
ФГБОУ ВО ПГМУ им.академика Е. А. Вагнера
Минздрава России
Кафедра микробиологии и вирусологии
Утверждаю:
Зав. кафедрой микробиологии и
вирусологии, д.м.н., профессор
_____________ Горовиц Э.С.
Методическая разработка для дистанционного обучения студентов
Раздел: ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ
Занятие 5
Тема занятия: Выделение чистой культуры бактерий III-IV день работы. Биохимические свойства бактерий.
Асептика, антисептика, дезинфекция, стерилизация
Курс – II, семестр – 4
Факультет: ЛД, ПД
Продолжительность занятия: 3 академических часа
Пермь, 2020
ТЕМА ЗАНЯТИЯ: Биохимические свойства бактерий. Выделение чистой культуры бактерий III-IV день работы.
ВОПРОСЫ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ
Как называются 1 и второй этап бактериологического метода исследования?
Какие свойства бактерий изучают при проведении второго бак.метода этапа и для чего?
По каким критериям и как можно классифицировать ферменты бактерий?
Как называются среды для изучения биохимических (сахаролитических) свойств бактерий? Напишите их состав.
Как называются среды для изучения протеолитических свойств микроорганизмов? С помощью каких реактивов определяется выделение индола, сероводорода, аммиака?
Учтите биохимические свойства бактерий
Глюкоза Лактоза Маннит Мочевина Пептонная вода
Обучающие видео по теме.
Посев на среды Гисса https://youtu.be/SIGvtmloP08
3-4 день ВЧК и изучение биохимических свойств https://youtu.be/BspPQ-Vtq6Y
Ситуационные задачи
ИДЕНТИФИКАЦИОННАЯ ТАБЛИЦА
(Основные свойства некоторых родов семейства Enterobacteriaceae)
Признак |
РОД |
|||||
Esherihia |
Shigella |
Salmonella |
Klebsiella |
Proteus |
Citrobacter |
|
Морфология |
Мелкие палочки |
Мелкие палочки |
Мелкие палочки |
Мелкие палочки |
Мелкие палочки |
Мелкие палочки |
Тинктор.св. |
Грам – |
Грам – |
Грам – |
Грам – |
Грам – |
Грам – |
Подвижность |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
+ |
Капсула |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
Н2S |
- |
- |
+ |
- |
+ |
+ |
Индол |
+ |
в |
- |
в |
- |
- |
Глюкоза |
КГ |
К |
КГ |
КГ |
КГ |
КГ |
Лактоза |
КГ |
- |
- |
- |
- |
в |
Маннит |
КГ |
К |
КГ |
КГ |
- |
КГ |
Мочевина |
- |
- |
- |
в |
+ |
в |
Фенилаланин |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
Пояснения:
+ - положительные реакции
- - отрицательные реакции
____________________________
От пациента с симптомами острой кишечной инфекции выделена культура со следующими свойствами: мелкие Грам- палочки, подвижны спор и капсул не образуют, на МПА дают колонии прозрачные, бесцветные, средних размеров. Биохимические свойства: глюкоза – КГ, маннит – КГ, не разлагают лактозу, мочевину и фенилаланин. При разложении белка выделяют сероводород, не выделяют индол.
Идентифицируйте бактериальную культуру с помощью таблицы.
2. Из мокроты при пневмонии выделена бактериальная культура со следующими свойствами: мелкие Грам - палочки, в мазках чаще располагаются попарно или цепочкой, неподвижны, образуют капсулу. На МПА дают полупрозрачные, выпуклые колонии слизистой консистенции. Биохимические свойства: глюкоза – КГ, маннит – КГ, не разлагают лактозу и фенилаланин. При разложении белка не выделяют сероводород и индол. Разлагают мочевину.
Идентифицируйте бактериальную культуру с помощью таблицы.
3.От больного с симптомами острой кишечной инфекции выделена копрокультура со следующими свойствами: мелкие Грам - палочки, неподвижны, спор и капсул не образуют, на МПА дают колонии прозрачные, бесцветные, средних размеров. Биохимические свойства: глюкоза – К, маннит – К, не разлагают лактозу, мочевину и фенилаланин. При разложении белка не выделяют сероводород и индол.
Идентифицируйте бактериальную культуру с помощью таблицы.
4.В процессе бак. исследования выделены две культуры. Традиционно для идентификации изучаются биохимические свойства бактерий:
Как изучаются биохимические свойства?
С какой целью, с чем они связаны?
Какие возможны результаты исследования и как их оценивают?
Связаны ли биохимические свойства с тинкториальными и формой бактерий?
5.Из гноя были выделены стафилококки. Изучение биохимических свойств проводили с помощью тест-системы Staphy-tеst16 - посев был выполнен в лунки стандартной содержащей углеводы (см. фото). Были получены следующие результаты (рис.1).
|
H |
G |
F |
E |
D |
C |
B |
A |
углевод |
URE уреаза |
ARG аргинин |
ORN орнитин |
BGA β-галактозидаза |
GLR β-глюкуронидаза |
ESL эскулин |
NIT нитраты |
PHS фосфатаза |
1 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
GAL галактоза |
SUC сахароза |
TRE трегалоза |
MAN маннитол |
XYL ксилоза |
MLT мальтоза |
MNS манноза |
LAC лактоза |
2 |
|
|
|
|
|
|
|
|
VPTtest |
|
|
|
|
|
|
|
|
OXItest |
|
Рис.1. |
|
|
|
|
|
|
VPTtest - определения продукции ацетоина (Реакция Фогес-Проскауера)
OXItest - тест на оксидазу
Идентифицируйте культуру используя индикаторную карточку и идентификационную таблицу для определения вида стафилококков по Staphy-tеst16ээ
Индикаторная карточка (образцы цвета положительных и отрицательных результатов).
Вероятность положительныых результатов
Решите тестовые задания. Выберите один или несколько правильных ответов.
1.БАКТЕРИИ ФЕРМЕНТИРУЮТ УГЛЕВОДЫ С ОБРАЗОВАНИЕМ:
А. Кислоты/кислоты и СО2
Б. Кислоты и Н2S
В. Н2О и СО2
Г. Кислоты/щелочи
2. В СОСТАВ СРЕД ГИССА (СРЕД “ПЕСТРОГО РЯДА”) ВХОДЯТ СЛЕДУЮЩИЕ КОМПОНЕНТЫ:
Углеводы или многоатомные спирты
Мочевина
Цистеин
Дефибринированная кровь
3.НА 1 ЭТАПЕ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА РЕШАЮТСЯ СЛЕДУЮЩИЕ ЗАДАЧИ: