7. На прибывшем в порт судне обнаружены трупы грызунов. Наметить план микробиологической индикации возбудителя.

Необходимо обратить внимание на то что грызуны являются переносчиками опасных инфекций таких как: чума, лептоспироз, трихофития, микоспория, ГЛПС, псевдотуберкулез, туляремия и т.д.

Поэтому первоначально необходимо провести вскрытие грызунов и произвести забор проб и мазков с различных органов и тканей, заражение которых характерно для определенного заболевания. После чего пробы доставляют в лабораторию, где они подвергаются микроскопическому, бактериологическому и биологическому методу исследования. Далее выносится заключение о наличии или отсутствии патогенных микроорганизмов в пробах. Трупы животных после забора материала необходимо уничтожить

Также целесообразно провести противоэпидемические мероприятия, направленные на обследование экипажа на предмет заражения инфекцией. Имеет смысл провести дератизацию и дезинфекцию судна.

7. В хирургическое отделение поступил пациент с травмой правой голени. Мягкие ткани голени размозжены, загрязнены землей. Составить алгоритм микробиологического исследования биоматериала.

Необходимо произвести исследование, направленное на обнаружение обсеменённости почвы в раневой поверхности патогенными и условно патогенными микроорганизмами, с целью установления диагноза, прогрессирования болезни и назначения адекватного лечения.

Поскольку в почве могут обитать, как и аэробные микроорганизмы (стафилококки, стрептококки, и др), так и анаэробные (в основном различные виды клостридий: Cl. perfringens, Сl. novyi, Сl. septicum). То целесообразно микробиологическое исследование начинать с отделения культур аэробов от культур анаэробов для дальнейшего исследования с последующей идентификацией возбудителей, определения их чувствительности к антибиотикам и другим факторам. При этом органический материал из раны помещают на питательные среды, где за короткий срок в благоприятных условиях микроорганизмы образуют обширные колонии.

По размеру и форме колонии, ее цветовому оттенку, характеру поверхности и другим особенностям можно идентифицировать возбудителя. А используя дисково-диффузионный метод, или внедрение в колонии специальных дисков, содержащих расширенный спектр антибиотиков или бактериофагов, можно определить чувствительность флоры к лекарственным препаратам. Питательные среды и диски стандартизированы, и результаты выдаются лабораторией строго по форме.

Так посредством почвы раневая поверхность может инфицироваться спорами возбудителя Clostridium tetani с развитием столбняка, которая также является анаэробной инфекцией. Профилактика анаэробной инфекции заключается в своевременной первичной обработке раны. С профилактической целью при загрязненных ранах нижних конечностей вводят 30 000 АЕ противогангренозной сыворотки.

Профилактика столбняка заключается в плановой вакцинации: АКДС, АДСм, АСм. Экстренная проводится следующим образом: ранее привитым вводят столбнячный анатоксин (0.5 мл), не привитым – 1 мл анатоксина совместно с донорским иммуноглобулином. Все вводится дробно, по методу Безредко. лечение столбняка направлено на введение лошадиной противостолбнячной сыворотки, либо донорского противостолбнячного иммуноглобулина.

Другие микроорганизмы в ране уничтожаются в соответствии с их особенностями.

7. В стационар поступил пациент с клиникой ботулизма. В лабораторию доставлены рвотные массы, остатки консервов (предполагаемый источник заражения). Составить алгоритм микробиологического исследования материала.

Ботулизм – это острая инфекционная болезнь, развивающаяся после употребления пациентом продуктов, содержащих токсин ботулизма.

Токсин воздействует на синаптическую передачу в нервной системе, блокируя ее. Избирательно поражаются альфа-мотонейроны передних рогов спинного мозга, что обусловливает появление характерных параличей мышц. После установления достоверного диагноза, подтвержденном микробиологическими методами исследования, проводят мероприятия направленные на профилактику и лечение данного заболевания.

Материалом для микробиологического исследования являются рвотные массы, промывные воды желудка, кал, кровь, моча, остатки пищевых продуктов. При летальном исходе исследуют содержимое желудка, кишечника, лимфатические узлы, головной и спинной мозг.

Используют методы микробиологической диагностики: бактериологический, биологический (для выявления ботулотоксина в исследуемом материале). С целью выявления ботулотоксина можно использовать также РОПГА с антительным диагностикумом и определение активности фагоцитов.

Лабораторное исследование: необходимо провести исследование рвотных масс, и пищевых продуктов, а также другие материалы исследования: кровь, моча, фекалии. Исследование направлены одновременно на обнаружение в материале ботулотоксина и выделение возбудителя. Ботулотоксин определяют в биопробе на животных или в РНГА и ИФА. Животным вводят смеси материала с антитоксической сывороткой типов А, В, Е и др. Кровь исследуют только на наличие токсина на морских свинках. Испражнения исследуют путем посева на среды в анаэробных условиях. Содержимое консервов аналогично исследуются для определения токсина и возбудителей.

АЛГОРИТМ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА. Исследуемый материал растирают в стерильной ступке с физиологическим раствором хлорида натрия. Посев материала выполняют на специальные питательные среды, например, среду Китта-Тароцци. Одну пробу засевают в 4 пробирки, две из которых прогревают при температуре 60°С 15 мин. (для селекции C. botulinum типа Е), а остальные - при температуре 80°С 20 мин. Накопление культур клостридий типа Е и F происходит при температуре 28°С, типа А, В, С - при 35°С в течение 48 часов. Через 24-48 часов выдержки посевов в термостате отмечают характер роста на среде Китта-Тароцци: помутнение, газообразование. Готовят мазки, окрашивают по Граму. В случае выявления типичных клостридий с терминально расположенными спорами овальной формы в виде «теннисной ракетки» делают, пересев на кровяной сахарный агар для получения отдельных колоний и выделения чистой культуры. Для идентификации чистой культуры возбудителя определяют сахаролитические и протеолитические свойства. Антигенные свойства изучают в реакции агглютинации с типовыми сыворотками. Одновременно с изучением ферментативных свойств возбудителя выявляют ботулотоксин в фильтрате бульонной культуры и определяют его тип в реакции нейтрализации.

АЛГОРИТМ БИОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА. Выявление ботулотоксина и определение его типа с помощью реакции нейтрализации имеет важное значение для назначения специфической терапии. Для проведения реакции нейтрализации используют сухие диагностические антитоксические сыворотки типов А, В, С, Е, F, которые разводят физиологическим раствором до 100-200 МЕ / мл, что обеспечивает нейтрализацию гомологичного токсина в исследуемой пробе. Реакцию нейтрализации проводят либо со смесью сывороток (предварительная реакция), либо с моновалентными сыворотками для определения типа токсина.

Профилактика: уничтожение всей партии пищевых продуктов, потенциально содержащей ботулотоксин и его продуцентов с целью предотвращения массовой заболеваемости; Для специфической профилактики используют ботулинический полианатоксин, содержащий анатоксины А, В и Е. Для экстренной профилактики используют поливалентную (типов А, В, Е) лошадиную сыворотку, выпускаемую в сухом и жидком виде.