1. Макроскопический анализ листьев.

2. Макроскопический анализ травы.

3. Макроскопический анализ плодов и семян.

4. Макроскопический анализ коры.

5. Макроскопический анализ подземных органов.

6. Микроскопический анализ листьев.

7. Микроскопический анализ травы.

8. Микроскопический анализ плодов.

9. Микроскопический анализ семян.

10. Микроскопический анализ подземных органов.

11. Микроскопический анализ коры.

12 Физико-химические методы анализа биологически активных веществ лекарственного растительного сырья.

Современные физико-химические методы анализа имеют ряд преимуществ перед классическими химическими методами. На сегодняшний день существует большое количество аналитических приборов, выпускаемых отечественными и зарубежными фирмами и позволяющих анализировать практически любые органические соединения, содержащиеся в природных объектах. Они отличаются избирательностью, высокой чувствительностью, высокой степенью автоматизации.

К наиболее широко распространённым в настоящее время современным методам анализа растительного сырья относятся хроматографические методы и методы фотометрического анализа. Важнейшей особенностью этих методов является объективность оценки количественного содержания фармакологически активных веществ, что, в свою очередь, определяет качество растительного сырья.

Хроматографические методы анализа используются для разделения смеси веществ или частиц (например, ионов) и основаны на различии в скорости их перемещения в системе несмешивающихся и движущихся относительно друг друга фаз. Поэтому хроматография применяется как на этапе пробоподготовки (очистки анализируемого компонента или смеси компонентов от сопутствующих примесей), так и в ходе непосредственного качественного и количественного анализов. При этом идентификация компонентов проводится по параметрам их удерживания в сравнении со стандартными образцами (свидетелями). Определение содержания искомых соединений или их групп в исходной смеси после хроматографического разделения проводится другими физико-химическими методами в зависимости от способа детекции.

По механизму разделения различают следующие виды хроматографии, применяемые в анализе лекарственного растительного сырья.

Адсорбционная хроматография, в основе которой лежит непрерывный обмен хроматографируемым веществом между неподвижной (твёрдой или жидкой) и подвижной фазами, обусловленный существованием на поверхности раздела фаз динамического равновесия между процессами адсорбции и десорбции хроматографируемого вещества, растворённого в подвижной фазе.

Распределительная хроматография, в основе которой лежит процесс непрерывного перераспределения хроматографируемого вещества между подвижной и неподвижной фазами, причём это вещество растворимо в каждой из фаз.

Ионообменная хроматография, в основе которой лежит обратимая хемосорбция ионов анализируемого раствора ионогенными группами сорбента. В зависимости от характера ионогенных групп ионообменные сорбенты (иониты) подразделяются на катионообменные (катиониты) и анионообменные (аниониты). Ионообменная хроматография в современном фармакогностическом анализе применяется весьма ограниченно, главным образом для очистки анализируемых компонентов от сопутствующих примесей.

В анализе лекарственного растительного сырья применяется несколько методов хроматографического разделения, подразумевающих соответствующее аппаратурное оформление.

Адсорбционная хроматография на колонкахиспользуется главным образом для очистки анализируемых компонентов от сопутствующих примесей. Классическая хроматографическая колонка представляет собой стеклянную трубку, заполненную сорбентом. Для разделения и очистки соедине­ний растительного происхождения чаще всего используют полиамидный сорбент и силикагель, реже применяют колоночную хроматографию на сефадексе и алюминия оксиде. Так, очистку суммы флавоноидов травы сушеницы топяной и плодов боярышника, суммы ксантонов в траве золототысячника проводят с помощью адсорбционной хроматографии на полиамидном сорбенте. Затем в полученном элюате спектрофотометрическим методом определяют содержание действующих веществ.

Как вариант адсорбционной и/или распределительной колоночной хроматографии для очистки многокомпонентных смесей растительного происхождения в последнее время всё чаще применяется метод твёрдо-фазной экстракции (ТФЭ). ТФЭ отличается от классической колоночной хроматографии прежде всего принудительной подачей элюента под действием вакуума на выходе из хроматографической системы. Для получения разрежения определенной величины используют специальное герметичное устройство-приёмник (манифолд), в верхней части которого крепятся хроматографические «колонки» (патроны и/или картриджи), а к нижней подключен вакуум-насос с электроприводом. На мировом рынке системы для ТФЭ предлагаются фирмой «Supelco» (США).

Тонкослойная хроматография, или ТСХ (адсорбционная хроматография в тонком слое сорбента), чаще всего применяется при качественном анализе лекарственного растительного сырья или на стадии пробоподготовки для очистки анализируемых компонентов.

Используют хроматографические пластины с закреплённым или незакрепленным слоем сорбента. Наиболее распространены сорбенты на основе силикагеля, реже применяют алюминия оксид, целлюлозу или полиамидный сорбент. Качественный анализ компонентов лекарственного растительного сырья с применением ТСХ проводят путём детекции невооруженным глазом флуоресценции или окраски пятен в УФ и видимом свете при сравнении со свидетелями. Основным параметром при этом, наряду с характерным окрашиванием или флуоресценцией пятен, является относительное удерживание компонентов, или Rf. Использование метода ТСХ на стадии пробоподготовки в количественном анализе лекарственного растительного сырья предусматривает элюирование действующих веществ с хроматографической пластины и последующий анализ элюата другими методами. Например, разделение суммы флавоноидов цветков боярышника проводят на пластинах «Силуфол» или «Сорбфил», после чего пятно гиперозида элюируют с пластины, а его содержание в элюате определяют спектрофотометрическим методом.

В последнее время активно развивается метод количественной ТСХ с использованием специального прибора — денситометра, работа которого основана на измерении плотности флуоресценции или окраски пятна анализируемого компонента непосредственно на пластине. Для этого денситометр снабжён цифровой видеокамерой или сканером, а обработка полученных результатов производится с помощью специальной программы на компьютере. Применение денситометрии позволяет проводить экспресс-анализ компонентов сырья без их элюирования с пластины. Производство денситометров активно развивается как в России, так и за рубежом. На российском рынке в настоящее время представлена продукция отечественного производителя «ЛенХром», Санкт-Петербург (денситометр «ДенСкан») и швейцарской фирмы «Camag» (спектро-денситометр «САМAGScanner3»).

Использование хроматографии на бумаге (БХ), имеющей как распределительный, так и адсорбционный механизмы разделения компонентов, в настоящее время ограничено и применяется для качественного анализа лекарственного растительного сырья. По способу перемещения подвижной фазы различают восходящую, нисходящую и круговую БХ. Детекцию осуществляют сходным с ТСХ образом. Так, качественный анализ флавонолов листьев вахты трёхлистной проводят с помощью восходящей БХ с последующим проявлением хроматограммы раствором алюминия хлорида.

В самом общем виде все перечисленные методы хроматографии не требуют специального аппаратурного оформления, за исключением количественной ТСХ и твёрдо-фазной экстракции. К строго приборным методам хроматографического анализа относятся газовая и высокоэффективная жидкостная хроматография.

Газовая хроматография(ГХ) — это хроматография, в которой подвижная фаза находится в состоянии газа или пара. В фармацевтическом анализе находят применение газожидкостная (ГЖХ) и газоадсорбционная хроматографии. В газожидкостной хроматографии неподвижной фазой служит жидкость, нанесённая на твёрдый носитель, т.е. используется распределительный механизм разделения компонентов. В газоадсорбционной хроматографии неподвижной фазой является твёрдый адсорбент.

Метод газовой хроматографии применяется для анализа летучих веществ, в том числе компонентов эфирных масел, например ледола и палюстрола в эфирном масле побегов багульника болотного.

Также возможно проведение химической модификации (дериватизации) компонентов анализируемой смеси с целью получения летучих производных и их последующий анализ методом ГХ. В качестве примера газохроматографического анализа с использованием дериватизации можно привести анализ летучих производных карбоновых кислот и моносахаридов, в том числе и растительного происхождения.

Детектирование на выходе из газохроматографической системы производится несколькими способами. Наиболее часто применяют детекторы теплопроводности (ДТП, или катарометр) и пламенно-ионизационный (ПИД). Реже используют селективные детекторы, такие как электронно-захватный (ЭЗД) и термоионный (ТИД).

На базе колоночной хроматографии возникла высокоэффективная жидкостная хроматография(ВЭЖХ). От классической колоночной хроматографии ВЭЖХ отличается использованием сорбентов с размером частиц 3-10 мкм, что обеспечивает быстрый массоперенос при очень высокой эффективности разделения. Для обеспечения беспрепятственного прохождения элюента через колонку с ультрамелким сорбентом на входе в хроматографическую систему создается высокое давление. Поэтому другим названием ВЭЖХ является «жидкостная хроматография высокого давления».

Лидирующее положение занимает обращённо-фазовая ВЭЖХ, в которой используются сорбенты на основе силикагеля с привитыми на его поверхности молекулами неполярных соединений, таких как высокомолекулярные углеводороды, фенолы и их производные. При этом хроматографическое разделение происходит за счёт распределительного (главным образом) и адсорбционного (в меньшей степени) механизмов, детектирование в ВЭЖХ осуществляется с помощью фотометрических и электрохимических методов анализа. Основное значение имеет спектрофотометрическая детекция в УФ области.

Преимуществом ВЭЖХ (особенно обращённо-фазовой) перед газовой хроматографией является возможность исследования практически любых объектов без каких-либо ограничений по их физико-химическим свойствам. Поэтому подавляющее большинство действующих веществ лекарственного растительного сырья может быть проанализировано этим методом (рис. 5). В фармацевтическом анализе метод ВЭЖХ в настоящее время используется главным образом при анализе препаратов на основе лекарственного растительного сырья, такого как женьшень, родиола розовая, шиповник и др.

Метод ВЭЖХ широко представлен в фармакопеях Европы и США в фармстатьях на лекарственное растительное сырье.

Так, в соответствии с Европейской Фармакопеей стандартизацию корней женьшеня проводят путем определения суммы гинзенозидов Rb1 и Rg1 методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)]. Фармакопей США предложено определять содержание гинзенозидов Rb1 и Rg1 отдельно друг от друга, также используя метод ВЭЖХ.

Во всех зарубежных фармакопеях рекомендуется определять в ЛРС содержание арбутина или его произво­дных методом высокоэффективной жидкостной хромато­графии (ВЭЖХ). В более ранних изданиях исполь­зовалось спектрофотометрическое определение со­держания производных гидрохинона в пересчете на арбутин после реакции с аминопиразолоном, раство­ром аммиака и гексацианоферратом калия (III). По ГФ XI содержание арбутина определяется методом йодометрического титрования: данный метод дли­телен, трудоемок, поэтому данный раздел ФС также требует подбора альтернативного современного ме­тода анализа.

Для проведения анализа методами ГЖХ и ВЭЖХ используются аналитические приборы — хроматографы. Количество отечественных и зарубежных фирм-производителей, выпускающих газовые и жидкостные хроматографы, неуклонно растёт, поэтому перечислим только некоторые из них. Из отечественных фирм-производителей устойчивую нишу на российском рынке занимают фирма «Аквилон», Москва (жидкостные хроматографы «Стайер»), ЗАО «ЭкоНова», Новосибирск (микроколоночный жидкостный хроматограф «Милихром А-02») и СКВ «Хроматэк», Йошкар-Ола (газовые хроматографы «Кристалл»). Огромный спектр продукции для ГХ и ВЭЖХ выпускается иностранными фирмами: «Agilenttechnologies», «HewlettPackard», «Waters», «Neolab» (США), «Shimadzu» (Япония-Германия), «Knauer» (Германия).

Фотометрические методы анализа основаны на поглощении электромагнитного излучения индивидуальным веществом или группой анализируемых веществ.

Наибольшее распространение в применении к фармакогностическому анализу получило электромагнитное излучение ультрафиолетового (УФ) и видимого (ВИД) диапазонов (обычно принято считать видимым излучение с длиной волны от 800 до 400 нм, а ультрафиолетовым — от 400 до 200 нм, длина волны меньше 200 нм — далекий УФ).

В зависимости от используемой аппаратуры, различают спектрофотометрический и фотоколориметрический анализ, к последнему близко примыкает колориметрический.

Спектрофотометрический анализ— анализ поглощения веществом монохроматического излучения с определённой длиной волны. Здесь выполняется основной закон поглощения — закон Бугера-Ламберта-Бэра:

 

где I0- интенсивность излучения, падающего на раствор; I- интенсивность излучения, прошедшего через раствор; c- концентрация вещества в растворе; b- толщина слоя, см; D- оптическая плотность; k- коэффициент поглощения вещества.

Этот вид анализа выполняется на спектрофотометрах ВИД и УФ диапазона (обычно 200-1100 нм). Регистрируется спектр поглощения (зависимость поглощенного излучения от длины волны) или часть спектра поглощения (отдельная полоса поглощения). Измерение оптической плотности производится на фиксированной длине волны (как правило, в максимуме полосы поглощения).

В настоящее время рынок выпускаемых фирмами-производителями спектрофотометров УФ и ВИД диапазона очень широк. Из отечественных приборов наиболее распространены спектрофотометры, выпускаемые фирмой «ЛОМО» (Санкт-Петербург) — «СФ-56», «СФ-2000/2001»; фирмой «Аквилон» (Москва) — «СФ-101», «СФ-103», «СФ-201». Из зарубежных — спектрофотометры фирмы «Shimadzu» (Япония) — «UVmini-1240», «UV-1700PharmaSpec», «UV-2401/2501PC», фирмы «AnalyticJena» (Германия) — «Specord-200», «Specord-50/40/30», «Specol1100/1200» и др.

Все выпускаемые приборы являются сканирующими, с автоматической записью спектра и управляются компьютерами или встроенными процессорами (для компактных моделей). Они оснащены разнообразными программными продуктами, позволяющими оперативно решать различные спектрофотометрические задачи. Разнообразие выпускаемых приборов определяется целями анализа — рутинный поточный анализ или решение сложных аналитических задач.

Фотоколориметрический анализ— анализ поглощения веществами немонохроматического излучения, которое получается с помощью светофильтров, выделяющих сравнительно узкий интервал длин волн (20-40 нм).

При фотоколориметрическом анализе закон Бугера-Ламберта-Бэра применим с большей или меньшей степенью приближения в зависимости от степени постоянства величины оптической плотности (D) в данном интервале длин волн.

Приборы, используемые для такого вида анализа, позволяют измерить оптическую плотность лишь в интервале длин, выделяемых светофильтрами. Для этих целей используются фотоэлектроколориметры различных типов (например, ФЭК или КФК).

Колориметрический анализ основан на сравнении интенсивностей окрасок растворов разных концентраций визуально или при помощи несложных приборов — колориметров.

Фотометрические измерения обычно проводят в водных или спиртовых растворах.

При анализе растительного сырья наиболее распространено количественное определение суммы действующих веществ в пересчёте на конкретное соединение, которое должно отвечать определённым требованиям: это соединение должно входить в состав суммы действующих веществ и для него должен существовать государственный стандартный образец (ГСО). Например, в траве зверобоя спектрофотометрически оценивается содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин. В случаях отсутствия ГСО, в качестве стандарта используют иное соединение, имеющее сходный с определяемым коэффициент поглощения на аналитической длине волны. Подобным приёмом пользуются при фотоколориметрическом определении суммы антраценпроизводных, где в качестве стандарта используют кобальта хлорид (кора крушины, корни ревеня и др.).

Определение концентрации веществ в растворе проводят тремя основными способами.

Первый способ основывается на измерении оптической плотности с последующим применением закона Бугера-Ламберта-Бэра для расчёта концентрации. Этот способ применим, когда известен коэффициент поглощения исследуемого вещества на данной длине волны. Таким образом определяют количественное содержание суммы антоцианов в пересчёте на цианидин-3,5-дигликозид в цветках василька синего.

Второй способ— определение концентрации исследуемого соединения путём сравнения величин оптических плотностей его раствора и раствора стандартного образца в известной концентрации. Так определяют содержание суммы флавоноидов в пересчёте на изосалипурпозид в цветках бессмертника песчаного.

Третий способ— построение калибровочного графика с использованием серии растворов стандартного образца известной концентрации, например количественное определение суммы флавоноидов в пересчёте на ононин в корнях стальника.

Современный фармакогностический анализ также предусматривает использование многих других физико-химических методов. При выделении из растений органических веществ, требующих идентификации и определения их количественного содержания, успешно используются такие методы, как поляриметрия, люминесцентный анализ, ИК-спектроскопия, спектроскопия ядерного магнитного резонанса, хромато-масс-спектрометрия, электрохимические методы и др.

13 Понятие об эфирных маслах: Классификация эфирных масел и лекарственного растительного сырья. Способы получения эфирных масел. Пути использования сырья, медицинское применение. Особенности заготовки, сушки, хранения сырья ЛРС содержащего эфирные масла.

Эфирные масла— многокомпонентные смеси летучих органических соединений, которые образуются в растениях и обусловливают их запах.

Эфирные масла получили свое название потому, что имеют маслянистую консистенцию, на бумаге оставляют жирное пятно, исчезающее через некоторое время.

Мировая флора насчитывает около 3 тысяч видов растений-эфироносов,промышленное значение имеют 150—200 видов. Большинство из них произрастает в тропиках и субтропиках, некоторые (кориандр, анис, фенхель,мята перечная и др.) культивируются в средней полосе.

Зачастую эфирные масла накапливаются во всех органах растения, но количественное распределение их неодинаково, благодаря чему, в эфиромасличной промышленности значение имеют только те части растения, где содержание эфирного масла максимально. Большинство растений семейства губоцветных накапливают масла в листьях и соцветиях, зонтичных – в семенах. Ценные эфирные масла получают из кожуры цитрусовых. Из корней добывают эфирные масла ириса и аира. Из цветков, лепестков или соцветий – эфирные масла розы, жасмина, иланг-иланг, лаванды. Эфирные масла в растениях большей частью находятся в свободном состоянии, однако у некоторых растений они содержатся в форме гликозидов и освобождаются только в результате их ферментативного расщепления.

Значение эфирных масел для растения и закономерности его накопления в растении

Вопрос, каково же значение образующегося эфирного масла для самого растения долго оставался дискуссионным. Высказывалось несколько точек зрения:

• Эфирные масла служат для защиты от болезней и вредителей

• Запахи растений служат для привлечения насекомых

• Испаряясь, эфирные масла регулируют транспирацию

• Эфирные масла выполняют роль запасных веществ

• Эфирные масла – продукты распада и отходы жизнедеятельности растения.

До настоящего времени этот вопрос не раскрыт полностью. С развитием более точных методов исследований стало очевидным, что эфирные масла являются активными участниками обменных процессов, происходящих в растительном организме. Накапливаясь в растении, по мере развития растения и выполнения той или иной физиологической функции эфирное масло претерпевает изменения в составе. Так, по мере созревания кориандра запах эфирного масла изменяется от неприятного “клоповного” до исключительно ароматного. При выращивании в Крыму розмарина отметили тот факт, что эфирное масло, на протяжении всего года сохраняющее правое вращение (эфирные масла являются оптически активными жидкостями) вдруг в течение апреля-мая начинает вращать плоскость поляризации влево. Изменения в составе эфирного масла происходят не только в течение года, но и в течение суток. Так, к примеру, соцветия лаванды для переработки собирают во второй половине дня, а лепестках розы больше всего эфирного масла накапливается ранним утром (4-6 ч.).

 

 

Получение.Эфирные масла получают методом перегонки с водяным паром (гидродистилляция); экстракциейорганическими растворителями, инертными сжиженными газами, жирным маслом (мацерация); методом поглощения твердым жиром (анфлераж); прессованием(из кожуры цитрусовых).

Выбор способа получения зависит от химического состава эфирного масла, морфолого-анатомических свойств сырья и от того, в какой отрасли масло будет использоваться. Для выделения эфирных масел используют свежесобранное, подвяленное, высушенное или предварительно ферментированное сырье. Медицинские масла получают перегонкой с водяным паром.

Использование эфирномасличного сырья разнообразно. В медицинской практике используют свыше 100 лекарственных средств из сырья данной группы.

1. Эфирномасличное сырье поступает в аптечную сеть в цельном и измельченном виде, фасованное и в форме брикетов. Сырье отпускают из аптеки без рецепта врача как лекарственные средства. В аптеке и в домашних условиях из сырья готовят настои и отвары, т.е. экстемпоральные лекарственные формы. Соотношение сырья и воды 1:10, исключение — настой из корневищ с корнями валерианы — 1:30. Обычно готовят именно настой. Если эфирное масло локализовано во вместилищах (листья эвкалипта, корневища и корни девясила), то из сырья может быть приготовлен отвар. Эфирномасличное сырье включают в официнальные сборы: · грудные · мочегонные · желудочные · аппетитные · потогонные · слабительные · желчегонные · ветрогонные · успокоительные · противогеморроидальные Сборы составляют на заводах по переработке лекарственного растительного сырья либо непосредственно в аптеках.

2. Сырье используют для получения экстракционных лекарственных форм (галеновые препараты) на фармацевтических предприятиях. Получают: · настойки из сырья валерианы, мяты перечной, эвкалиптов, полыни горькой; · экстракты густые из сырья валерианы и полыни; · экстракты жидкие из сырья тысячелистника, тимьяна, чабреца, ромашки, душицы, хмеля.

Используют как самостоятельные лекарственные средства, либо в составе комплексных препаратов. Например: · экстракт корневищ с корнями валерианы в форме таблеток, покрытых оболочкой; · экстракт цветков ромашки входит в состав препарата «Ротокан»; · экстракты травы душицы и соплодий хмеля входят в состав препарата «Уролесан»; · экстракты чабреца и тимьяна — в состав препарата «Пертуссин».

3. Лекарственное растительное сырье используют для выделения эфирных масел. Получают масла на специализированных предприятиях. Номенклатура: · масло аниса · масло фенхеля · масло хмеля · масло розы · масло кориандра · масло мяты перечной · масло пихты · масло эвкалипта · масло гвоздики · масло ромашки аптечной · масло сосны · масло тимьяна Эфирные масла используют как самостоятельные лекарственные средства (например, для ингаляций или для получения «укропной воды»), но чаще входят в состав комплексных препаратов. Например: · масло мяты перечной входит в состав капель «Корвалол», в зубные капли, аэрозоль «Ингалипт», мазь «Бом-Бенге», бальзам «Золотая звезда»; · масло шалфея и сосны — в состав травяной пасты «Фитолизин»; · масло аира, мяты, сосны — в состав препарата «Олиметин». Препараты производят химико-фармацевтические заводы.

4. На химико-фармацевтических предприятиях получают комплексные препараты: из мелко измельченного сырья — «Викаир» и «Викалин», в состав которых входит порошок корневищ аира; · из соков и отваров растений, в том числе тысячелистника, препарат «Лив. 52»; · на основе компонентов эфирных масел — «Ледин» из эфирного масла багульника болотного (ледол), «Пинабин» из эфирного масла сосны и ели (раствор тяжелой фракции в персиковом масле), «Алантон» из эфирного масла девясила высокого (сумма сесквитерпеновых лактонов). Большое количество препаратов получают на основе: · ментола — компонента эфирного масла мяты перечной («Ментоловый карандаш», «Бороментол», «Валидол», «Пектусин» и др.); · камфоры — компонента эфирного масла камфорного лавра (природная правовращающая камфора) или полусинтетическая камфора из пихтового масла (левовращающая) и из скипидара сосны обыкновенной (рацемическая) — «Бромкамфора», капли «Дента», «Камфоцин», «Ингакамф» и др.; · терпингидрата – полусинтетического производного пиненовой фракции скипидара — «Кодтерпин», «Колдрекс», «Терпингидрат с натрия гидрокарбонатом» и др.

5. Препараты, состав которых и фармакологическое действие не связаны с эфирным маслом: · «Хлорофиллипт» — из листьев эвкалипта шарикового, содержит сумму фенольных соединений и хлорофилла; · «Эвкалимин» — из листьев и побегов эвкалипта прутовидного, содержит фенолоальдегиды; · «Сальвин» — из травы шалфея лекарственного, содержит сумму веществ, извлекаемых ацетоном. Применение эфирномасличного сырья в медицине связано с наличием в эфирных маслах веществ, обладающих широким спектром терапевтических свойств.

Эфирномасличное сырье широко применяют и в других отраслях народного хозяйства: парфюмерной, пищевой, мыловаренной, косметической промышленности, ликеро-водочном и других производствах.

Медицинское применение сырья и препаратов, содержащих эфирные масла Наиболее часто лекарственные средства на основе эфирномасличного сырья используют для лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта, печени, верхних дыхательных путей и сердечно-сосудистой системы. Фармакологическое действие зависит: · от состава эфирного масла; · от сопутствующих ему биологически активных веществ (флавоноидов, тритерпеновых кислот, дубильных веществ, полисахаридов и др.); · от места введения эфирного масла (кожа, слизистые оболочки, соответствующий орган); · от места выведения эфирного масла (кишечник, почки, печень, верхние дыхательные пути). Например, наличие фенольных соединений в составе эфирных масел определяет, как правило, антисептическое действие. Сопутствующие вещества — флавоноиды способствуют спазмолитическому действию, а дубильные вещества — вяжущему, антисептическому, противовоспалительному. При наружном применении отдельные компоненты эфирных масел раздражающе действуют на кожу и слизистые оболочки. Используют в виде мазей, линиментов, спиртовых растворов, а при болезнях носа и горла — в виде ингаляций. Так, ментол при нанесении на слизистые оболочки или втирании в кожу раздражает нервные окончания, вызывает ощущение холода и покалывания. Это отвлекающее средство при невралгиях («Меновазин») и мигрени («Ментоловый карандаш»).

Раздражение холодовых рецепторов приводит к сужению поверхностных кровеносных сосудов (в случае насморка уменьшаются выделения из носа – препарат «Бороментол») и к рефлекторному расширению сосудов внутренних органов, в том числе коронарных (облегчаются боли при стенокардии – препарат «Валидол»). При приеме внутрь эфирные масла всасываются в желудочно-кишечном тракте и затем выделяются через бронхи, почки, печень, раздражая их. Например: 1. Ментол, раздражая рецепторы слизистой желудка и кишечника, вызывает усиление перистальтики. 2. Терпинеол из эфирного масла можжевельника раздражает почки, усиливает фильтрацию в почечных клубочках, тормозит обратную резорбцию ионов Na+ и Сl – в извилистых канальцах почек, следовательно, оказывает мочегонное действие. 3. Анетол из эфирного масла аниса и фенхеля выделяется через бронхи, способствует усилению секреции слизистых оболочек трахеи, гортани, бронхов, разрыхлению воспалительных налетов, разжижению мокроты, повышению активности реснитчатого эпителия дыхательных путей, следовательно, ускоряет эвакуацию мокроты и, кроме того, рефлекторно возбуждает дыхание («Грудной эликсир», «Нашатырно-анисовые капли»).

Эфирные масла и эфирномасличное сырье используют в лекарствах не только как лекарственные средства, но и как корригирующие вещества для улучшения и изменения вкуса и запаха (например, ментол). Интерес к эфирным маслам в последнее время возрастает. Это связано с тем, что эфирные масла стимулируют защитные реакции клеток и тканей, активизируют процессы регенерации.

14 Физические и химические свойства эфирных масел. Определение подлинности, чистоты и доброкачественности эфирных масел. Фармакопейные методы количественного определения эфирных масел в лекарственном растительном сырье.

Запах и вкус эфирных масел специфичны.

Большинство  эфирных  масел  легче  воды  и  лишь  некоторые  из  них  имеют плотность больше единицы (масло гвоздики и корицы).

Эфирные  масла  мало  или  практически  нерастворимы  в  воде.  При взбалтывании  с  водой  образуют  эмульсии,  придают  воде  запах  и  вкус.  Эфирные масла  растворимы  в  жирных  (подсолнечное  и  др.)  и  минеральных  (вазелиновое) маслах, спирте, эфире и других органических растворителях.

Температура кипения эфирных масел обычно колеблется  от 40 °С до 260 °С, причем фракция монотерпеноидов кипит при 150-190 °С, фракция сесквитерпеноидв — при 230-300 °С.

Эфирные масла оптически активны.

Реакция масел нейтральная или кислая.

 

Эфирные  масла  перегоняются  с  водяным  паром,  причем  монотерпеноиды перегоняются хорошо, сесквитерпеноиды — труднее.

При  охлаждении  эфирных  масел  некоторые  компоненты выкристаллизовываются (анетол, ментол, тимол, камфора). Твердую часть эфирного масла называют стеароптен, жидкую часть — олеоптен.

Химические свойства. Компоненты эфирных масел легко вступают в реакции окисления,  изомеризации,  полимеризации;  по  двойным  связям  легко гидрогенизируются, гидратируются, присоединяют галогены, кислород, серу; дают реакции, характерные для их функциональных групп.

На  свету  в  присутствии  кислорода  воздуха  эфирные  масла  окисляются, меняют  цвет  (темнеют)  и  запах.  Некоторые  эфирные  масла  загустевают  после отгонки или при хранении.

 

Анализ эфирных масел

Эфирные масла, которые используют в медицинской практике, должны быть стандартизованы, т.е. должны отвечать требованиям ФС.

Эфирные масла стандартизируют по следующим показателям качества: «Описание»; «Подлинность»; «Растворимость»; «Спирт этиловый»; «Жирные и минеральные масла», в том числе осмолившиеся вещества; «Вода»; «Температура затвердевания»; «Плотность»; «Оптическое вращение»; «Показатель преломления»; «Кислотное число»; «Объем содержимого упаковки»; «Микробиологическая чистота»; «Количественное определение».

В случае необходимости дополнительно проводят испытания по следующим показателям: «Растворимость в спирте»; «Остаток эфирного масла после выпаривания»; «Перекисное число».

Подлинность.Определение проводят методом газовой хроматографии в соответствии с требованиями ОФС «Газовая хроматография». Условия проведения анализа должны быть описаны в фармакопейной статье или нормативной документации. Для установления подлинности эфирных масел используют либо относительные времена удерживания отдельных, прежде всего преобладающих и специфичных компонентов, либо проводят сравнение хроматограммы испытуемого масла с хроматограммой стандартного образца масла, которая приводится в фармакопейной статье или нормативной документации.

С учетом лабильности многих соединений, являющихся компонентами эфирных масел, целесообразно использовать стеклянные колонки, предварительно проверенные на инертность. Проверку инертности колонок следует проводить следующим образом: на колонке при 130 °С хроматографируют стандартный образец линолилацетата. На хроматограмме должны отсутствовать дополнительные пики, свидетельствующие о разложении данного вещества.

Определение подлинности можно осуществлять также методом тонкослойной хроматографии и, при необходимости, другими фармакопейными методами.

Чистота:

Спирт этиловый.1) 2 капли эфирного масла наносят на воду, налитую на часовое стекло, и наблюдают на черном фоне; не должно быть заметного помутнения вокруг капель масла.

2) 1 мл масла наливают в пробирку, закрывают ее рыхлым кусочком ваты, в середину которого помещен кристаллик фуксина основного, и подогревают до кипения на водяной бане; не должно быть фиолетово-розового окрашивания ваты.

Жирные и минеральные масла, в том числе осмолившиеся вещества. 1) 1 мл эфирного масла взбалтывают в пробирке вместимостью 20 мл с 10 мл спирта 96 %; не должно наблюдаться помутнения и образования маслянистых капель.

2) 0,05 мл испытуемого эфирного масла помещают на фильтровальную бумагу. Пятно масла должно испариться с бумаги полностью в течение 24 ч без оставления следа.

Остаток эфирного масла после выпаривания. Около 5 г (точная навеска) эфирного масла помещают в предварительно взвешенную выпарительную чашку диаметром 7-9 см. Если масло может иметь нелетучий остаток свыше 8 %, то в фармакопейной статье или нормативной документации может быть указана меньшая навеска масла для анализа. Чашку нагревают на кипящей водяной бане при выключенной вентиляции в течение времени, указанного в фармакопейной статье или нормативной документации. Охлаждают в эксикаторе над кальция хлоридом безводным и взвешивают.

Во время всего испытания следят за тем, чтобы уровень воды в бане находился на 15 – 20 мм ниже дна выпарительной чашки.

Содержание остатка эфирного масла после выпаривания (Х) в процентах вычисляют по формуле:

,

где m1– масса чашки с остатком после выпаривания, г;

m0– масса пустой чашки, г;

m– навеска испытуемого масла, г.

Величина остатка эфирного масла после выпаривания должна соответствовать пределам, указанным в фармакопейных статьях или нормативной документации.

Вода.0,5 мл эфирного масла смешивают с 10 мл петролейного эфира (4). Не должно наблюдаться помутнения.

Для эфирного масла, получаемого экстракцией сырья органическими растворителями, в фармакопейные статьи или нормативную документацию должны быть введены методики контроля органических растворителей и установлены нормы их остаточного содержания. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Температура затвердевания.Испытание проводят в соответствии с ОФС «Температура затвердевания», при этом высота слоя эфирного масла в капилляре должна быть не менее 5 см. Значение температуры затвердевания должно соответствовать пределам, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации.

Кислотное число. Количество миллиграммов калия гидроксида, которое необходимо для нейтрализации свободных кислот, содержащихся в 1 г эфирного масла, определяют в 1,5-2 г (точная навеска) масла, растворенных в 5 мл спирта, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину. Значение кислотного числа должно соответствовать пределам, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации.

Количественное определение по ГФ 13.В фармакопейную статью или нормативную документацию должен быть включен метод ГЖХ или иной для количественного определения преобладающих и/или специфичных компонентов эфирного масла и установлены нормы их содержания.

Процентные соотношения основных компонентов относительно друг друга устанавливают методом нормализации.

По ГФ 11 эфирно-масличное сырье оценивают по количеству содержащегося в нем эфирного масла. Это определение проводят путем перегонки с водяным паром с последующим измерением объема полученного масла и выражением его в объемно-весовых процентах. Для этой цели используют любой из четырех описанных  методов  в ГФ Х1, вып.1, стр. 290.

Сырье, содержащее эфирное масло, которое при пере­гонке претерпевает изменения, образует эмульсию, легко за­густевает или имеет плотность, близкую к единице, анализи­руют методами 3 или 4.

15 Понятие о горечах, их классификация. Физические и химические свойства. Особенности заготовки, сушки, хранения сырья. Оценка качества сырья, методы анализа. Пути использования сырья, медицинское применение.

Горечи (Amara) — безазотистые неядовитые вещества растительного происхождения группы терпеноидов, обладающие резко выраженным горьким вкусом и применяемые для повышения аппетита и улучшения пищеварения.

Есть и другие органические вещества, вырабатываемые растениями, имеющие горький вкус (некоторые алкалоиды, сердечные гликозиды), но они обладают высокой токсичностью и другими видами специфического фармакологического действия.

В зависимости от химического строения горечи классифицируют на следующие группы.

1. Монотерпеноидные (иридоиды)1) - (С5Н8)2

К этой группе горечей относятся горькие вещества подорожника большого (аукубин),  вахты трехлистной (логанин и др.), видов золототысячника, горечавки желтой (генциопикрин, ментиафолин), валерианы лекарственной (валтраты).

2. Сесквитерпеноидные — (С5Н8)3. Горькие вещества этой группы в зависимости от строения делятся на производные гваяна (полынь горькая, тысячелистник обыкновенный), акорана (аир болотный), эвдесмана, гермакрана (одуванчик лекарственный).

3. Дитерпеноидные — (С5Н8)4. К горьким веществам этой группы относятся горечи квассии, пикразмы (квассин).

4. Тритерпеноидные — (С5Н8)6. К этой группе относятся кукурбитацины (ядовиты), тараксацин, тараксацерин (одуванчик лекарственный).

Все терпеноидыне горечи сильно окислены, имеют карбокси-, гидрокси-, этокси-, оксо-, лактонные или сложно-эфирные группировки.

Растения и сырье, содержащие горечи, в зависимости от сопутствующих  веществ подразделяют на две товароведческие группы:

1. Горько-ароматическое или горько-пряное сырье (ароматные горечи — Amara aromatica); включает траву и листья полыни горькой, корневища аира, траву и цветки тысячелистника. В этих видах сырья кроме горечей имеется эфирное масло.

2. Сырье, содержащее «чистые» горечи (Amara pura); включает корни горечавки, корни одуванчика, листья вахты трехлистной, траву золототысячника.

 

Физические и химические свойства иридоидов и сесквитерпеноидов по ряду позиций различны.

Иридоиды обычно встречаются в растениях в виде гликозидов. Это бесцветные кристаллические или аморфные вещества. Температура плавления — от 50 до 300 ºС. Обычно они легко растворимы в воде и низших спиртах (метиловом и этиловом) и плохо растворимы в органических растворителях (бензоле, хлороформе).

Иридоиды легко гидролизуются на агликон и сахарную часть. Агликоны легко полимеризуются в темно-коричневые пигменты. Этот химический процесс имеет ферментативный характер и часто происходит при неправильной сушке сырья и его хранении при повышенной влажности — сырье буреет («явление черной пигментации»).

Сесквитерпеновые лактоны - это твердые кристаллические вещества, реже маслообразные жидкости. Растворимы в органических растворителях: этаноле, хлороформе, диэтиловом эфире, гексане. В воде нерастворимы, способны перегоняться с водяным паром. Сесквитерпеновые лактоны растворяются в водных растворах щелочей (происходит раскрытие лактонного кольца и образование солей соответствующих кислот).

Из природных сесквитерпеновых лактонов в результате разрыва лактонного кольца, дегидратации, декарбоксилирования и дегидрирования образуются азулены. Они окрашены в синий, фиолетовый, иногда зеленый цвет. При доступе воздуха азулены разлагаются вследствие окисления, свет катализирует процесс окисления.

Таким образом, для обеих химических групп горечей характерна высокая реакционная способность.

 

Особенности сбора, сушки и хранения сырья, содержащего горечи

На сырье группы Amara aromatica распространяются правила сбора, сушки, упаковки и хранения для эфирномасличного сырья,

Заготовка сырья осуществляется в определенной фазе развития растения — во время наибольшего их накопления. Эфирномасличное сырье собирают в период максимального накопления эфирного масла. Особенности накопления и сбора указаны при описании каждого растения.

При сборе учитывают:

1. Локализацию эфирного масла и его химический состав,

2. Биологические особенности вида,

3. Динамику накопления эфирного масла в онтогенезе и в зависимости от внешней  среды.

Эфирное масло, образовавшись, не остается количествен­но и качественно неизменным: оно по мере развития растения и в связи с выполнением той или иной физиологической функции (цветение, образование семян, отложение запас­ных питательных веществ и т.д.) претерпевает изменения в своем составе.

Значение стадий онтогенеза  и его особенностей дает возможность выбрать такой момент в раз­витии растения, при котором можно собрать сырье с наибольшим выходом эфирного масла при нужном его качестве.

Выход эфирного масла, будучи характерной величиной для данного вида (иногда расы и даже формы) растения и фазы его развития, тем не менее существенно зависит и от внешних факторов.

Сбор проводят в сухую погоду после обсыхания росы. Исключение составляет заготовка плодов сельдерейных. Эти растения скашивают по росе, чтобы не допустить осыпи плодов.

Если эфирное  масло локализовано в экзогенных эфирно-масличных образованиях, то сбор ведут в утренние часы — до 12-13 часов.

Позднее растения разогреваются на  солнце, и эфирное масло теряется,  испаряясь в атмосферу.

Если эфирное масло локализовано в эндогенных эфирно-масличных образованиях,  то собирают сырье в любое время дня.

Сушка сырья естественная воздушно-теневая или искусственная.

Температурный режим искусственной сушки при экзогенной локализации эфирного — 35°С, при эндогенной  35-40°С.

Если в составе эфирного масла преобладают  сесквитерпены и ароматические соединения, то допускается температура сушки до 45-50°С.

Сырье раскладывают толстым слоем. Сушка должна быть затянута во времени, так как в процессе сушки в растительном сырье продолжается процесс биогенеза и накопления эфирного масла.

Некоторые  виды сырья не сушат, а перерабатывают в свежем виде.

Такие виды сырья содержат эфирного масла мало, и оно накапливается экзогенно (например, лепестки розы).

Эфирно-масличное сырье хранят  в изолированных  помещениях отдельно от других видов сырья. Упаковка (ангро) — тюки из ткани, мешки тканевые или льно-джуто-кенафные. Цветки ромашки пакуют в ящики из гофрированного картона или из лиственных древесных пород, либо в мешки бумажные. Сырье фасуют в пачки картонные, пакеты целлофановые.

Сырье хранят при температуре 12-15°С и влажности воздуха 30-40%, защищенными от света и от улетучивания.

Срок годности сырья обычно от 1 года.

Эфирные масла  упаковывают в тару стеклянную или металлическую, заполненную до верха, запаивают. Хранят в прохладном, защищенном от света месте. Температура в помещении должна быть не выше 15°С. Контролируют масла ежегодно.

 

На сырье групп Amara  рurа и Amara mucilaginosa- для гликозидного сырья.

Заготовка сырья (сбор, сушка, упаковка, хранение).

В зависимости от органа растения сырье заготавливают в фазу максимального накопления гликозидов. Листья толокнянки и брусники собирают за сезон дважды; рано весной, до цветения растений и осенью — во время плодоношения до сентября — октября. Листья трилистника водяного — после цветения, траву череды трехраздельной — в фазу бутонизации. При заготовке соблюдают охранные мероприятия, чередуя места сбора между административными районами, оставляя часть хорошо развитых растений на заросли. При сборе соцветий, трав не следует повреждать подземные органы, их собирают после обсеменения растений и на место корней засыпают семена (кроме солодки, у которой БАВ накапливаются в фазу цветения). Сырье, содержащее гликозиды, необходимо собирать в сухую, солнечную погоду, лучше в полуденные часы. Собранное сырье не должно долго лежать в таре (оно самосогревается, и в присутствии тепла и влаги активизируются ферменты). Сушка должна быть быстрая, желательно искусственная при температуре 55-60°С или на чердаках под железной или шиферной крышей, раскладывать сырье нужно тонким слоем, ворошить. Медленная сушка вызывает ступенчатый распад гликозидов (сердечные гликозиды).

Хранить сырье следует в хорошо упакованной таре, в сухих, хорошо проветриваемых складских помещениях, на подтоварниках.

При сборе, сушке, упаковке и хранении сырья следует учитывать свойство гликозидов легко подвергаться гидролизу под действием ферментов, поэтому необходимо четко соблюдать правила для каждого вида сырья, предусмотренные в инструкции по заготовке.

 

Оценка качества сырья, содержащего горечи. Методы анализа

Подлинность сырья, содержащего горечи, подтверждает органолептический показатель — горький вкус.

Согласно современной нормативной документации оценку качества сырья по содержанию горечей не проводят. Для оценки качества сырья определяют вещества, сопутствующие горечам, иногда экстрактивные вещества.

В траве тысячелистника и корневищах аира ГФ регламентирует содержание эфирного масла, в листьях вахты трехлистной — содержание флавоноидов в пересчете на рутин, в траве золототысячника — содержание ксантонов в пересчете на алпизарин, в траве полыни горькой, листьях полыни горькой, корнях одуванчика — экстрактивных веществ.

Ранее оценку качества сырья проводили органолептически — по показателю горечи. Это наибольшее разведение водного извлечения из 1 г сырья или препарата, при котором еще ощущается горький вкус. В качестве стандарта использовали раствор хинина (1:200 000). В настоящее время этот показатель используется в ряде зарубежных фармакопей.

Пути использования сырья, содержащего горечи

Лекарственное растительное сырье, содержащее горечи, используют:

1. В аптеках и в домашних условиях для получения экстемпоральных лекарственных форм 

• Настои из сырья вахты трехлистной, золототысячника, полыни горькой, тысячелистника.

• Отвар корней одуванчика.

• Сборы: аппетитный, желудочный, желчегонный.

2. На фармацевтических фабриках для получения галеновых лекарственных форм.

• Настойка полыни, комбинированная настойка полыни с мятой, горькая настойка из полыни, золототысячника, вахты, аира и кориандра.

• Густые экстракты полыни горькой, вахты трехлистной.

• Жидкий экстракт тысячелистника.

3. На химико-фармацевтических заводах для получения комплексных препаратов.

• «Викаир», «Викалин» и «Викрам», в состав которых входит порошок корневищ аира.

• «Олиметин», в его состав входит аирное масло.

Медицинское применение сырья и препаратов, содержащих горечи

Применение основано на органолептическом свойстве горечей — горьком вкусе. Горечи рефлекторно действуют на функции желудочно-кишечного тракта. Они раздражают вкусовые рецепторы слизистых оболочек рта и языка, что ведет к рефлекторному возбуждению пищевого центра (преимущественно латеральных ядер гипоталамуса), и при последующем приеме пищи повышается секреция слюны, желудочного и панкреатического соков, усиливается перистальтика кишечника. Таким образом, контраст горького вкуса горечей и приятного вкуса пищи способствует повышению аппетита, усилению функции пищеварительных желез и улучшению пищеварения.

При длительном применении в обычных дозах горечи хорошо переносятся и не обладают выраженным дополнительным действием на организм. Отсутствие резорбтивного действия отличает горечи от других природных веществ (например, алкалоидов хинина, стрихнина). Они тоже горькие на вкус, но оказывают специфическое фармакологическое действие и высоко токсичны. Горечи не токсичны.

В медицинской практике лекарственные средства, содержащие горечи, применяют:

1. При анорексии (потере аппетита на почве нервно-психических заболеваний, тяжелых инфекционных болезней или после перенесенных оперативных вмешательств, травм).

2. При гипацидных и хронических атрофических гастритах. Принимают 2-4 раза в день за 20-30 минут до еды с небольшим количеством воды.

Благодаря комплексу биологически активных веществ и, прежде всего, содержанию флавоноидов и терпеноидов, лекарственные средства этой группы часто используют как желчегонные(принимают внутрь), а также какантисептическиеи ранозаживляющие (применяют наружно).

Горечи противопоказаны при повышенной желудочной секреции, при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, при воспалении пищевода (рефлюксэзофагит).

Исключение составляют препараты аира болотного «Викаир», «Викалин» и «Викрам», которые, напротив, благодаря комплексу биологически активных веществ, применяются для лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, обладают антацидным действием при повышенной кислотности.

«Олиметин» применяют для профилактики и лечения почечнокаменной и желчнокаменной болезни.

16 Понятие о гомогликозидах (полисахаридах), их классификация. Физические и химические свойства. Оценка качества сырья, методы анализа. Пути использования сырья, медицинское применение.

Полисахариды (гликаны) — это природные полимерные высокомолекуляр­ные углеводы, состоящие из моносахаридов, соединенных гликозидными связями в линейные или разветвленные цепи.

Согласно химической классификации полисахариды подразделяют на гомополисахариды и гетерополисахариды. При этом, растительные гомополисахариды подразделяются на следующие группы, содержащие в качестве мономеров:

- глюкозу — крахмал, целлюлозу, лихенин;

- фруктозу — инулин;

- маннозу, галактозу, ксилозу, арабинозу — маннаны, галактаны, ксиланы, арабаны;

- галактуроновую кислоту — пектиновые вещества;

- глюкозамин — хитин грибов.

В свою очередь, гетерополисахариды подразделяются на:

- гемицеллюлозы;

- камеди, слизи;

- мукополисахариды — полисахариды, связанные с белками (например, в глюкопротеинах).

С лечебной целью применяются растительные полисахариды (крахмал, инулин, агар, каррагинан), вытяжки из лекарственного растительного сы­рья, богатого полисахаридами (слизь корня алтея и др.), комплексные пре­параты из некоторых высших растений и водорослей (плантаглюцид, мукалтин, ламинарид и т. п.) см. рис. 2.13.

 

Схема классификации полисахаридов

Физико-химические свойства полисахаридов. В чистом виде это аморфные, редко кристаллические, высокомолекулярные вещества. Полисахариды име­ют большое количество свободных гидроксильных групп, поэтому они полярны и нерастворимы в спирте и органических растворителях. Раствори­мость полисахаридов в воде различная: некоторые линейные гомогликаны (целлюлоза, хитин, ксиланы, маннаны) в воде не растворяются вследствие прочных межмолекулярных связей; сложные и разветвленные полисахариды растворяются в воде (гликоген, декстраны) или образуют студни (пектины, агар, кислоты альгиновые и т. п.). В растворах гликаны иногда образуют струк­турированные системы и могут выпадать в осадок

Полисахариды входят в состав тканей всех живых организмов. По физиологической роли в жизнедеятельности растений углеводы подразделяют на:

• метаболиты - моносахариды и олигосахариды, принимающие участие в биохимических процессах, они служат исходными веществами вторичного синтеза;

• запасные вещества - полисахариды, выполняющие резервную функцию (крахмал, инулин, некоторые галактоманнаны, пектиновые ве­щества, иногда моно- и олигосахариды);

• структурные, или скелетные вещества, - целлюлоза и гемицеллюлозы, которые являются главным опорным материалом растительной клетки.

Полисахариды выполняют следующие биологические функции:

1. энергетическую - служат энергетическим резервом клетки (крахмал, гликоген, инулин, ламинарии, некоторые слизи и пр.);

2. защитную - капсульные полисахариды микроогранизмов, гиалуроновая кислота и гепарин — в тканях животных, камеди — у растений;

3. поддерживают водный баланс благодаря коллоидным и анионным свойствам слизей, пектиновых веществ, полисахаридов водорослей, а также избирательной ионной проницаемости клеток;

4. обеспечивают специфические межклеточные взаимодействия и иммунологические реакции: клеточные поверхности и мембраны образованы сложными полисахаридами; гликолипиды — важнейшие компоненты мембран нервных клеток и оболочек эритроцитов; углеводы клеточных поверхностей часто обусловливают взаимодействие клеток с вирусами и пр.

Методы определения полисахаридов. Строение молекул полисахаридов, выделяемых из раз­личных растительных объектов, имеют свои отличительные осо­бенности: по молекулярной массе, степени этерификации, длине полимерной цепи и т.д. Поэтому выделение их, в частности пек­тиновых веществ, не бывает неизменным, то есть, практически невозможно выделить пектины всегда одинакового строения из одного и того же растения, поэтому часто проводят их гидролиз для определения числа и характера полученных моносахаридов.

Качественно пектины обычно не определяют, так как они содержатся в клеточном соке всех растений, а в больших количе­ствах содержатся в спелых плодах и корнеплодах. Методы коли­чественного определения пектиновых веществ разнообразны, од­нако всем им предшествует довольно длительное извлечение, очистка и т. д. При определении весовым методом пектины извле­кают из сырья теплой водой, затем с помощью соляной кислоты переводят их в пектиновую кислоту, после чего осаждают в виде соли кальция. Можно использовать и титриметрическое титрова­ние по методу йодометрии. Фотоколориметрический метод осно­ван на получении специфического фиолетово-розового окраши­вания уроновых кислот с карбазолом в сернокислой среде.

Камеди обычно не анализируют, а качественное обнару­жение слизей проводят чаще всего гистохимически, то есть, на срезах растений, которые ослизняются при смачивании водой, а при действии на срез щелочей или NH4OH образуется желтое ок­рашивание, которое свидетельствует о наличии в сырье слизи. Количественное определение слизи обычно не предусматривает­ся.

Часто в растениях определяют общее содержание полиса­харидов без деления их на группы.