Стенд и доклад по статьям / Презентация по статье

Слайд 1.

Презентация по статье:

«Выживаемость патогенных и условно-патогенных бактерий животноводческих стоков при различных способах их внесения на лугопастбищные травы»

Слайд 2.

Цели исследования.

• Оценить выживаемость санитарно-показательных бактерий в пастбищных травах при нормах полива их стоками свино-комплекса 270, 180 и 90 м3/га.гектар

• Выявить зависимость бактериального обсеменения растений от нормы полива сточными водами (СВ).

• Выявить наиболее значимые факторы, влияющие на численность бактерий.

Слайд 3.

Объекты и методы исследования.

Объектом исследований являлась растениеводческая продукция, полученная на ОАО «Селекционно-гибридный центр «Западный»: многолетние лугопастбищные травы и их микроорганизмы. Для установления зависимости бактериального загрязнения растений от дозы вносимых стоков был заложен мелкоделяночный полевой опыт. Размер делянки 1 м2. Сообщество многолетних трав включало овсяницу тростниковую, ежу сборную, клевер луговой. Используемые поливные нормы СВ – 90, 180 и 270 м3/га. Внесение стоков проводили в июле после второго укоса трав. Пробы растений отбирали до полива, а также через 5, 10 и 21 день после полива.

В сухую погоду отбирали растительные пробы в количестве 200–500 г. Исследуемый материал тщательно перемешивали и измельчали на кусочки длиной около 1 см, приготавливая затем суспензии с физиологическим раствором. Из них готовили серии разведений для посева на питательные среды.

Слайд 4

БГКП (Бактерий группы кишечной палочки) определяли методом посева суспензий на поверхность среды Эндо. Чашки с посевами инкубировали 18–24 ч при температуре 37 ± 1 °С. При обнаружении грамотрицательных палочек по 2–3 колонии каждого типа засевали полужидкую среду с лактозой для подтверждения ферментации лактозы. Через 18 ч инкубации проводили учет.

Слайд 5

Результаты и их обсуждение

После внесения стоков травы всех политых делянок содержали E. Coli. Через 5 дней его содержание возросло 2,3∙103, 3∙102 и 10 КОЕ/г. при 270, 180 и 90 м3/га соответственно.

Через 10 сут данный вид энтеробактерий отсутствовал при 180 и 90, а при 270 оставался на уровне 1,5∙102 .

К 21-му дню данный вид полностью отсутствовал.

Слайд 6.

Через 5 дней наблюдался скачок БГКП: при 270 м3/га значение увеличилось в 3 раза, при 180– в 2 раза, при 90– в 2 раза.

Через 10 дней при 180 и 90 снизилось в 55 и 18 раз соответственно. При 270 снизилось в 4,6 раза.

Через 21 день при норме 270 м3/га увеличился до 6,5∙102 КОЕ/г, при 180 – до 102, при 90– до 55.

Слайд 7

Количество лактозо\отрицательных энтеробактерий через 5 дней увеличилось: при 270– в 2,35 раза, при 180 – в 2,18, при 90– в 1,33.

К 11-му дню количество снизилось от 1,4 до 2,2 раза.

К 21-му дню количество незначительно, оставаясь ниже, чем до полива.

Слайд 8

Показатель Общего микробного числа через 5 дней превышал значение в контроле в 5,7; 4,5; 1,3 раза соответственно.

При 270, 180 к 11-му дню сократилось в 3–3,6 раза. При 90 оно не изменилось.

К 21-му дню при 270 оставалось повышенным в 1,6 раза, при 180 и 90 снизилось в 3,3 и 1,9 раза.

Через 5 дней количество энтерококков изменилось в 22; 7,7; 3,6 раза соответственно.

На 11-й день снизилось в 4,9, 3 и 1,4 раза.

К 21-му дню при 270 осталось на том же уровне. При 180 и 90 снизилось в 5,5 и 1,75 раза.

Слайд 9

По полученным данным были составлены две таблицы по соответствующим формулам расчета: под номером 1 - уравнение отмирания 1-го порядка и под номером 2 – уравнение множественной регрессии.

Независимые факторы, значения которых использовали для построения моделей, приведены в табл. 2.

Аппроксимация 1-го порядка позволила оценить скорость отмирания микрофлоры растений. Модель оказалась адекватной для показателей E. coli, энтерококков и ОМЧ, но не для БГКП и лактозо\отрицательных энтеробактерий, у которых наблюдался повторный рост.

Из уравнения множественной регрессии следует, что увеличение объема внесенных стоков на 1 м3/га приведет к повышению содержания E. coli на 0,009 lg КОЕ/г, для БГКП - на 0,01, для лактозоотрицательных энтеробактерий - на 0,001.

Характер динамики ОМЧ описывался в зависимости от времени. Исходя из уравнения, скорость отмирания мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов варьировалась от 0,089 до 0,17 день–1.

Слайд 10

Выводы

1. Количество санитарно-показательной микрофлоры трав после полива стоками свинокомплекса находится в прямой зависимости от нормы сточных вод. Так, через 21 день количество бактерий при нормах полива 270, 180, 90 м3/га в сравнении с контролем возрастало для показателя БГКП в 118, 18 и 10 раз, для энтерококков – в 15, 5 и 3 раза, для ОМЧ – в 11; 2,6; 3 разa.

Через 21 день E. coli отсутствовал при всех вариантах полива. Это нужно учитывать при назначении карантинного срока перед стравливанием животным зеленого корма.

2. Для E. coli, ОМЧ, энтерококков адекватна модель экспоненциального отмирания бактерий в растениях после полива. Время 10-кратного сокращения числа бактерий было меньше у E. coli – 4,76 дня, для энтерококков от 22,91 до 26,69, для ОМЧ – от 13,37 до 25,77 дня.

3. Созданные модели динамики санитарно-показательной микрофлоры в зеленой массе многолетних трав после полива сточными водами позволили выявить наиболее значимые факторы, влияющие на численность бактерий, а также прогнозировать ее в рамках созданных моделей.

Вопросы:

Что значит КОЕ/г?

КОЕ/г - (колониеобразующие единицы) – это показатель количества жизнеспособных микроорганизмов в единице объема (1 см3), в жидкости (1 мл), или в твердом/сухом материале (1 г). 

Каково было общее содержание бактерий в сточных водах?

Содержание бактерий в сточных водах (КОЕ/100 мл): общие колиформные бактерии – 6,2∙103, термотолерантные колиформные бактерии – 2,4∙102, энтерококки – 105; ОМЧ – 1,5∙105.

Что свидетельствовало о присутствии бактерии группы кишечной палочки?

Наличие кислоты и газа свидетельствовало о присутствии бактерий группы кишечной палочки. При наличии только кислоты пробирки оставляли в термостате еще на 24 ч, после чего при отсутствии газообразования результат учитывали как отрицательный.

Как проводили определение видового состава условно-патогенных бактерий?

Определение видового проводили методом бактериологического анализа. Выросшие на плотных питательных средах энтеробактерии отсевали на комбинированную среду Клиглер для первичной дифференциации и накопления культуры.

Для определения наличия энтерококков делали прямой посев суспензий на плотную селективную среду (энтерококк\агар). Чашки инкубировали 44–48 ч при температуре 37 ± 1 °С.

Метод определения ОМЧ основан на выявлении их на мясопеп\тонном агаре, при культивировании посевов в аэробных условиях при температуре 37 °С в течение 24 ч.

Что значит время 10-кратного сокращения численности?

D-значение, или «время десятичного сокращения», – это время, необходимое для достижения гибели 90 % (или 1 lg) бактерий при определенном наборе условий.

Термины:

Мезофилы – умеренная температура

Факультативные анаэробы — организмы, энергетические циклы которых проходят по анаэробному пути, но способные существовать при доступе кислорода

Лактозо\отрицательные энтеробактерии – это измененные кишечные палочки, утратившие способность сбраживать лактозу. Они выделяются при кишечных инфекциях человека в период выздоровления.

Множественная регрессия – это анализ связи между несколькими независимыми переменными и зависимой переменной. 

Обсеменение – осаждение

Среда Эндо — дифференциально-диагностическая питательная среда, предназначенная для выделения энтеробактерий. 

Грамотрица́тельные бакте́рии— бактерии, которые не окрашиваются кристаллическим фиолетовым при использовании окраски микроорганизмов по методу окрашивания по Граму.

Среда Киглер - рекомендуют для изучения у грамотрицательных бактерий кишечного происхождения способности ферментировать глюкозу и лактозу, а также продуцировать сероводород.

Энтерококкагар сухой. Питательная среда для выделения энтерококков из клинического материала, воды, пищевых продуктов и других объектов.

Мясопептонный агар - основная плотная питательная среда, используемая для выращивания хемо\органо\трофных бактерий.

Аппроксима́ция — научный метод, состоящий в замене одних объектов другими, в каком-то смысле близкими к исходным, но более простыми.

Термотолерантные колиформные бактерии – это группа микроорганизмов, ферментирующих лактозу при температуре 45 °C.