4. Электрофорез белков

Метод основан на том, что при определённом значении рН и ионной силы раствора белки двигаются в электрическом поле со скоростью, пропорциональной их суммарному заряду. Белки, имеющие суммарный отрицательный заряд, двигаются к аноду (+), а положительно заряженные белки - к катоду (-).

Электрофорез проводят на различных носителях: бумаге, крахмальном геле, полиакриламидном геле и др. В отличие от электрофореза на бумаге, где скорость движения белков пропорциональна только их суммарному заряду, в полиакриламидном геле скорость движения белков пропорциональна их молекулярным массам.

Разрешающая способность электрофореза в полиакриламидном геле выше, чем на бумаге. Так, при электрофорезе белков сыворотки крови человека на бумаге обнаруживают только 5 главных фракций: альбумины, α1 глобулины, α2-глобулины, β-глобулины и γ-глобулины. Электрофорез тех же белков в полиакриламидном геле позволяет получить до 18 различных фракций. Для обнаружения белковых фракций полоски бумаги или столбики геля обрабатывают красителем (чаще всего бромфеноловым синим или амидочёрным). Окрашенный комплекс белков с красителем выявляет расположение различных фракций на носителе.

В последнее время достаточно широкое распространение в лабораториях получил метод электрофореза в капилляре, который используется в современных анализаторах, как импортных, так и отечественных.

2. Взаимосвязь между лабораторными маркерами воспалительного процесса

Врачу для назначения исследований, имеющих максимальную информативность, а часто и немалую стоимость, необходимо ориентироваться во взаимосвязи между различными лабораторными показателями, что позволит ускорить постановку диагноза и избежать лишних затрат на диагностический процесс.

СОЭ – неспецифический показатель, отражающий, как изменения вязкости плазмы, вызванные диспротеинемией, увеличением фракций глобулинов, дислипидемией, изменением рН, так и состояние физико- химических свойств оболочки эритроцитов, их количество, массу, объем. Перечисленные факторы по-разному влияют на СОЭ, а интенсивность этого влияния зависит от заболевания и вызванных им нарушений гомеостаза.

Несмотря на то, что в современной лаборатории существует возможность исследования многих острофазовых показателей, остается актуальной оценка информативности СОЭ, как скринингового теста в силу его дешевизны.

В Иркутском диагностическом центре ряду пациентов из одной пробы крови определяли СОЭ по методу Панченкова, а также были выполнены измерения АСЛО, СРБ, РФ, Ig G, Ig M на биохимическом анализаторе

«MODULAR P800 ISE» фирмы «ROCHE», Швейцария. При анализе этих результатов обследования были выявлены следующие закономерности.

У 43,3% обследованных в лаборатории образцов крови СОЭ оказалась повышенной. Высокий процент патологических результатов является положительным моментом с точки зрения преемственности диагностического

процесса, так как свидетельствует о тщательном отборе врачами больных для проведения обследования в лаборатории областного уровня.

Была обнаружена тесная взаимосвязь между СОЭ и концентрацией С- реактивного белка. Приведенные расчеты позволяют полагать обоснованным использования СОЭ, как недорогого метода для скрининга возможной патологии у широкого круга пациентов. При этом для снижения стоимости скринингового обследования пациентов можно считать оправданным назначение исследования СОЭ вместо метода качественного выявления С- реактивного белка. С другой стороны, в случае обнаружении повышенных значений СОЭ целесообразным будет количественное определение С- реактивного белка, для уточнения диагноза.

Представленные результаты демонстрируют наличие взаимосвязи между маркерами воспалительного процесса и обосновывают перспективность их дальнейшего изучения с целью уточнения алгоритмов обследования пациентов при различной патологии. Приведенные расчеты подтверждают обоснованность использования СОЭ, как недорогого метода для скрининга возможной патологии у широкого круга пациентов. При этом, в случае обнаружения повышенных значений СОЭ, можно ожидать у этих же пациентов увеличения концентрации СРБ и наоборот. Поэтому в большинстве случаев при назначении одного из этих показателей назначать другой не имеет клинического смысла.

Целесообразность назначения для уточнения диагноза других острофазовых показателей, концентрация которых в крови не имеет тесной связи с уровнем СОЭ, их уровень будет определяться, клиническими проявлениями болезни и предполагаемым диагнозом.