ilovepdf_merged
.pdf
Типы микробных колоний
• S-тип колоний [от англ. smooth - гладкий] характеризуется круглой, выпуклой и правильной формой, гладкой поверхностью, влажной консистенцией.
• R-тип колоний [от англ. rough - шероховатый] характеризуется шероховатой поверхностью, неправильными краями, сухой консистенцией.
•М-тип колоний [от англ. mucoid - слизистый].
•D-тип колоний [от англ. dwar - карликовый].
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Биохимические признаки, используемые для идентификации бактерий
Способность расщеплять углеводы
(сахаролитические свойства) изучают на средах Гисса («пестрый ряд»). Это жидкие с поплавком или полужидкие среды разлитые в пробирки столбиком, в состав которых введен
индивидуальный углевод (глюкоза, лактоза,
сахароза, мальтоза, арабиноза, манит и т.д.) и индикатор, изменяющий окраску в кислой среде.
Если микроб расщепляет сахар, то образуется кислота, и цвет среды изменяется. Некоторые микроорганизмы кроме кислоты образуют и газ, пузырьки которого накапливаются в поплавке или застревают в полужидком агаре, что тоже служит диагностическим признаком.
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
«Пестрый ряд» (среды Гисса).
•Состав: к 1% пептонной воде добавляют 0,5% раствор определен-
ного углевода (глюкоза, лактоза, мальтоза, маннит и др.) и индикатор Андреде (кислый фуксин в 1 N растворе NaOH), разливают по пробиркам.
Впробирки помещают поплавок (трубка длиной около 3 см, верхний конец которой запаян) для улавливания газообразных продуктов, образующихся при разложении углеводов. Среда при рН 7,2-7,4 бес-
цветна. При разложении углеводов она приобретает малиновый
цвет.
•Идентификация бактерий по биохимическим признакам с помощью сред "пестрого ряда". Короткий "пестрый ряд" включает жидкие среды Гисса с моно- и дисахаридами: глюкозой, лактозой, сахарозой, мальтозой и с 6-атомным спиртом — маннитом.
Вдлинный "пестрый ряд" наряду с перечисленными углеводами вводят среды с разнообразными моносахаридами (арабиноза, ксилоза, рамноза, галактоза и др.) и спиртами (глицерин, дульцит, инозит и др.).
•Чистую культуру исследуемого микроорганизма засевают петлей в среды "пестрого ряда". Посевы инкубируют при 37 °С в течение
18-24 ч или больше. В том случае, если бактерии ферментируют углевод до образования кислых продуктов, наблюдается изменение цвета среды; при разложении углевода до кислоты и газообразных продуктов наряду с изменением цвета появляется пузырек газа в поплавке. Если используют среды с полужидким агаром, то образо-
вание газа регистрируется по разрыву столбика. При отсутствии
ферментации цвет среды не меняется. |
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов |
|
Среды Гисса («короткий пёстрый ряд») с индикатором Андреде
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Среды Гисса («короткий пёстрый ряд») с индикатором Андреде
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Среда Клиглера: Состав: МПА, 1 % лактозы,
0,1% глюкозы, тиосульфат натрия и сульфат железа, индикатор феноловый красный.
Посев по поверхности и уколом в столбик агара.
Учет результата:
При ферментации только глюкозы – желтый столбик,
скошенная часть не меняет окраску.
При ферментации глюкозы,
и лактозы (E. coli) –
вся среда желтая.
При образовании H2S (сальмонеллы, протей) –
агар чернеет.
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
РОСТ НА СРЕДАХ ГИССА
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Биохимические признаки, используемые
для идентификации бактерий
Способность расщеплять белки (протеолити-
ческие свойства) изучают на белковых средах
(свернутая сыворотка, полужидкий желатин) –
обладающие протеолитическими свойствами бактерии растворяют питательную среду.
Определение уреазы
проводится в среде Гисса с мочевиной и индикатором феноло- вым красным.
При наличии гидролиза мочевины происходит защелачивание среды за счет образования аммиака, и среда краснеет.
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
ПРОТЕОЛИЗ. РАЗЖИЖЕНИЕ ЖЕЛАТИНА
ЛАКМУСОВОЕ МОЛОКО
Тест позволяет определить не только способность бактерий расщеплять белки, но и степень выраженности их протеолитической активности по «+++ системе»,
но и редуцирующую активность
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов