Mikra_ekz

16 вопрос. Ферменты микробов. Классификация ферментов по биологической роли, субстратной специфичности и зависимости от наличия или отсутствия субстрата. Принципы использования определения ферментативной активности микроорганизмов для их идентификации. Ферменты бактерий.

В основе всех метаболических реакций в бактериальной клетке лежит деятельность ферментов.

Классификация по роли в организме бактерии: оксидоредуктазы (молочная дегидрогеназа); трансферазы (фосфатаза, трансаминаза); гидролазы (пептидаза, липаза); лиазы (декарбоксилаза); лигазы (ацетил КоА-синтетаза); изомеразы (аконитаза).

Классификация по локализация: экзоферменты (выделяются в окружающую среду), эндоферменты ( локализуются в клетке).

Классификация ферментов микроорганизмов в зависимости от наличия или отсутствия субстрата: конститутивные (продукция не зависит от наличия или отсутствия субстрата); адаптивные: индуцибельные (продукция индуцируется присутствием субстрата) и репрессибельные (ингибируемые) (продукция подавляется накоплением субстрата) ;

Классификация ферментов микроорганизмов по субстратной специфичности: абсолютные -способность фермента катализировать превращение только одного, строго определенного субстрата; относительные-способность фермента катализировать превращения нескольких, сходных по строению, субстратов; стереоспецифичные- фермент катализирует превращение одного из возможных стереоизомеров субстрата.

Каждый вид микроорганизмов характеризуется специфическим набором ферментов, в связи с этим определение ферментного спектра является важнейшим этапом идентификации микроорганизмов. О наличии ферментов судят по способности микроорганизмов воздействовать на определенный субстрат. Проявление ферментативной активности характеризуется изменением физического состояния субстрата (разжижение желатины), закислением питательной среды (среды Гисса с углеводами, среда Ресселя, среда Олькеницкого), образованием определенных продуктов метаболизма (индол, сероводород, аммиак) и т.д.

Определение сахаролитических гидролаз (карбогидраз — ферментов, разлагающих углеводы) проводят с помощью биохимического ряда Гисса. Определение протеаз — ферментов, разлагающих белки, проводят путем обнаружения газов, являющихся конечным продуктом ферментации белков (индол, сеоводород, аммиак) с помощью специальных индикаторов. Липазы — ферменты разлагающие липиды, чаще всего определяют наличие лецитиназы посевом на желточный агар.

38 вопрос. Явления сожительства микроорганизмов с высшими организмами. Нормальная микрофлора организма человека, её роль. Дисбактериоз – сущность, причины развития. Биологические препараты для устранения дисбактериоза.

Некоторые микробы в процессе эволюции приспособились к условиям симбиоза с организмом хозяина. Различают формы симбиоза: мутуализм, комменсализм, паразитизм.

Микроорганизмы, населяющие организм здорового человека, образуют его нормальную микрофлору. Все многообразие микробов, встречающихся в организме человека, можно условно разделить на три группы: транзиторная микрофлора - микробы, случайно попавшие в организм, не имеющие приспособлений для выживания в нем; резидентная микрофлора - микробы постоянно живущие, приспособившиеся к существованию в определенных областях организма, преимущественно полезные для него; условно-патогенные, способные вызвать заболевание при ослаблении сопротивляемости организма, при нарушении нормальной микрофлоры.

Большая часть микроорганизмов находятся в ЖКТ, далее в ротоглотке, кожные покровы, урогенитальные тракты.

Некоторые представители микрофлоры участвуют в созревании и функционировании иммуной системы. Микрофлора толстой кишки является полезной для человека. Бактерии, тесно связанные со слизистой оболочкой благодаря адгезии (бифидо- и лактобактерии), образуют на ее поверхности биологическую пленку, препятствующую размножению и проникновению патогенных микробов. Микробная флора является антагонистом гнилостной микрофлоры, а также играет роль в водно-солевом обмене, в превращении пищеварительных ферментов, в продукции витаминов.

Дисбактериоз- любые количественные или качественные изменения типичной для данного биотопа нормальной микрофлоры человека, возникающие из-за ряда причин (потеря свойств и признаков у бактерий, появление новых видов, не свойственных биотопу).

Развитие дисбиоза кишечника провоцируют следующие причины: резкая смена климата, хирургические вмешательства, прием ряда лекарственных препаратов, дефицит ферментов, необходимых для переваривания пищи, неправильное питание, строгие диеты, заболевания ЖКТ (например, панкреатит, язва), кишечные инфекции, вирусные заболевания, нервные расстройства

Есть несколько групп биологических средств коррекции нарушений микрофлоры кишечника. Эубиотики, или пробиотики, содержат живые облигатные микроорганизмы; симбиотики — комбинацию из нескольких видов живых организмов; пребиотики — стимуляторы роста нормальных микроорганизмов; синбиотики — живые бактерии; пребиотические комплексы — рациональную комбинацию из пробиотиков, пребиотиков, сорбентов, витаминов, микроэлементов.

60 вопрос. Возбудители бруцеллёз: названия возбудителей по латыни, морфология, отношение к окраске по Граму, питательные среды для культивирования, факторы вирулентности, вызываемые заболевания, материалы для исследования и методы лабораторной диагностики, препараты для специфической профилактики и лечения.

Бруцеллёз- зоонозная инфекция. Больной человек не является источником инфекции.

Семейство Brucellaceae; род Brucella; вид Brucella melitensis, Brucella abortus, Brucella suis.

Возбудитель - мелкие аэробные грамотрицательные коккобактерии, 1,5x0,7 мкм, спор не образуют, неподвижны, на среде с сывороткой образуют капсулу. Требовательны к питательным средам, растут на средах с добавлением крови, печеночного отвара, триптозосоевого экстракта. Растут медленно. На плотных питательных средах вирулентные формы образуют S-формы, авирулентные R-формы. В жидкой-равномерно помутнение. Утилизируют углеводы без кислоты и газа. B. abortus продуцирует сероводород.

Brucella melitensis – заболевание мелкого рогатого скота; Brucella abortus – крупного рогатого скота, Brucella suis- заболевания свиней.

Факторы вирулентности: белки наружной мембраны, ЛПС, секреторные системы, уреаза; vi, А, М-антигены.

Материал для исследования: кровь, моча, костный мозг, пунктат лимфоузлов, ликвор.

Метод лабораторной диагностики: бактериологический( материал засевают в 2 флакона с жидкими питательными средами, один флакон помещают в CO2-инкубатор; инкубируют 30 дней, 37 градусов, каждые5 дней пересевают на плотные пит.среды), серологический ( РА, РПГА, ИФА, реакция Кумбса- определение титра антител, р-я Хеддельсона), биологический , аллергический (внутрикожная проба Бюрне с бруцеллином).

Лечение- этиотропная антибиотикотерапия, иммунотерапия неживой вакциной. Профилактика- живая вакцина штамма ВА-19А, предупреждение бруцеллеза среди животных , санитарно-ветеринарные мероприятия.

82 вопрос. Возбудитель герпес-вирусной инфекции: таксономическое положение, структура, типы, персистенция возбудителя в организме, источник и механизмы заражения, лечебные препараты.

Семейство Herpesviridae; Род Herpes; Вид Herpes simplex virus

Структура: овальная форма вируса, размер 150-200 нм, покрыт оболочкой с гликопротеиновыми шипами. Вирион содержит двунитевую линейную ДНК, икосаэдрический капсид. На поверхности вириона расположены гликопротеины gpA-gpF (среди них белок слияния gpB, белки уклонения gpC, gpE, gpI, типоспецифический gpC.

Различают 8 типов герпес-вирусной инфекции. Вирус простого герпеса 1 и 2 (герпес лица, рта, гениталий, менингит и т.д.); Вирус ветряной оспы (ветр.оспа, опоясывающий лишай); Цитомегаловирус (поражение ЦНС); Вирус Эпштейна- Барра; Герпесвирус человека 6, 7, 8 (внезапная экзантема, саркома Капоши).

Персистенция возбудителя в организме: входные ворота-кожа и слизистые оболочки. При первичной инфекции появляются везикулы с дегенерацией эпителиальных клеток (пораженные ядра клеток содержат тельца Каудри). Верхушка везикулы вскрывается через некоторое время и образуется язвочка, вскоре покрывающаяся корочкой (струпом); заживление. Инфекция переходит в латентную форму. Вирусы проходят через нервные окончания с передвижением вдоль нейрона ганглиев. Нейроны содержат в себе вирусный геном. Латентная инфекция-большинство людей пожизненные носители вируса, ДНК ВПГ-1 обнаруживают в узлах тройничного т обонятельного нервов, ВПГ-2- сакральные ганглии. Реактивация вируса вызвана факторами, снижающими иммунитет. Геном проходит обратно по аксону к нервному окончанию, что способствует репликации вируса в клетках эпителия.

Источник заражения- больной человек или носитель. Путь заражения-вирус передается половым путем, через предметы обихода, через плаценту, при рождении ребенка., реже воздушно-капельным. Лечебные препараты-противовирусные химиотерапевтические препараты (ацикловир, теброфеновую мазь и т.д.), препараты ИФН. Профилактика- в период ремиссии многократное введение инактивированной культуральной вакцины штаммов ВПГ-1, ВПГ-2.