Лекции / 8_Генетический подход
.pdfМикроядерный тест
Принцип метода заключается в образовании
микроядер вследствие нарушения распределения генетического материала между дочерними клетками (5%) или формирующихся из обломков хромосом (до 95%) при митотическом делении.
Подсчитывают обычно 500 бинуклеарных клеток, используя метод цитокинетического блока (цитохолазина-Б блокирует разделение цитоплазмы).
Возможность применения теста для биодозиметрии ограничена 2 – 4 годами после облучения.
Для проявления биологического эффекта в лимфоцитах крови необходимо, вероятно, несколько месяцев, т.ч. существует органические и «снизу».
Образование
микроядер
в митозе
Правила подсчета микроядер
Микроядра имеют округлую или овальную форму и обладают типичной ядерной окраской,
в цитоплазме одной бинуклеарной клетки может присутствовать одно микроядро и более,
микроядра меньше половины основного ядра,
регистрировать следует те микроядра, между которыми и основным ядром четко выявляется ядерная мембрана.
Реконструкция дозы γ-облучения по микроядерному тесту
При дозах от 1 до 4 – 5 Гр увеличение количества микроядер в клетках линейно для всех видов излучений.
При дозах от 0.05 до 2 Гр выход микроядер описан линейноквадратичной зависимостью.
В диапазоне доз 0.05 – 0.1 Гр имеется плато (дозонезависимый участок).
Реконструкция дозы γ-облучения по микроядерному тесту
Y 0,029 0,111D 0,011D2
где Y – количество микроядер на одну двуядерную клетку,
D – доза облучения.
Информацию по данному методу можно получить
Использование микроядерного теста для индикации пострадиационных эффектов у человека. Методические указания. – Л., 1991. – 14 с.
Микроядерный тест на растительных объектах
Этапы работы
Фиксация
Проращивание традесканции |
Препарирование |
|
и окрашивание |
||
|
Микроядра в клетках традесканции
Литература
Гераськин С.А., Сарапульцева Е.И., Цаценко Л.В. и др. Биологический контроль окружающей среды: генетический мониторинг: уч.пособие для студентов вузов / Под ред. С.А.Гераськина и Е.И.Сарапульцевой. – М.: Академия, 2010. 208 с.
Гриф УМО по классическому университетскому образованию
2. Мелехова О.П., Сарапульцева Е.И., Евсеева Т.И. и др. Биологический контроль окружающей среды: биоиндикация и биотестирование:
уч.пособие для студентов вузов / Под ред. О.П. Мелеховой и Е.И. Сарапульцевой. Изд. 3-е. – М.:
Академия, 2010. 288 с. Гриф Минобрнауки