новая папка 2 / 49960

На правах рукописи

ВАРНАВСКИЙ СЕРГЕЙ НИКОЛАЕВИЧ

ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ СЕДИМИНА-Fe+ И СЕДИМИНА-Se+

06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Москва – 2013

1

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ).

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Уразаев Дмитрий Николаевич

Официальные оппоненты доктор биологических наук, профессор, заведующий научно-исследовательской лабораторией иммунобиотехнологии ФГБОУ ВПО МГАВМиБ

Мирзаев Микаиль Нурбагандович

доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник ФГБУ ВГНКИ

Бондаренко Владимир Олегович

Ведущая организация: ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии»

Защита диссертации состоится «___» февраля 2013 г. в ____часов на заседании диссертационного совета Д220.042.05 при в ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» по адресу: 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23; тел. 8(495)377-93-83.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина»

Автореферат разослан «____» _________ 2013 г. и размещен на сайте http://www.vak.ed.gov.ru

Ученый секретарь

2

1.ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1.Актуальность темы. Основной задачей, стоящей перед ветеринарной наукой и практикой, является защита здоровья животных от заболеваний инфекционного и незаразного характера. Основной ущерб животноводству наносят болезни неинфекционной этиологии, усугубляемые нарушением обмена веществ.

В общей номенклатуре незаразной патологии животных значительную долю занимают гипомикроэлементозы (паракератоз, гипокобальтоз,

гипокупроз, железодефицитная анемия и другие болезни), наносящие животноводству значительный экономический ущерб. (А.И.Карелин,

1975,1983; В.П. Урбан, И.Л. Найманов, 1984; С.М. Сулейманов, 1996; B.C.

Бузлама 1997; В.А. Антипов и др., 2005, 2012).

Одной из наиболее актуальных проблем является недостаточность поступления в организм животных железа, йода и селена. Дефицит железа имеет место у молодняка почти всех видов животных в первые недели жизни,

что объясняется быстрым расходованием запасов этого металла для синтеза гемоглобина и его незначительном содержанием в молоке. У подсосных поросят это приводит к развитию анемии (И.П. Кондрахин и др., 1991; C.B. Шабунин и др., 2008).

При несвоевременном врачебном вмешательстве, железодефицитная анемия может перейти в тяжелую форму и закончиться гибелью животного.

При интенсивном ведении свиноводства и отсутствии своевременных профилактических мероприятий анемией заболевает до 100%

новорожденных поросят, смертность доходит до 30-35%. У оставшихся в живых поросят наблюдается значительное отставание в росте и развитии,

снижение среднесуточных привесов, развитие респираторных и желудочно-

кишечных заболеваний (А.И. Карелин, 1971, 1983; Б.Д. Кальницкий и др., 1985; А.А. Заволокина, А.Ф. Бережной, 1988; И.П. Кондрахин, 1989; М.Г.

Николадзе, 2002; Д.Н. Уразаев, А.А. Дельцов, 2009).

3

Дефицит йода и селена в почвах и кормах для животных отмечается во многих зонах России (районы Урала, Восточной Сибири, Черноземья и др.) и

ближнего зарубежья. Недостаточное поступление этих элементов в организм животных способствует нарушению обмена железа, а также развитию опасных патологий, таких как эндемический зоб, беломышечная болезнь.

Для профилактики и лечения микроэлементозов в настоящее время используются фармакологические средства в виде неорганических солей микроэлементов, препараты на основе декстрана - ферроглюкин-75,

декстрофер-100, урсоферран, седимин и др. (В.И. Павлов, 1981; С.В.

Пантелеев, 1994; Н.С. Васильева, 1996; Н.З. Хазипов с соавт., 1992, 1997,

2000).

Однако, существует необходимость создания новых эффективных комплексных препаратов, содержащих одновременно железо, селен и йод. В

связи с этим настоящая работа посвящена изучению фармако-

токсикологических свойств новых препаратов на основе железодекстрана – седимина-Fe+ и седимина-Se+.

1.2. Цель и задачи исследования. Цель данной работы состояла в изучении фармакологического действия и токсических свойств препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

1.Провести оценку токсических свойств препаратов седимин-Fe+ и

седимин-Se+ (острая, хроническая токсичность, токсичность при нанесении на кожу и слизистые оболочки, кожно-резорбтивное,

аллергическое действие, влияние на постнатальное развитие крысят);

2.Изучить влияние препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+ на уровень трийодтиронина (Т3) и тироксина (Т4) в крови животных и морфологию щитовидной железы.

3.Определить влияние препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+ на

содержание сывороточного железа, гемоглобина, уровень

4

эритроцитов и гематокрита, а также другие клинические и биохимические показатели крови поросят и телят, оценивая

антианемические свойства препаратов.

4.Провести ветеринарно-санитарную оценку мяса животных

(поросят), получавших препараты седимин-Fe+ и седимин-Se+.

5.Определить экономическую эффективность применения препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+ в животноводстве.

1.3. Научная новизна работы. Впервые проведены исследования по изучению фармакологического действия и токсических свойств препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+. Изучена антианемическая активность препаратов при профилактике железодефицитных состояний у молодняка сельскохозяйственных животных. Изучены содержание тиреоидных гормонов в сыворотке крови и изменение морфофункциональной активности щитовидной железы у лабораторных и сельскохозяйственных животных

подвергнутых действию препаратов.

Доказано, что применение препаратов вызывает повышение уровня

тироксина и трийодтиронина у телят. Проведена ветеринарно-санитарная

экспертиза мяса поросят, получавших препарат. Доказана экономическая эффективность применения препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+ в

животноводстве.

1.4. Теоретическая и практическая ценность работы. Проведенные

токсикологические, фармакологические, морфологические и клинические исследования теоретически обосновывают и позволяют рекомендовать в практику ветеринарной медицины новые, эффективные и безопасные,

комплексные микроэлементные препараты седимин-Fe+ и седимин-Se+ для профилактики и лечения заболеваний, развивающихся на фоне дефицита

микроэлементов у сельскохозяйственных животных. Результаты

исследований использованы при разработке инструкций по применению седимина-Fe+ и седимина-Se+ для профилактики и лечения

5

железодефицитной анемии, эндемического зоба и беломышечной болезни у

животных.

Результаты исследований используются в учебном процессе на кафедре

фармакологии и токсикологии ФГБОУ ВПО МГАВМиБ.

1.5. Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1.Результаты токсикологической оценки препаратов седимин-Fe+ и

седимин-Se+.

2.Данные о влиянии препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+ на уровень трийодтиронина (Т3) и тироксина (Т4) в крови лабораторных животных и телят и морфологию щитовидной железы.

3.Результаты изучения эффективности препаратов седимин-Fe+ и

седимин-Se+ при профилактике железодефицитных состояний молодняка сельскохозяйственных животных.

1.6. Апробация результатов работы. Основные результаты работы доложены и обсуждены на:

1. III-м съезде фармакологов и токсикологов России «Актуальные проблемы ветеринарной фармакологии, токсикологии и фармации». Санкт-

Петербург, 2011 г.;

2.II-м международном конгрессе ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии». Санкт-Петербург, 2012 г.;

3.Международной научно-практической конференции посвященной 100-

летию со дня рождения Заслуженного деятеля науки РСФСР, профессора К.

И. Абуладзе и доктора ветеринарных наук, профессора Г. В. Колоболотского.

Москва, 2012 г.; 4. Международной Российско-Чешской научно-практической

конференции молодых ученых и специалистов «Актуальные вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии». Москва, 2012 г..

1.7.Публикации результатов исследований. По материалам

диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 1 в издании

6

рекомендованном ВАК РФ, в которых изложены основные положения и

выводы по изучаемой проблеме.

1.8. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 124

страницах и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы,

материалов и методов исследований, результатов собственных исследований,

обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений,

списка литературы и приложений. В диссертации 16 таблиц, 15 рисунков и 4

фотографии. Всего использован 158 литературных источников, в том числе,

46 зарубежных авторов.

2.СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1.Материалы и методы исследований

Исследования проводили на кафедре фармакологии и токсикологии им.

И.Е. Мозгова Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина», в экспериментальном хозяйстве “Кленово-Чегодаево” Подольского района Московской области, в АПК “Шатурский” филиале

ОАО «Мосэнерго» Шатурского района Московской области и в ООО

«Андреевское» Уржумского района Кировской области.

В экспериментах использованы 1130 животных, в том числе 380 белых

беспородных мышей массой тела 18-20 г, 560 белых крыс массой тела 180-

240 г, 70 поросят 3-х дневного возраста крупной белой породы, 120 телят 3-х

дневного возраста черно-пестрой породы.

Группы животных разных видов подбирались по принципу аналогов.

Для опытов брались клинически здоровые, нормально развитые животные.

Исследования по изучению острой и хронической токсичности,

экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» под ред. Р.У. Хабриева (2005).

Кожно-резорбтивное действие новых железодекстрановых препаратов изучали методом погружения хвоста (пробирочным методом) по М.Н.

Аргунову (1998 г.).

Влияние препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+ на уровень трийодтиронина (Т3) и тироксина (Т4) в крови и морфологию щитовидной железы изучали на белых крысах и телятах, для этого формировали по 3

группы животных по 10 в каждой. Животные первых 2 групп были подопытными, которым в терапевтических дозах вводились внутримышечно исследуемые препараты с интервалом 10 дней. Третья группа служила контролем, животным которой применяли изотонический раствор натрия хлорида.

Наблюдение за животными вели в течение всего периода исследований

(30 дней), регулярно проводя клиническое обследование по общепринятым методам. Кровь для исследования получали три раза: до введения препаратов, на 10-й день и на 20-й день. Концентрацию тиреоидных гормонов определяли радиоммунологическим методом с помощью наборов

«Total Т4 RIA» и «Total Т3 RIA» на гамма-спектрометре РИАГАММА

(Швеция).

На 10-й и 20-й день проводили патологоанатомическое вскрытие животных и взятие проб тканей (щитовидной железы) для гистологического исследования. Методом точечного счета проводили морфометрию структурных компонентов железы: с помощью объект-микрометра измеряли высоту фолликулярного эпителия, среднюю площадь фолликулов, средний диаметр фолликулов. С помощью окулярной точечной сетки определяли относительный объем основных тканевых компонентов щитовидной железы

(эпителий, коллоид, строма). Полученные данные использовали для расчѐта индекса накопления коллоида (индекс Брауна) и фолликулярно-колоидного индекса (ФКИ, индекс активности железы).

8

Изучение фармакологического действия проводили на поросятах и телятах. Препараты применяли внутримышечно телятам и поросятам на 3-4-й

день жизни в дозах 8 и 2 мл, соответственно. Затем инъекцию повторяли через десять дней. Кровь для исследования от поросят и телят получали три раза за время проведения опыта: до введения препаратов, через 10 дней после первого и через 10 дней после второго введений препаратов. Проводили биохимические и гематологические исследования крови в лаборатории ветеринарной клиники «Лебеди» с помощью ветеринарного гематологического анализатора ABCVET и биохимического анализатора

ChemWell (AwarenessTechnology, США).

Ветеринарно-санитарную оценку мяса животных проводили по ГОСТ

23392-78. Экономическую эффективность применения препаратов седимин-

Fe+ и седимин-Se+ рассчитывали в соответствии с «Методикой определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий», утвержденной Департаментом ветеринарии МСХ РФ (1997 г.).

Полученные цифровые значения обрабатывали методами математической статистики, принятой в биологии и медицине (Лакин Г.Ф.,

1990). Результаты считали достоверными при уровне вероятности р≤0,05.

2.2.Результаты исследований

2.2.1.Результаты изучения острой токсичности

Врезультате проведенных исследований установлено, что однократное оральное введение препарата седимин-Fe+ белым крысам в дозах 250, 750, 1250 и мышам в количестве 625, 1250, 1875 мг/кг массы тела из расчета на

Fe(III) и введение препарата седимин-Se+ белым крысам и белым мышам в дозах 100, 300, 500 и 250, 500, 750 мг/кг массы тела Fe(III), соответственно,

не оказывает отрицательного влияния на поведение животных и не вызывает признаков токсикоза. При введении седимина-Fe+ белым крысам в дозах

2500 и 3750 мг/кг и белым мышам в дозах 2500 и 3750 мг/кг массы тела

Fe(III) и при введении седимин-Se+ белым крысам и белым мышам в дозах

1000 и 1500 мг/кг массы тела Fe(III) отмечалось кратковременное угнетение

9

животных в течение 3-5 минут, что, по-видимому, связано с введением большого объема жидкости и давлением ее на стенки желудка. Аналогичная картина наблюдалась у животных контрольных групп.

При изучении острой токсичности при парентеральном введении,

установлено, что при подкожном введении препарата седимин-Fe+в дозе

2500 мг/кг массы тела Fe(III) и при внутримышечном и внутрибрюшинном введении в дозе 1250 мг/кг массы тела Fe(III) и седимина-Se+ при тех же путях введения в дозах соответственно 500 и 1000 мг/кг Fe(III), также отмечалось кратковременное угнетение в следствии введения большого объема жидкости, что подтверждалось схожей картиной у животных в

контрольных группах.

Однократное оральное введение препаратов седимин-Fe+ и седиминSe+ поросятам-сосунам в дозах соответственно 1750 и 700 мг/кг Fe(III),

вызывает кратковременное угнетение животных в течение 3-5 минут. При парентеральном (подкожном, внутримышечном и внутрибрюшинном)

введении препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+ поросятам в дозах

соответственно 2500, 1250, 1250 мг/кг Fe(III) и 1000, 500, 500 мг/кг Fe(III),

также отмечалось кратковременное угнетение и нарушение двигательной активности животных, что было аналогично картине у животных в контрольных группах.

Испытанные количества препаратов значительно превосходят терапевтическую. Дальнейшее повышение вводимой дозы было нецелесообразным, поэтому значения МПД, ЛД50, ЛД100 установить не представилось возможным.

В результате проведенных исследований установлено, что данные препараты по степени воздействия на организм в соответствии с нормативами ГОСТ 12.1.007-76 относятся к 4-му классу опасностивещества малоопасные.

10