3. Приготовление и окраска мазка по Лейшману или Романовскому – Гимза для подсчета полихроматофилов.

Методика:

Тщательно вымытым и обезжиренным предметным стеклом недалеко от его края прикасаются к капле крови на месте укола. Мазок делают шлифовальным стеклом, поставив его под углом 45 к предметному стеклу впереди капли. Подведя стекло к этой капле, ждут, пока кровь расплывается вдоль его ребра, затем быстрым движением проводят шлифовальное стекло вперед, не отрывая его от предметного стекла раньше, пока не иссякнет капля крови. Правильно приготовленный мазок имеет желтоватый цвет, тонкий, не достигает краев и заканчивается в виде следа (усов). Мазок высушиваем и без фиксации заливаем краской по Лейшману на 30-40 сек, после промывания проточной водой, высушиваем и смотрим под иммерсией. Обращаем внимание на форму эритроцитов (пойкилоцитоз), величину (анизоцитоз), интенсивность окраски эритроцитов (гипо-, гиперхромия, анизохромия), на внутриядерные включения (эритроциты с ядром, тельца Жолли, кольца Кебота, базофильная зернистость). Обращаем внимание на наличие полихроматофилов и подсчитываем их.

4. Суправитальный (прижизненный) метод окраски на ретикулоциты.

Методика:

Берут пробирку, в равном соотношении вносят в нее кровь и специальную (основную) краску. Пробирку ставят на 2-3 часа для окраски. Затем делают мазок на предметное стекло. Высушивают и смотрят под иммерсией. В мазках при суправитальной его окраске ретикулоциты окрашены в желтовато-зеленый цвет, а зернистая субстанция – в синий или фиолетовый.

Подсчет производят на 100/1000 эритроцитов. Для облегчения подсчета ретикулоцитов используют счет окошечком. Из бумаги вырезают кружочек по размерам окуляра микроскопа. В центре кружочка прорезают отверстие размером 1,5 1,5 мм. Кружок, вложенный в окуляр, ограничивает поле зрения и этим значительно облегчает подсчет. Считаем 100/1000 эритроцитов и количество ретикулоцитов, встречающихся при этом. Выражаем в % или ‰.

Пример: на 100 эритроцитов обнаружено 15 ретикулоцитов, следовательно 1,5 %. Полихроматофилы подсчитываются также, только в мазке крови, окрашенном по Романовскому-Гимза или по Лейшману.

5. Ситуационная задача:

Больной С., 35 лет, поступил в хирургическую клинику по поводу непроникающего пулевого ранения грудной клетки.

Установлено массивное внутреннее кровотечение в связи с повреждением одной из ветвей легочной артерии.

Клинические данные: бледная кожа, артериальное давление 80/40 мм рт. ст., частый слабый пульс, учащенное поверхностное дыхание.

Результаты общего анализа крови, полученные через 5 дней после проведенной операции, остановившей кровотечение. Обнаружено:

НGB – 84 г/л, эритроцитов – 3,5× 10¹²/л, гематокрит – 30%, ретикулоцитов – 12 %, Hypo RBC – 21%, RDW – 23%, лейкоцитов – 14,2× 10⁹/л, СОЭ – 20 мм/ч.

Мазок крови: много полихроматофилов, 2 оксифильных нормоцита.

О чем свидетельствует картина мазка крови? Охарактеризовать данную патологию крови у больного по известным классификационным критериям. Дать патофизиологическую оценку предложенной анемии.

Схема протокола:

Показатели	Референс-интервал	Показатели при экспериментальная анемия
содержание HGB	120-166 г/л	84 г/л
количество RBC	3,8-5,5 ×1012/л	3,5×1012/л
гематокрит – HCT	36 – 48 %	30%
количество Ret	0,5 – 2%	12%
цветовой показатель	27 – 33 пг (абс. диапазон) 0, 85 – 1,05 (отн. диапазон)	?
Hypo RBC	< 10 %	21%
МСН	27 – 33 до 34 пг	?
МСНС	30 – 38 г/дл	?
MCV	80,0 – 100,0 фл	?
RDW	11,5 – 14,5 %.	23%
анизоцитоз	−/+	++
пойкилоцитоз	−/+	–
анизохромия	−/+	++
пат. включения	отсутствуют	отсутствуют
лейкоциты	4 – 9 ×109/л	14,2×109

ЦП – 24 пг (абс.) / 0,73 (отн.), МСН – 24 пг, МСНС – 28 г/дл по

совокупности представленных индексов – гипохромная; МCV – 85,7 фл – нормоцитарная.

Заключение по гемограмме

Анемия гипохромная, гиперрегенераторная, нормобластическая, нормоцитарная, с дегенеративными изменениями 1 степени тяжести (анизоцитоз и анизохромия ++), общим умеренным лейкоцитозом –

ОПГА в стадии костномозговой компенсации.