Лабораторные 1 курс / Лабораторная работа 1

Лабораторная работа № 1

Правила техники безопасности при работе в лаборатории. Строение микроскопа и работа с ним

Цель: ознакомить обучающихся с правилами техники безопасности при работе в учебной биологической лаборатории; изучить устройство и правила пользования микроскопом.

Правила и техника безопасности при работе в учебной биологической лаборатории

1.Заходить и работать в биологической лаборатории только в халате;

2.Не вносить в лабораторию посторонних вещей. Их необходимо оставлять в специально отведенных для этого местах;

3.Работать на одном и том же месте и пользоваться закрепленным оборудованием;

4.Соблюдать чистоту и опрятность при работе;

5.Во избежание заражения (отравления) во время перерывов не курить и не принимать пищу;

6.Без разрешения преподавателя или лаборанта не включать электроприборы и аппаратуру;

7.Соблюдать осторожность при работе с химическими реактивами;

8.После завершения микроскопирования протереть объективы марлевой салфеткой (если работа велась с использованием масляных объективов);

9.После окончания работы и уборки рабочего места тщательно вымыть руки с мылом;

10.Не следует выносить за пределы лаборатории какие-либо материалы;

11.Расписаться в журнале по технике безопасности и только после ознакомления с настоящими правилами разрешается работать в лаборатории.

Устройство микроскопа и работа с ним

Для изучения невидимых невооруженным глазом объектов пользуются сложными оптическими приборами – микроскопами (от греч. «micros» – малый, «scopeo» – смотрю). Они позволяют получать увеличенное в сотни (световые микроскопы) и десятки-сотни тысяч раз (электронные микроскопы) изображение исследуемых объектов. Наиболее распространенной маркой биологического микроскопа является «Микмед», (фирмы «ЛОМО»).

Микроскоп состоит из двух частей: механической и оптической.

Механическая часть:

-прямоугольная подставка;

-дугообразная колонка;

-тубус с револьвером, в гнезда которого вкручиваются объективы;

-предметный столик с зажимами-клеммами для закрепления препарата (в центре предметного столика находится отверстие для прохождения лучей света, освещающих препарат);

-винты:

а) макрометрический винт (макровинт) – служит для предварительной ориентировочной установки изображения рассматриваемого объекта на фокус;

б) микрометрический винт (микровинт) – используют для последующей, более четкой установки на фокус; при вращении винтов по часовой стрелке тубус опускается по направлению к препарату, при вращении против нее – от препарата;

в) винт вращения конденсора.

Оптическая часть:

-встроенная осветительная система;

-конденсор (от лат. «condenso» – уплотняю, сгущаю) с ирисовой диафрагмой; конденсор представляет собой систему линз и служит для усиления яркости освещения рассматриваемого объекта; собирая лучи света, конденсор концентрирует их в плоскости препарата; передвигается конденсор

ввертикальном направлении при помощи винта; при опускании конденсора поле зрения микроскопа затемняется, при поднятии – освещается; при слишком сильном освещении поля зрения конденсор рекомендуется опустить, а при слабом поднять; ирис-диафрагма, встроенная в конденсор, состоит из тонких металлических сегментов, которые при помощи рычажка можно сдвигать или раздвигать, регулируя этим поступление света в конденсор;

-система объективов:

а) сухие, при работе с которыми между фронтальной линзой и рассматриваемым предметом находится слой воздуха;

б) масляные (иммерсионные), фронтальная линза которых при работе погружается в нанесенную на препарат каплю масла с показателем преломления, близким к показателю преломления стекла; лучшим для этой цели является иммерсионное масло; световые лучи при переходе из стекла в слой кедрового масла не преломляются и, не отражаясь, попадают в объектив; таким образом, достигается наилучшее освещение рассматриваемого предмета.

Объективы являются наиболее ценной частью микроскопа. Они ввинчиваются в гнезда револьвера и состоят из системы линз, заключенных в металлическую оправу. Передняя, или фронтальная, линза объектива является самой маленькой и единственной, дающей увеличение. Остальные линзы в объективе только исправляют недостатки полученного изображения

и называются коррекционными. В сильных объективах фронтальная линза имеет наибольшую кривизну при наименьшем диаметре, приближаясь к форме полушара.

Все объективы делят на ахроматы – более простые и апохроматы – более совершенные, максимально устраняющие недостатки оптического изображения.

Окуляры – система двух плоско-выпуклых линз, обращенных выпуклостью в сторону объектива. Линза, обращенная к глазу, называется глазной, обращенная к препарату, – собирающей. Расстояние между линзами равно полусумме их фокусного расстояния.

В зависимости от числа окуляров различают монокулярные (с одним окуляром), бинокулярные (с двумя окулярами), тринокулярные микроскопы (с тремя окулярами).

Наиболее четкое изображение предмета получается при сочетании сильных объективов со слабыми и средними окулярами. Для того чтобы определить увеличение данной системы микроскопов, следует умножить показатель увеличения объектива на показатель увеличения окуляра. Например, при окуляре 10х и объективе 100х увеличение микроскопа равно

1000.

Действительное изображение предмета дает объектив. Окуляр же только увеличивает изображение, данное объективом, дает обратное увеличение и мнимое изображение рассматриваемого объекта. Пользуясь биологическим микроскопом, можно рассмотреть предмет размером не менее 0,2 мкм.

Настройка света по Кёлеру.

1.Поставить препарат и при любом свете настроить на резкость (на том увеличении, на котором требуется настройка света);

2.Закрыть диафрагму коллектора (осветителя);

3.Поднимая и опуская конденсор, добиться чёткого изображения краев диафрагмы под микроскопом;

4.Центрировочными винтами конденсатора сместить изображение диафрагмы коллектора в центр поля зрения;

5.Открыть диафрагму коллектора до границ поля зрения;

6.Выставить диафрагму конденсора (её шкала привязана к увеличению объектива). При необходимости её либо слегка приоткрыть прикрыть

7.Яркость скорректируйте яркостью лампы.

Правила рационального освещения «Настройка света по Кёлеру» были сформированы Августом Кёлером. Его идея заключалась в том, чтобы уравнять апертуры (входные отверстия) трех самых главных оптических узлов в микроскопе: коллектора, конденсора и объектива. Осветитель с коллектором позволяет сфокусировать световой поток, расходящийся от лампы и направить его во второй оптический узел – конденсор. В свою очередь конденсор фокусирует свет на объект, который освещается проходящим светом. Далее этот пучок света через объект попадает в один из объективов в револьверным

устройстве. Только так можно добиться хорошего и правильного изображения изучаемого объекта.

Основные правила пользования микроскопом

1.Включить микроскоп в сеть (при наличии встроенной осветительной системы);

2.На рабочем столе поставить микроскоп колонкой к себе на расстоянии 3…5 см от края стола;

3.На предметный столик поместить препарат, зажать клеммами и макровинтом добиться изображения объекта; при работе с объективами малого и среднего увеличения тубус перемещать только макрометрическим винтом;

4.Перевести на большое увеличение; четкость изображения регулировать с помощью микровинта;

5.При работе с малым увеличением расстояние от исследуемого препарата должно быть около 1 см, с большим – 0,6 мм и с иммерсионным – около 0,15 мм;

6.Объективы и окуляры протирать замшей или фланелью;

7.Не оставлять тубус микроскопа открытым, т. е. без окуляра, так как это приводит к накапливанию пыли в тубусе и загрязнению объективов;

8.Микроскоп нужно предохранять от попадания пыли и влаги, после работы или ставить в футляр.

Для изучения колоний микроорганизмов, растущих на плотных питательных средах, и особенно для продолжительного микроскопирования препаратов микробов, пользуются бинокулярным микроскопом или бинокулярной насадкой, позволяющей получать стереоскопическое изображение предмета в трех измерениях и не так быстро утомляющими

зрение. При этом положение трубок с окулярами регулируют до тех пор, пока изображение не совпадет в одном поле зрения.

Ход работы:

Рассмотреть под микроскопом постоянные микроскопические препараты с использованием сухих и иммерсионных объективов.

1. Готовые препараты, приготовленные из различных культур микроорганизмов, рассматривают в следующей последовательности:

а) поставить на стол микроскоп и включить в сеть; б) поместить на предметный столик фиксированный препарат и

закрепить его зажимами; в) рассмотреть препарат при сухих объективах и отыскать лучшее место

для детального исследования; г) поднять тубус микроскопа, поставить иммерсионный объектив и

нанести каплю иммерсионного масла на препарат; д) погрузить в иммерсионное масло нижнюю фронтальную линзу

иммерсионного объектива, смотря на препарат сбоку; е) глядя в окуляр, медленно опустить тубус микроскопа до появления в

поле зрения изучаемого объекта; ж) уточнить фокус микрометрическим винтом;

з) изучить и зарисовать препарат; и) поднять тубус и удалить иммерсионное масло салфеткой.

Контрольные вопросы

1.Перечислить основные структурные части микроскопа.

2.Как приготовить микроскопический препарат?

3.Правила работы с иммерсионной системой.