10. Что представляют собой микротест- системы для определения ферментативной активности бактерий: как производят посев и как учитывают результаты?

Они представляют собой контейнер из прозрачного полистирола, состоящий из 12 одинаковых ячеек, которые содержат сухие питательные среды с различными углеводами, многоатомными спиртами, аминокислотами, солями неорганических кислот и индикатором pH, стабилизированные поливиниловым спиртом.

Стерилизацию МТС проводят УФ-облучением. Микротест-системы особенно удобны при массовых бактериологических исследованиях в практических лабораториях.

Использование микротест-системы позволяет: 1) выявлять и идентифицировать бактерии рода Ureaplasma; 2) определять обсемененность исследуемого материала уреаплазмами, что важно для оценки их этиологической роли в развитии патологических процессов в урогенитальной системе; 3) оценивать чувствительность выделенных штаммов к антибактериальным препаратам, являющуюся основанием для рационального выбора антибактериальной терапии и одновременно дифференциально-диагностическим критерием идентификации (по отношению штаммов Ureaplasma spp. к антибиотикам групп макролидов и линкозамидов).

Микротест - системы предназначены для быстрого определения клинической чувствительности к антибиотикам бактерий определенных видов или родственных групп. Тестируемые препараты в стандартных концентрациях находятся в лунках готовых пластиковых планшетов. Определяют чувствительность исследуемой культуры к двум концентрациям каждого антибиотика: средней терапевтической и максимальной.

Материал из изолированной колонии с помощью мерной бактериологической петли (объем 1 мкл) вносят В 5 мл стандартной питательной среды, содержащей индикатор, и готовят суспензию. Готовую бактериальную суспензию разливают в лунки планшета по 0,1 мл и инкубируют при оптимальных для данного вида бактерий условиях температуры и газового состава среды. О росте бактерий судят по изменению цвета индикатора, что позволяет существенно сократить сроки исследования. Если бактерии сохраняют жизнеспособность в присутствии антибиотика, выделение продуктов метаболизма при­водит к изменению цвета индикатора.

Отсутствие изменения цвета свидетельствует о полном подавлении жизнедеятельности микроба. Результаты определяют через 4 ч инкубации с помощью спектрофотометра.

• проверяют чистоту культуры по контрольному посеву; • добавляют в определенные лунки необходимые реактивы, учитывают результаты биохимических реакций визуально при помощи таблиц «Интерпретация реакций» и/или цветных шкал и заносят их в бланки.

Ускорение исследование достигается также за счет большой посевной дозы бактерий и малого объема среды. Результаты учитываются визуально по изменению окраски среды. Идентификацию бактерий по результатам тестов производят по таблице ʼʼИнтерпретация реакцийʼʼ и заносят их в бланки (учет результатов теста на бета-галактозидазу проводят дважды: через 3-5 часов и через 18-24 часа, так как у некоторых штаммов желтое окрашивание к конечному сроку инкубации исчезает).

№ п/п	Тест	Код	Результат (цветовая реакция)
			Положитель­ный	Отрицатель­ный
ММТ-Е1
	Образование серо­водорода	Н2S	Черная, темно-серая	Бесцветная, светло-серая
	Утилизация маннитола	МАН	Желтая, оран­жевая	Красная
	Наличие лизиндекарбоксилазы	ЛИЗ	Синяя, синœе-зе­леная	Желтая, зелœе­ная
	Образование ин­дола	ИНД	Розовая, розо­вато-коричне­вая	Бесцветная
	Наличие орнитин-декарбоксилазы	ОРН	Синяя, синœе-зе­леная	Желтая, зелœе­ная
	Утилизация цитра­та натрия	ЦИТ	Синяя, синœе-зе­леная	Желтая, зелœе­ная
	Наличие уреазы	УРЕ	Малиновая, розовая	Желтая
	Утилизация мало-ната натрия	МАЛ	Синяя, синœе-зе­леная	Желтая, зелœе­ная
	Утилизация саха­розы	САХ	Желтая, оран­жевая	Красная
	Тест п/п		Результат (цветовая реакция)
		Код	Положитель­ный	Отрицатель­ный
	Наличие дезаминазы фенилаланина	ФЕН	Зелœеная, темно-зелœеная	Желтая
	Утилизация лак­тозы	ЛАК	Желтая, оран­жевая	Красная
	Утилизация сорбитола	СОР	Желтая, оран­жевая	Красная
ММТ-Е2
	Наличие аргининдегидролазы	АРГ	Синяя, синœе-зе­леная	Желтая, зелœе­ная
	Наличие бета-галактозидазы	ГАЛ	Желтая	Бесцветная
	Утилизация инозитола	ИНО	Желтая, оран­жевая	Красная
	Утилизация дульцитола	ДУЛ	Желтая, оран­жевая	Красная
	Утилизация арабинозы	АРА	Желтая, оран­жевая	Красная
	Утилизация рамнозы	РАМ	Желтая, оран­жевая	Красная
	Утилизация маль­тозы	МАТ	Желтая, оран­жевая	Красная
	Утилизация адонитола	АДО	Желтая, оран­жевая	Красная
	Утилизация раффи­нозы	РАФ	Желтая, оран­жевая	Красная
	Утилизация сали­цина	САЛ	Желтая, оран­жевая	Красная
	Утилизация глю­козы	ГЛЮ	Желтая, оран­жевая	Красная
	Наличие нитратредуктазы	НИТ	Темно-бордо­вая, бордовая	Желтая, оран­жевая