
диссертации / 12
.pdfГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ МОРФОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
СЫВОРОТКИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ГОРТАНИ НА ЭТАПЕ
ОБСЛЕДОВАНИЯ
Исследование сыворотки крови методом краевой дегидратации проводилось на базе лаборатории морфологии биологических жидкостей Филиала РНИМУ им. Н.И. Пирогова «НКЦ геронтологии» (зав.
лабораторией – д.м.н., профессор С.Н. Шатохина).
У всех больных с диагнозом плоскоклеточного рака гортани,
подтвержденным гистологическим и цитологическим исследованиями,
изучен состав анизотропных морфотипов сыворотки крови методом краевой дегидратации. Основными из них являлись два морфологических маркера:
маркер злокачественного роста и маркер дегенеративно-дистрофического процесса [144].
3.1. Морфологические маркеры злокачественного роста в сыворотке крови больных раком гортани в зависимости от стадии заболевания. Маркер злокачественного роста представляет собой комбинацию макро- и микросферолита, (см. главу 2) однако, по мере прогрессирования опухоли данный маркер претерпевает изменения. На рис. 3а-в показан маркер злокачественного роста, определяющийся в сыворотке крови больных раком гортани на I-II стадиях. Маркѐр представляет собой патологическую агрегацию базисного сферолита (БС) и микросферолита с зернистой структурой (м). Такая агрегация (БС+м) имеет одинаковую
степень анизотропии (свечения).
На рис. 4а-г представлен маркер злокачественного роста III-IV стадий
[144]. Он также является патологической агрегацией БС+м, с одинаковой
степенью анизотропии, однако отличается тем, что вместо базисного
сферолита присутствуют лишь его фрагменты, в то время как микросферолит с зернистой структурой представлен в сохранном виде.
41

Особенности двух указанных патологических агрегаций четко видны при
сравнении с базисным сферолитом нормы (рис. 3г), который определяется в
сыворотке крови здоровых людей.
а |
|
б |
|
|
|
в |
|
г |
|
|
|
Рис. 3. Анизотропные морфотипы сыворотки крови: а-в - маркер злокачественного роста I-II стадии (патологическая агрегация базисного сферолита и зернистого микросферолита с одинаковой степенью анизотропии); г - базисный сферолит здорового человека (для сравнения), ув. 200. Микроскопия в поляризованном свете
42

Рис. 4. Анизотропные морфотипы сыворотки крови: маркер злокачественного роста III-IV стадии (патологическая агрегация из фрагментов базисного сферолита и зернистого микросферолита с одинаковой степенью анизотропии). Ув. 200. Микроскопия в поляризованном свете
3.2. Морфологический маркер дегенеративно-дистрофического процесса в сыворотке крови больных раком гортани. На рис. 5
представлен маркер дегенеративно-дистрофического процесса, который
также характеризуется патологической агрегацией |
БС+м, однако отличие |
||
этой агрегации от маркера злокачественного роста состоит |
в резко |
||
сниженной |
степени анизотропии базисного |
сферолита. |
Зернистый |
|
|
|
43 |

микросферолит при этом имеет вид светящегося «глазка», а базисный
приобретает ячеистую структуру.
а |
|
б |
|
|
|
г
в
Рис. 5. Анизотропные морфотипы сыворотки крови: а-в - маркер дегенеративно-дистрофического процесса (патологическая агрегация базисного сферолита с низкой степенью анизотропии и зернистого микросферолита с выраженным анизотропным свечением), ув. 200; г – микросферолит с зернистой структурой, ув. 600. Микроскопия в поляризованном свете
Одновременно с указанными патологическими маркерами в сыворотке
крови больных раком гортани, выявлялись отдельно лежащие микросферолиты с зернистой структурой (рис. 5г) и деструктивные морфотипы - слабо анизотропные сферолиты неправильной формы с неровными краями и ячеистой структурой (рис. 6).
44

Рис. 6. Деструктивные анизотропные морфотипы сыворотки крови. Ув. 200. Микроскопия в поляризованном свете
В сыворотке крови некоторых больных определялся маркер усиленной пролиферации – текстура в виде каскада параллельных линий (рис. 7). Этот маркер выявляется у людей с наличием репаративных процессов,
доброкачественной гиперплазии и других состояниях.
45

Рис. 7. Маркер усиленной пролиферации – анизотропные текстуры сыворотки крови в виде каскада параллельных линий. Ув. 100. Микроскопия в поляризованном свете
Количественный состав морфотипов сыворотки крови у больных раком
гортани разных возрастных групп до начала лечения имел отличительные
особенности (таблица 8).
46
Таблица 8.
Состав морфотипов сыворотки крови 70 больных раком гортани при поступлении в стационар
Виды морфотипов |
Число больных в возрастных группах |
||
|
40-59 лет n=32(100 %) |
60-81 год n=38(100 %) |
|
Физиологические (см. главу 2) |
|||
|
|
|
|
Сферолит, дендрит, |
22 (69%) |
|
16 (42%) |
веерные |
|
|
|
|
|
|
|
|
Патологические |
|
|
|
|
|
|
Микросферолиты |
9 (28%) |
|
15 (39%) |
зернистые |
|
|
|
|
|
|
|
Маркер |
24 (75%) |
|
20 (53%) |
злокачественного роста |
|
|
|
Маркер дегенеративно- |
31 (100%) |
|
38 (100%) |
дистрофического |
|
|
|
процесса |
|
|
|
Деструктивные |
10 (31%) |
|
17 (45%) |
|
|
|
|
Маркер усиленной |
4 (12%) |
|
4 (10%) |
пролиферации (текстура |
|
|
|
в виде параллельных |
|
|
|
линий) |
|
|
|
У всех больных раком гортани при поступлении в стационар определялся маркер дегенеративно-дистрофического процесса. На фоне этого процесса у 75% больных среднего возраста и 53% больных старшего возраста выявлялся маркер злокачественного роста, что свидетельствовало об активности у этих больных злокачественного процесса. Помимо указанных морфотипов, в сыворотке крови части больных в обеих возрастных группах были выявлены морфотипы нормы и неспецифического воспалительного процесса. Анализ возможных причин такого количественного распределения
- «дегенерация и злокачественный рост» у больных раком гортани среднего и старшего возраста, а также данные литературных источников, позволили выделить нам несколько причин, объясняющих этот факт.
47
Во-первых, у больных раком гортани возникновению злокачественного новообразования предшествуют хронические атрофически-дегенеративные и пролиферативные тканевые изменения. При этом, как установлено рядом исследователей, до клинической манифестации опухоли проходит многолетний период.
Во-вторых, любой процесс, включая и онкологический, протекает волнообразно, т.е. имеет стадии активности и регрессии. На современном этапе знаний в области онкологии известно, что стадия инвазии опухоли протекает в три фазы: в первой происходит ослабление контактов между клетками и экспрессия молекул, обеспечивающих мобильность опухолевых клеток и интегриновых рецепторов, служащих для прикрепления клеток к компонентам экстрацеллюлярного матрикса - коллагенам, фибронектину,
ламинилу. Во второй фазе инвазии происходит деградация экстрацеллюлярного матрикса протеолитическими ферментами,
секретируемыми опухолевыми клетками. Следовательно, путь для инвазии опухолевых клеток освобождается за счет деструктивного процесса в экстрацеллюлярном матриксе. В третью фазу происходит перемещение опухолевых клеток в зону деградации матрикса. Затем все стадии инвазии повторяются вновь и вновь, в той же последовательности. Таким образом, в
процессе освоения окружающего пространства опухолевыми клетками происходят циклично повторяющиеся периоды деградации здоровых тканей с последующей активацией роста злокачественного новообразования.
В-третьих, по мере роста и увеличения размеров опухоли, в ней нарастают деструктивные процессы за счет недостаточного поступления питательных веществ и кислорода. У пациентов старшего возраста преобладание морфотипов дегенеративно-дистрофического процесса обусловлено не только присутствием опухоли, но и инволютивными изменениями органов и тканей, обусловленных возрастной ишемией в результате атеросклеротических изменений. Кроме того, активность
48
опухолевого роста находится в обратной зависимости от состояния иммунной системы, которая также имеет свою фазность.
Следует подчеркнуть, что диагностическая технология «Литос-
система» интегрально отражает все события, происходящие в биологических жидкостях организма на молекулярном уровне, то есть учитывает морфологические особенности всех молекулярных структур, выработанных опухолевыми клетками и продуктов их распада. Таким образом, технология предоставляет информацию непосредственно о самом патологическом процессе на период обследования. В этом и состоит главное отличие морфологического анализа неклеточных тканей от клеточных технологий,
регистрирующих устойчивые патологические изменения в тканях, в то время как множество патогенетических процессов, чередующихся по силе,
длительности и тяжести воздействия, которые привели к этим изменениям, «остаются за кадром».
Таким образом, полученные нами данные о составе анизотропных морфотипов сыворотки крови на этапе обследования больных раком гортани отражают два основных сменяющих друг друга вида реальных событий,
происходящих в ткани опухоли: активного роста злокачественного новообразования и дегенеративно-дистрофического процесса в ткани опухоли.
49

ГЛАВА 4. ДИНАМИКА МАРКЕРОВ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО РОСТА И ДЕГЕНЕРАТИВНО-ДИСТРОФИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА У БОЛЬНЫХ РАКОМ ГОРТАНИ РАЗНЫХ ВОЗРАСТНЫХ ГРУПП НА ЭТАПАХ ЛЕЧЕНИЯ И АМБУЛАТОРНОГО НАБЛЮДЕНИЯ
Из 70 больных раком гортани у 61 проведено динамическое наблюдение на этапах лечения и после его окончания, а также на протяжении двух лет при амбулаторном исследовании.
Наряду с общепринятыми методами обследования, при каждом осмотре забиралась кровь для определения состава анизотропных морфотипов сыворотки крови с целью выявления маркеров злокачественного роста и дегенеративно-дистрофического процесса.
В дальнейшем, по результатам наблюдения была прослежена смена этих морфологических маркеров на этапах лечения и амбулаторного наблюдения у каждого конкретного больного.
В зависимости от вида проводимого лечения, больные были распределены на три группы:
61 пациент
|
|
1 |
|
|
|
2 |
|
|
|
3 |
|
|||
|
группа |
|
группа |
|
группа |
|||||||||
|
|
n = 17 |
|
n = 13 |
|
n = 31 |
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
I группа |
|
II группа |
I группа |
|
IIгруппа |
I группа |
|
IIгрупп |
||||||
n = 8 |
|
n = 9 |
n = 6 |
|
n = 7 |
n = 15 |
|
а |
1 группа (хирургическое лечение) - 17 больных (восемь человек средней, девять - старшей возрастных групп), у которых диагностирован
50