Lecture / Sem 1 / 33_6_Infekts_Patogen_Virul_Biometod

Метод серийных разведений

•Методы разведения основаны на использовании двойных

последовательных разведений концентраций антибиотика от максимальной к минимальной.

•Антибиотик в различных концентрациях вносят в жидкую питательную среду (бульон) или в агар.

•Наличие роста микроорганизма в бульоне (помутнение бульона) или на поверхности агара свидетельствует о том, что данная концентрация антибиотика недостаточна, чтобы подавить его жизнеспособность. По мере увеличения концентрации антибиотика рост микроорганизма ухудшается.

•Первую наименьшую концентрацию антибиотика (из серии последовательных разведений), где визуально не определяется бактериальный рост принято считать минимальной подавляющей концентрацией (МПК/MIC). Измеряется МПК в мг/л или мкг/мл.

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

E-тесты для определения чувствительности к антибиотикам

Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию дисковым методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной.

В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной

подавляющей концентрации (MIC).

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

E-тесты для определения чувствительности

к антибиотикам

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

E-тесты для определения чувствительности

к антибиотикам

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

Подсчет

Нет необходимости считать всю чашку!

На чашку наклеивается специальная прозрачная сетка или используется сетка-подставка.

Нужно подсчитать колонии в двух противоположных секторах и определить общее количество КОЕ по таблице.

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

Побочные реакции при антибиотикотерапии

аллергические,

токсические,

эндотоксические,

дисбактериозы.

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

Побочные реакции при антибиотикотерапии

Аллергизирующее действие. Применение антибиотиков может вызывать аллергические реакции (от различных кожных высыпаний до анафилактического шока). Наиболее

выраженным аллергизирующим действием обладают природные антибиотики, особенно

пенициллины. В значительной степени это связано с широким распространением грибовпродуцентов в окружающей среде и высокой сенсибилизирующей активностью их продуктов. В подобных ситуациях, применение антибиотиков играет роль введения разрешающей дозы для развития аллергической реакции. Степень её проявления прямо пропорциональна степени сенсибилизации организма.

Токсическое действие. Аминогликозиды обладают ототоксичностью вследствие

негативного влияния на VIII пару черепных нервов (развивается глухота) .

Эндотоксическое действие:

Поражения паренхимы печени наиболее часто вызывают тетрациклины, рифампицин и левомицетин. Неграмотное применение последнего может привести к развитию своеобразного поражения, известного как синдром «серого ребёнка». Препарат метаболизирует в печени, образуя глюкурониды. При врождённой недостаточности глюкуронилтрансферазы левомицетин накапливается в крови в токсических концентрациях, развиваются общая слабость, рвота, появляется серый оттенок кожных покровов, боли в сердце, отёки и гепатомегалия, возможен летальный исход.

Поражения почек нередко наблюдают при назначении амфотерицина В, связывающегося с холестерином мембран эпителия почечных канальцев. Нефротоксическое действие

может также оказать линкомицин.

Поражения органов кроветворения. Нарушения функций костного мозга (анемии, лейко- и тромбоцитопений, вплоть до апластического криза) относят к наиболее тяжёлым осложнениям антибиотикотерапии. Подобные поражения способен вызывать левомицетин.

Иммунодепрессивные эффекты. Эти свойства обусловлены цитостатическим эффектом препаратов на иммунокомпетентные клетки. Наиболее выраженным иммунодепрессивным эффектом обладают препараты, способные подавлять функции органов кроветворения,

например, левомицетин и циклоспорин.

Дисбактериозы. При длительном (более 2-х недель) пероральном применении АБ может

развиться дисбактериоз, наиболее тяжёлая форма которого – псевдомембранозный колит,

вызываемый анаэробной бактерией – Clostridium defficile.

Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ

Побочные действия антибиотиков

Halmos T, Suba I. Orv Hetil. Physiological patterns of intestinal microbiota. The role of dysbacteriosis in obesity, insulin resistance, diabetes and metabolic syndrome 2016 Jan 3; 157(1):13-22.

Björnsson ES. Hepatotoxicity by Drugs: The Most Common Implicated Agents. International Journal of Molecular Sciences. 2016;17(2):224. Abeles SR,. Microbial diversity in individuals and their household contacts following typical antibiotic courses. Microbiome. 2016 Jul 30;4(1):39