1503

Федеральное агентство по образованию Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Воронежская государственная лесотехническая академия»

ПЧЕЛОВОДСТВО

ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ ПЧЕЛ

Методические указания для студентов заочного обучения направления подготовки бакалавров 250100.62 – Лесное дело, 022000.62 – Экология и природопользование

Воронеж 2008

УДК 638.1

Харченко, Н. А. Инфекционные болезни пчёл [Текст] : методические указания для студентов заочного обучения направления подготовки бакалавров 250100.62 – Лесное дело, 022000.62 – Экология и природопользование / Н. А. Харченко, В. Е. Рындин ; Фед. агентство по образованию, ГОУ ВПО «ВГЛТА». – Воронеж, 2008. – 28 с.

Печатается по решению редакционно-издательского совета ГОУ ВПО «ВГЛТА»

Научный редактор д-р биол. наук, проф. Н.А. Харченко

Рецензент директор ВГБПЗ, канд. биол. наук А.И. Масалыкин

3

ВВЕДЕНИЕ Настоящие методическое указание предназначено для студентов

заочного обучения (специализация «Лесное и лесопарковое хозяйство».

В указаниях разбираются наиболее сложные для самостоятельного изучения вопросы пчеловодства – симптоматика заболеваний, возбудители, правила работы и диагностирования патологических семей, способы борьбы..

Медоносная пчела подвержена различным заболеваниям, многие из которых наносят значительный ущерб пчеловодству, приводя к снижению продуктивности и гибели пчелиных семей.

Успешное развитие пчеловодства немыслимо без знаний патологии медоносных пчёл. Концентрация семей пчёл на крупных пасеках, массовые передвижения (кочёвки) пасек, обмен племенной продукцией, трудности изолирования пчёл на местности и карантин могут приводить к широкому распространению возбудителей различных болезней среди этих насекомых. Распространению возбудителей способствуют также биологические особенности пчёл: перелёты пчёл и трутней, слёты роёв, нападения на слабые семьи. Некоторые возбудители болезней других видов насекомых могут передаваться и пчёлам. За последнее время установлены новые нозологические единицы: более десяти вирусов, спироплазмы (микоплазмы), заставившие по иному оценить причины возникновения пыльцевого токсикоза. Возникшая панзоотия варрооза вызывает необходимость изучать роль клещей в патологии пчёл, и здесь тоже выявлен ряд новых заболеваний.

Многие заболевания пчёл трудно дифференцировать. Механическое отделение расплода от взрослых пчёл не даёт целостного представления о роли той или иной группы этиологических агентов в патологи пчёл.

Профилактика инфекционных заболеваний пчёл в нашей стране в основном строится на применении лечебных препаратов. Без уничтожения возбудителей эти меры не могут привести к оздоровлению пасек, а только ослабляют заболеваемость и приводят к накоплению в мёде и других продуктах пчеловодства антибиотиков и сульфаниламидных препаратов, что создаёт опасность для здоровья людей и пчёл.

Успех профилактики и лечения заболеваний пчёл во многом зависит от правильного диагностирования болезни и выявления возбудителя. Профилактика инфекционных и паразитарных болезней зависит от санитарного состояния ульев, сотов, инвентаря, пасечных построек и самой территории точка. Важным этапом противоэпизоотических мероприятий является дезинфекция, эффективность которой зависит от того, насколько полно и своевременно будут обеззаражены все инфицированные объекты на неблагополучной пасеке и, следовательно, разорвана эпизоотическая цепь в звене передачи возбудителя инфекции.

4

ТЕМА 1 (2часа)

Вирозы

МЕШОТЧАТЫЙ РАСПЛОД - Sacculisatio contagiosa larvae (син.: сухой гнилец,

безбактериальный гнилец, сухая гибель червы, мешкоподобная форма расплода, мешотчатая черва, мешотчатая детка пчелы) — заболевание предкуколок медоносных и среднеиндийских пчел. Мешотчатый расплод наносит значительный ущерб пчеловодству, так как больные семьи без оказания помощи не дают товарного меда и не обеспечивают себя кормом, хозяйства лишаются возможности продавать маток и пакеты пчел.

Возбудитель относится к РНК-содержащим вирусам, имеет сферические частицы 30 нм в диаметре. Вирус устойчив к высушиванию, действию эфира и хлороформа. В водной суспензии он инактивируется при 59 °С в течение 10 мин, на прямом солнечном свете — 4—7 ч, в меде или глицерине при 70—73 °С — 10 мин, в высушенном состоянии — через 3 нед. При кипячении вирус погибает через 40 мин, инактивируется в 0,3 %- ном растворе калия перманганата. Возбудитель сохраняется в мёде при комнатной температуре до 30 сут, а в условиях холодильника — 2 мес, в гнилостной массе — более 10 сут; при 22 °С и относительной влажности 53 % на деревянных поверхностях, покрытых прополисом,—10—15 сут, на металлических—5—10, на сотах — 80—90 сут; при 5,5 °С и относительной влажности 82 % соответственно 25—30, 45—50, 90—100 сут; в перге при 1,3 °С и относительной влажности 80%—100—105 сут, в меде— 30—35 сут, в 0,5—1,2 %-ном растворе фенола — свыше 3 нед. Вирус устойчив к 3 %-ной едкой щелочи, 0,3—10 %-ным растворам риванола. Лиофильно высушенный вирус сохраняет свои антигенные свойства более 4 лет.

Эпизоотологические данные. Заболевание может быть повсеместно. Штаммы вируса серологически неидентичны. Местные пчелы более устойчивы к штаммам вируса, выделенного в этой же зоне, по сравнению с привезенными. В естественных и экспериментальных условиях заражаются личинки рабочих пчел, маток и трутней всех возрастов независимо от породы. Однако наиболее восприимчивы к заражению личинки 2—3- дневного возраста. Продолжительность инкубационного периода 5—6 дней. Одна больная предкуколка способна заразить до 3000 здоровых личинок. Летальная доза для одной личинки составляет 10s и более вирусных частиц. Вирус выявляется через 18—48 ч после заражения в клетках жирового тела, эпителия трахей и средней кишки, мышц и нервной ткани предкуколки, поражение приводит к сильному разрушению клеток. Возбудитель может развиваться и в организме взрослых пчел, однако признаков поражения у них не вызывает. Заражение личинок осуществляется через взрослых пчел. Вирус выделен из организма самок клещей Varroa jacobsoni, паразитирующих на пчелах

5

Заболевание пчел чаще регистрируется весной и в первой половине лета (июнь) после продолжительной холодной погоды при недостатке перги

имеда в семьях. Сильные семьи поражаются в меньшей степени, чем слабые

исредние. С наступлением медосбора признаки заболевания исчезают. Однако они вновь могут появиться осенью или весной следующего года. Передача возбудителя болезни внутри пасеки происходит при перелетах рабочих пчел и трутней из больных семей в здоровые, при перестановке сотов для выравнивания силы семей. Возможность передачи возбудителя матками остается неясной, хотя известно, что замена их в неблагополучных семьях часто приводит к выздо-равливанию семьи пчел.

Впораженных семьях расплод на соте неравномерный, пестрый; крышечки на многих ячейках с печатным расплодом удалены или слегка запавшие с одним-двумя отверстиями; внутри таких ячеек находят вытянутых мертвых личинок, лежащих на спине вдоль ячейки.

Выделяют 5 стадий поражения личинок. У недавно погибших предкуколок под кутикулой видны трахеи, головной конец слегка отходит от края ячейки. При осторожном выделении из ячейки тело личинки имеет вид мешка, заполненного зернистой, мутно-белого цвета жидкостью. В этот период предкуколки весьма инфекционны. В последующем происходит потемнение головного конца личинки, сегментация ее сглаживается, объем жидкости увеличивается, личинка приобретает коричневый цвет. В третьей стадии упругость личинки утрачивается, но сохраняется форма тела; кутикула твердая, заполнена зернистой коричневой массой. В дальнейшем содержимое полости тела становится клейким и бесформенным, предкуколки приобретают темно-коричневый или черный цвет, высыхают и имеют вид полулунных корочек, лежащих выпуклой (спинной) стороной на стенке ячейки; их можно легко удалить. Количество погибающих предкуколок постепенно нарастает, семьи слабеют. Некоторые семьи погибают, в других с приносом нектара в улей признаки поражения исчезают. Приблизительно в 10 % случаев болезнь может протекать бессимптомно

Гистологическое исследование пораженных вирусом мешотчатого расплода личинок показывает, что образование большого пространства под кутикулой и накопление жидкости вызвано распадом жировых клеток. У таких личинок изменяется окраска тела, появляются волоски и шипики, наступает преждевременная склеротизация, т. е. возникают признаки доимагинального и взрослого насекомого, последнее обусловлено нарушением функции эндокринных органов.

Мешотчатый расплод в семьях пчел часто протекает совместно с европейским гнильцом. Течение смешанного заболевания обычно тяжелое; признаки, специфические для первой болезни, нечеткие. В практике такое смешанное течение чаще всего принимают за европейский гнилец, однако

6

после применения сульфаниламидов и антибиотиков, подавляющих возбудителей этих болезней, отмечается интенсивное поражение семей мешотчатым расплодом.

Диагноз ставят на основании лабораторного исследования патологического материала (кусочек сота с 20 или более пораженными предкуколками или такое же количество выделенных предкуколок в 50 %- ном глицерине).

Из методов лабораторной диагностики наиболее специфичной является реакция диффузионной преципитации в агаровом геле суспензии исследуемого материала со специфичной сывороткой. Можно использовать и другие методы серодиагностики: РСК, прямой и непрямой метод люминесцентной микроскопии.

Меры борьбы. Больные семьи сокращают и утепляют, обеспечивают достаточным количеством полноценного белкового и углеводного корма; меняют маток. В качестве лечебного и профилактического средства рекомендована гипериммунная сыворотка, полученная от кроликов и лошадей. 80 мл сыворотки смешивают с сахарным сиропом, который дают весной или летом 3 раза через 5 дней по 150—200 мл на улочку пчел. Профилактическая и лечебная эффективность составляет 70 %.

Ульи, вставные доски, рамки после механической очистки дезинфицируют одним из следующих растворов из расчета 0,5 л на 1 м : 4 %- ной перекисью водорода; 2 %-ной двутретьосновной солью кальция гипохлорида; 5 %-ным нитраном; 1 %-ным формальдегидом при экспозиции 3 ч. Для дезинфекции сотов применяют перекись водорода и формалин в указанных концентрациях и при той же экспозиции. Воск перетапливают в водяной бане при 70 °С в течение 70 мин или автоклавируют (111 °C) при 0,5 атм в течение 30 мин

БАКТЕРИОЗЫ И МИКОЗЫ ПЧЕЛ

АМЕРИКАНСКИЙ ГНИЛЕЦ — Histolysis infectiosa perni-ciosa larvae (син.:

злокачественный гнилец, бранденбургский гнилец) — инфекционная болезнь печатного пчелиного расплода, проявляющаяся летом, реже весной.

Возбудитель — спорообразующая грамположительная палочка бацилла ларве (Вас. larvae).). Установлено, что штаммы бациллы ларве разных стран и континентов обладают одинаковыми антигенными свойствами.

Возбудитель имеет вид палочки (2,5Х0,8 мкм). Клеточная стенка пятислойная, толщиной 170 А. Наружный средний и внутренние осмофильные слои оболочки имеют толщину 20—25 А, два промежуточных осмофильных слоя — по 40— 50 А.

7

У бациллы ларве цитоплазматическая мембрана (толщина 70 А) располагается за клеточной стенкой и плотно примыкает к протопласту бактерии, она имеет три слоя. Цитоплазма содержит зернистый компонент

— рибосомы — величиной 200 А. Вдоль продольной оси клетки диффузно располагается нуклеоид. Деление бациллы осуществляется с образованием перегородки.

Споры формируются на одном из полюсов клетки, где вначале образуются споровые оболочки, а затем спора. Конец клетки, где залегает спора, несколько утолщается. Свободная спора покрыта широкой осмиофильной оболочкой, к которой плотно прилегает тонкий осмиофильный слой, далее лежит внутренняя оболочка споры — кортекс, за которой следуют стенка, споровая мембрана и цитоплазма.

Споры бациллы ларве устойчивы к физическим и химическим воздействиям, особенно если они заключены в корочковый материал или воск. В высохших корочках они сохраняют вирулентность несколько лет, а в меде — более года. В меде, хранящемся на солнечном свету, они выживают 4—6 нед. Сухие свободные споры солнечный свет убивает за 28—41 ч.

В воде при температуре 90 °С они гибнут через 3 ч, а при 95 °С — через час. При кипячении трупов личинок в воде в течение 1 мин гибнет 80% спор, за 5 мин—99%, а в течение 14 мин — все. В неразведенном кипящем меде споры погибают через 40 мин, а в разведенном равным количеством воды — через 20 мин.

Кипячение воска в открытой посуде вызывало гибель спор лишь на пятый день. При прогревании воска сухим жаром при 140—170 °С споры погибали через 1,5—2 ч, а перегретым водяным паром (127 °С) под давлением 1,5 атм. в автоклаве за 2 ч.

Сулема в разведении 1:100 убивает споры через 4—5 дней. I %-ный раствор перекиси водорода, подкисленной кислотой, убивает споры в корочковом материале за 3 ч, в 1—2%-ном растворе бета-пропиолактона — за 20—30 мин.

Споры сохраняют жизнеспособность в сухой почве пасек 228 дней, в сырой — до 19 мес, на поверхности почвы в условиях Таджикистана — 70 дней, на глубине до 5 см — до года, на цветках хлопчатника — до 82 дней. ;.- : В. С. Сорокин (1925) сообщил, что в ульях, освободившихся от больных американским гнильцом пчелиных семей и стоявших без употребления 15 лет, снова возникло заболевание американским гнильцом при поселении в них пчел.

Особенно длительно сохраняются споры, содержащиеся в высохших личинках, погибших от американского гнильца. В зараженных сотах споры оставались вирулентными в течение 35 лет, на ульях, вощине — 20 лет, в медогонке — 5 лет, меде и перге — 1 год (срок наблюдения).

8

Патогенность. Бацилла ларве патогенна только для личинок трутней, маток и взрослых пчел. Трутневые и маточные личинки поражаются очень редко. Все породы пчел одинаково восприимчивы к американскому гнильцу.

В. А. Триленко (1975) удалось вызвать гибель кроликов на 5—7 день после внутривенного введения им 3—6 млн. спор бациллы ларве, у морских свинок после подкожного введения 3 млн. спор смерть наступала на 8—10 сут. При этом из крови больных и внутренних органов павших животных изолирована исходная культура.

Для личинок пчел патогенны только споры этого возбудителя. Для заражения одной личинки необходимо скормить ей не менее 10000 спор в 0,01 мл сиропа. С. Матука (1958) заразил пчелиные семьи вегетативной формой бациллы ларве.

Инфицирование пчелиных личинок происходит до запечатывания ячеек при употреблении контаминированного спорами меда и перги. В течение первых трех дней личинки не заболевают гнильцом, потому что они получают маточное молочко, обладающее бактерицидными свойствами. В последующие дни не запечатанные личинки не заболевают из-за кислой реакции их кишечно-го сока и высокой концентрации в кишечнике сахаров (17 %). После запечатывания сотов личинки пчел не получают корм и живут за счет собственных ресурсов, при этом концентрация инвертированного сахара снижается с 17 до 3—2,5 %. Инкубационный период длится от 2 до 7 дней, поэтому заразившиеся личинки погибают после запечатывания ячеек.

В редких случаях при очень высокой патогенности возбудителя и ослаблении резистентности личинок гибель их может наступить до запечатывания или в стадии куколок в первые 1— 2 дня развития.

Эпизоотологические данные. Источником возбудителя американского гнильца являются трупы личинок. В погибшей личинке содержится такое количество спор (1,5 - 3 млрд.), которое способно заразить 200 личинок.

Фактором распространения спор внутри семьи служат пчелылы, особенно молодые, которые выполняют роль ячеек, приемщиц принесенного нектара и кормилиц личинок. Основным путем распространения болезни на пасеке и за ее пределами служат все объекты, контаминированные спорами: инфицтрованные ульи, пчеловодный инвентарь, медогонки, соты, вощина, мед, перга, воск, ульевые холстики и наволочки утиплительных подушек и пр.

Фактором распространения возбудителя болезни могут служить мастерские, изготавливающие вощину и воскозаводы, содержащиеся в антисанитарных условиях. Споры американского гнильца могут распространять паразиты и хищники пчел: восковая моль, ветчинный кожеед, уховертки, различные клещи, особенно варроа якобсони, осы, муравьи, муха дрозофила, лжескорпионы и другие паразиты, а также пчелыворовки. Замечено, что американским гнильцом чаще поражают здоровые, сильные пчелиные семьи, склонные к воровству. Они могут заразиться от

9

больных пчелиных семей не только в пределах своей пасеки, но и от соседних пасек, расположенных на расстоянии лета пчел.

Инфицироваться здоровые пчелы спорами бацилл американского гнильца могут и на цветках, которые посещали пчелы больных семей, а также от объектов внешней среды, контаминированных возбудителем болезни (почва при весенней очистке ульев и пр.).

Распространение американского гнильца возможно и на большие расстояния при пересылке пакетов пчел или целых семей с пасек, неблагополучных по данной болезни. Матки, полученные в пчелиных семьях, больных американским гнильцом, являются спороносителями в течение 28 дней, поэтому пересылка маток тоже может быть причиной распространения возбудителя болезни.

Патогенез. Возбудитель американского гнильца, проникнув через стенку среднего отдела кишечника в гемолимфу быстро в ней размножается и распространяется в течение 12 - 24 ч по организму. Этому благоприятствует метаморфоз личинки в куколку, когда ткани отдельных органов личинки, в том числе и кишечника, подвергаются гистолизу. Микроб выделяет продукты жизнедеятельности — токсины, которые вызывают гибель личинки. В организме личинки отмечаются дегенеративные процессы: в цитоплазме клеток — плазморексис, плазмопикноз, вакуолизация, в ядрах — кариорексис, гиперхроматоз. Дегенеративные изменения наблюдаются и в эноцитах, клетках жирового тела, секреторных и гемолимфы.

Организм личинки на внедрение возбудителя отвечает защитной реакцией — фагоцитозом. Фагоциты захватывают и разрушают бацилл ларве, но это не обеспечивает полной защиты организма: размножение бацилл идет быстрее, чем их фагоцитирование. Личинки погибают, а их ткани подвергаются распаду. А. Тошков (1965) установил, что после гибели личинки размножение возбудителя в ней еще продолжается 10—12 ч, затем деление палочек прекращается и начинается процесс спорообразования, который заканчивается в течение 7—10 сут. В это время в трупе личинки образуются антибиотические вещества, препятствующие развитию посторонней микрофлоры.

Признаки болезни. Американский гнилец чаще проявляется во вторую, наиболее жаркую половину лета. Развитию этой болезни способствует перегревание пчелиного гнезда.

В начале заболевания отмечают поражение отдельных личинок. Со временем число заболевших и погибших личинок увеличивается. Обнаружение вновь заболевших смесей происходит, как правило, с опозданием, особенно если пчеловод никогда не видел эту болезнь.

Признаки болезни обнаруживают во время осмотра сотов с расплодом. Заболевают обычно взрослые пчелиные личинки, уже запечатанные

10

восковыми крышечками. Погибая и подвергаясь процессу разложения, они оседают ближе ко дну, на нижнюю боковую стенку ячейки, становятся вязкими, тягучими, напоминая полувысохший резиновый клей. Характерна для них в этот период тягучесть и липкость. Цвет пораженных личинок изменяется от серовато-белого до кофейно-молочного и темно-бурого.

Погибшие личинки имеют запах растопленного столярного клея. Восковые крышечки ячеек с погибшими личинками западают, темнеют и продырявливаются. Вдавливание крышечек объясняется прилипанием головки личинок, которые, подсыхая, втягивают крышечки внутрь ячеек. Через 20—30 дней гнилостная касса высыхает в плотную корочку, крепко прилипшую к нижней боковой стенке ячейки. Удалить корочку пинцетом из ячейки, не разрушив ее стенок, не удается. Пчелы не могут очистить ячейки с погибшими личинками и новый расплод выводят рядом с этими ячейками. Поэтому расплод становится «пестрым», т. е. разбросан среди здоровых личинок. Пчелы в больной семье становятся вялыми, с пониженной работоспособностью и преждевременно изнашиваются.

Количество молодых пчел резко сокращается или они полностью исчезают. Без оказания помощи сильно пораженные семьи пчел погибают в середине или конце лета. Часть больных семей погибает зимой или ранней весной вследствие того, что они идут в зимовку с недостаточным количеством пчел. При слабом заражении больные семьи могут перезимовать, но болезнь в них уже начинает проявляться с ранней весны. Эти ослабленные семьи легко подвергаются нападу пчел других семей.

Иммунитет. Взрослые пчелы обладают врожденным иммунитетом против американского гнильца. Существуют отдельные породы пчел, у которых расплод более устойчив к заболеванию американским гнильцом. Механизм высокой устойчивости к гнильцу у этих семей объясняют поразному: прежде всего способностью пчел в ранний период заболевания обнаружить ячейки с только что пораженными личинками (до их загнивания) и быстрой очисткой ячеек от них; способностью иммунных пчел профильтровывать мед от спор бациллы ларве при насасывании в медовый зобик инфицированного меда и при кормлении личинок; повышением у иммунных пчел фагоцитарной активности.

Диагноз предварительный ставят по внешним признакам. При осмотре расплода учитывают его возраст, цвет, консистенцию и запах трупов личинок.

Необходимо исключить европейский гнилец, парагнилец, мешотчатый и порошковидный расплоды и варрооз.

Окончательный диагноз ставят на основании характерных признаков поражниия расплода и результатов микроскопических, бактериологических и серологических исследований.