Lecture / Presentation 2 / ! През11. Гангр, Столб, ботул, ПМК

Клинические проявления

Доцент Наумов Г.Н., КГМУ

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Исследуемый материал: некротизированные ткани, отечная жидкость, экссудат из ран, кровь

Методы диагностики:

Бактериоскопический

Бактериологический

Биологический

Ускоренная диагностика - биопроба на животных,

газо-жидкостная хроматография

Экспресс-диагностика (микроскопия материала, РИФ, посев в среды Китта-Тароцци, Вильсон-Блера и молоко)

Доцент Наумов Г.Н., КГМУ

Диагностика клостридиозов

Доцент Наумов Г.Н., КГМУ

Кровяной агар Цейсслера:

3%-ный МПА с 1-2 % глюкозы, смешивают (при температуре 50 °С) с 15-20% свежей дефибринированной крови барана, КРС, лошади, кролика или морской свинки.

Метод Перетца. В расплавленный и охлаждённый сахарный агар вносят суспензию из материала, содержащего анаэробы и заливают под стекло (6х6 см), помещённое на фрагментах спичек в чашку Петри. Под стеклом создаются анаэробные условия.

Наиболее простой и удобной разновидно-

стью метода является метод «перевернутых чашек». При этом исследуемый материал в пробирке с расплавленным сахарным агаром заливают в крышку чашки Петри и закрывают стерильным донышком чашки, избегая обра-

зования пузырьков воздуха. Щель между краями крышки и дном чашки Петри заливают расплавленным парафином.

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

Схема выделения чистой культуры облигатных анаэробов

•Взятие исследуемого материала осуществляется шприцем с притертым поршнем, после чего материал вносят в пробирку с транспортной средой.

•Выделение чистой культуры проводится со строгим соблюдением анаэробных условий на всех этапах исследования.

1-й этап – получение изолированных колоний.

•Готовят ряд разведений исследуемого материала и делают посев на чашки Петри со средой КАБ или другой питательной средой для культивирования анаэробов.

•Посевы инкубируют в микроанаэростатах, заполненных газовой смесью, при температуре 37 °С в течение

48-72 часов.

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

Схема выделения чистой культуры облигатных анаэробов

2-й этап - получение чистой культуры анаэробов.

На этом этапе:

1.Изучают морфологические и культуральные свойства выросших колоний.

2.Проводят параллельный рассев каждой отобранной колонии на две чашки Петри с питательной средой. Одну чашку инкубируют в аэробных условиях, другую -

ванаэробных условиях.

3.Для дальнейшего исследования отбирают культуры, выросшие только в анаэробных условиях (так исключают факультативные анаэробы)

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

Схема выделения чистой культуры

облигатных анаэробов

3-й этап - идентификация выделенных облигатных анаэробов.

• Проводят биохимическую идентификацию в микротест-

системе, например АР1-20А. Суспензию выделенной культуры засевают на пластину АР-20А с набором биохимических тестов, инкубируют в анаэробных условиях в течение 48 часов, учитывают биохимические свойства культуры по изменению окраски индикаторов системы и определяют ее родовую и/или видовую принадлежность.

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

Биологический метод

При обнаружении возбудителей газовой гангрены ставят биологическую пробу на мышах для определения вида возбудителя.

Для этого исследуемый материал разливают по 0,9 мл

в 5 пробирок и в каждую прибавляют по 0,6 мл соответствующих

антитоксических сывороток:

С. perfringens, С. novyi, C. septicum, C. histolyticum, C. sordellii. В

последнюю, 6-ю пробирку вносят изотонический раствор натрия хлорида - контроль.

Смесь токсина с антитоксической сывороткой оставляют при комнатной температуре на 40 мин для нейтрализации токсина. По 0,5 мл из каждой пробирки вводят внутривенно двум мышам. За животными ведут наблюдение.

Гибель животных может наступить в сроки от 5-6 ч до 3-4 дней. Мыши, получившие токсин с гомологичной антисывороткой, остаются

живыми.

Доцент Наумов Г.Н., КГМУ

Газовая гангрена

препараты для лечения и профилактики

Антибиотики - используют при лечении Антитоксические сыворотки - лошадиные поливалентные применяют для профилактики при ранениях, а также для лечения при первых признаках газовой гангрены. После идентификации возбудителя вводят сыворотки, содержащие антитела против токсина данного вида клостридий.

Анатоксины созданы, но не нашли широкого применения.

Доцент Наумов Г.Н., КГМУ

Столбняк (tetanus)

— острая токсическая раневая инфекция, характеризующаяся поражением нейротоксином

двигательных клеток спинного

и головного мозга, которое проявляется в виде судорог поперечнополосатой мускулатуры.

Доцент Наумов Г.Н., КГМУ