Методы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний

Методы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний

Микробиологические (бактериологические, микологические, вирусологические) методы основаны на выделении чистой культуры возбудителя и ее последующей идентификации на основании морфологических, культуральных, биохимических, антигенных (серологических) и других признаков.

Располагая чистой культурой бактерий, можно определить их родовую и видовую принадлежность, факторы патогенности, а также чувствительность к антибиотикам и химиотерапевтическим препаратам.

Микологические исследования осуществляются реже, чем бактериологические, поскольку микроскопическая диагностика микозов достаточно надежна.

Микологические исследования проводят при диагностике кандидозов путем определения нарастания количества клеток дрожжеподобных грибов рода Candida, а также глубоких микозов.

Вирусологический метод является наиболее достоверным в диагностике вирусных инфекций. Однако его трудоемкость, связанная с приготовлением культуры клеток, обработкой исследуемого материала, а также со сравнительно частым получением отрицательных результатов, ограничивают применение данного метода. Кроме того, он требует затраты сравнительно большого времени, особенно при проведении «слепых» пассажей. Во многих случаях вирусологический метод используют для ретроспективной диагностики вирусных инфекций.

Все микробиологические методы имеют определяющее значение в лабораторной диагностике, являются наиболее информативными и достоверными, особенно если они подтверждены дополнительными серологическими данными.

Бактериологический метод 1)Посев материала на питательную среду

(например среда ЭНДО)-культивирование 2)Изучение или описание культуральных, морфологических и тинкториальных свойств (окраска по Граму) и выделяем чистую культуру 3)Идентификация чистой культуры по биохимическим признакам, определение серогруппы по АГ (РА со спец сыворотками на стекле) и определение чувствительности к антибиотикам (методом дисков)

Серологический метод материал сыворотка крови с помощью

серологических реакций определяют наличие и титр АТ (специфических) и проводим метод парных сывороток, которые подтверждает 4х кратное увеличение титра АТ во второй сыворотке. Для это используют РСК, РГА, РТГА, РПГА

Экспресс диагностика (при бак инфекциях редко ставится) ПЦР для обнаружения генома кожно-аллергические пробы для определения инфицированности, ставятся аллергенамм микробного происхождения

Биологический на лаб животных, куриный эмбрион и культура клеток

Вирусы

Вирусологический метод материал - смыв из носоглотки (грипп)

1.культивирование - заражение культур клеток или куриных эмбрионов

2.индикация вируса (то есть наличие вируса в культуре клеток) цветная проба (цвет среды изменяется - вируса нет, цвет среды не должен меняться - вирус есть, клетки погибают, не метаболизируют), бляшки под агаром (культура, вирус, агар > белые пятна), ЦПЭ - включения, симпласты, разрушение; гемагглютинин (у гриппа) то РГА (зонтики) и гемоабсорбции (эритроцитов)

3.Идентификация с помощью серологических реакций. Основа на применении типоспецифических сывороток, если они соответствуют АГ вируса - РН вируса. основана на ингибтровании действия вируса: РТГА

Экспресс - ПЦР для обнаружения генома,

серологический метод ищем АТ + парные сыворотки, увеличение титра в 4 раза