го типа от 26,6 ± 2,91% до 47,3 ± 2,17% и 3-го типа от

0,40 ± 0,15% до 1,20 ± 0,31%, ИАФА становится больше на 158%. Отмечается до-

зозависимый эффект в отношении МФ0 и МФ1.

Антагонист оксида азота на активность плацентарных макрофагов не влияет

(см. табл. 17, рис. 8).

При инкубации плацентарных макрофагов с эстрадиолом их активность значительно повышается (см. табл. 17, рис. 8). В концентрации 10 нМ и 100 нМ по сравнению с интактными фагоцитами 8-й группы снижается процент МФ0 от 69,2

± 3,70% до 51,2 ± 5,64% и 54,0 ± 4,14%; увеличивается процент МФ1 от 26,6 ± 2,91% до 36,6 ± 3,39% (10 нМ); возрастает МФ2 от 3,70 ± 0,85% до 9,10 ± 2,13% и

10,5 ± 1,44%, повышается МФ3 от 0,40 ± 0,15% до 2,40 ± 0,59% (10 нМ). ИАФА в первом случае увеличивается на 196%, во втором – на 128%.

При воздействии прогестерона на плацентарные макрофаги эффект наблю-

дается только в концентрации 100 нМ (см. табл. 17, рис. 8). Активность клеток повышается за счет снижения МФ0 (от 69,2 ± 3,70% до 56,1 ± 3,84%), увеличения

110

МФ1 (от 26,6 ± 2,91% до 36,6 ± 3,15%), ИАФА становится больше на 79%.

Наблюдается дозозависимый эффект по этим же параметрам.

%500

*

 

400

 

 

300

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

*

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

200

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Перит.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

*

 

 

 

 

 

*

 

 

 

 

 

Плацент.

100

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

 

 

 

-100

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рис. 8. Изменение ИАФА при воздействии на перитонеальные и плацентар-

ные макрофаги крыс 8-й группы различными веществами (1, 2 – разные кон-

центрации липополисахарида; 4, 5 – разные концентрации L-NAME; 7, 8 –

разные концентрации прогестерона; 10, 11 – разные концентрации эстрадио-

ла) (* - р < 0,05).

Соседние файлы в папке диссертации