Занятие 3. Стерилизация и дезинфекция. Питательные среды.
Культивирование микроорганизмов. Выделение чистой культуры бактерий.
Наумов Г.Н.
доцент кафедры микробиологии КубГМУ
Стерилизация (обеспложивание) —
комплекс мероприятий, направленных
на полное уничтожение в объекте живых микроорганизмов в любых
формах (вегетативных и спор).
Осуществляется с помощью методов:
-механических (фильтрация),
-физических (термическое воздействие, обработка ультразвуком, ультрафиолетовым
ирадиационным излучением),
-химических (газовая стерилизация
иприменение растворов химических
реагентов).
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Стерилизация фильтрованием
применяется для обработки растворов и питательных сред, не выдерживающих температурную обработку (витамины,
белковые и сывороточные питательные среды).
Для этого используют мембранные и
свечевидные мелкопористые фильтры (диаметр пор – 0,2-0,4 мкм),
задерживающие клетки микроорганизмов.
Т.к. эти фильтры оказывают большое сопротивление при фильтрации, в приемной емкости создают вакуум, что ускоряет процесс фильтрации.
Метод не абсолютный, через такие фильтры проходят вирусы и L-формы бактерий.
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Глубинные фильтры
фильтры из керамики или фарфора (поры 3-4 мкм),
стеклянные фильтры с
размером пор около 2 мкм изготавливают из сваренных стеклянных зерен в виде пластинок
«Комплект фильтрующий погружной П-40М»,
фильтрующие и процеживающие элементы которого выполнены из
специальной тканной металлической мелкоячеистой сетки,
имеющей металлическую окантовку
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Мембранные фильтры
(эфиры целлюлозы, ПХВ, акрил, нейлон и т.п.)
фильтры «Владипор»
(поры 0,35-0,45 мкм),
мембраны марки МФА-А (поры 0,2-0,5 мкм) для фильтрации воды;
фильтрационные капроновые мембраны «Мифил» (поры 0,2 мкм)
полиядерные лавсановые фильтры
(поры 0,02 —5 мкм)
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Мембранные фильтры
(эфиры целлюлозы, ПХВ, акрил, нейлон и т.п.)
Ядерные фильтры -
микропористые фильтры, образующиеся при облучении полимерных лавсановых плёнок ускоренными тяжёлыми ионами с последую-
щим вытравливанием разрушенных участков полимера. Вдоль траектории ионов возникают
сквозные каналы правильной формы.
Особенность этих фильтров высокая однород-
ность размеров пор, что приводит к их малой забиваемости отфильтровываемыми частицами.
Физические методы
стерилизации
УФ-излучение - бактерицидные лампы БУВ открытого или закрытого типа (2,5 Вт/м3). Применяются для стерилизации воздуха,
поверхностей;
ионизирующее излучение – гамма-лучи
(мощностью 2,5 Мрад). Стерилизуют изделия
из пластмасс одноразового применения, перевязочные материалы, некоторые лекарственные препараты (например, глазные пленки);
термическая стерилизация – высокая температура. Стерилизуют стеклянную посуду, инструментарий, питательные среды, перевязочные материалы, термостойкие лекарства и т.п.
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Бактерицидные светильники
открытого типа |
закрытого типа «Дезар-4» |
Светильники открытого типа излучают, в основном, УФ-лучи с λ – 254 нм, которые наруша-
ют бактериальную ДНК,
вызывая гибель бактерий. Вместе с тем, УФ-лучи также разрушительно действуют и на ДНК клеток человека, вызывая ожоги кожи и слизистых. Особенно тяжело протекают
ожоги конъюнктивы глаз,
развивающиеся, если посмотреть на лампу незащищёнными глазами 1-2 минуты. Ожог конъюнктивы проявляется резкой болью, блефароспазмом, слёзотечением, и требует лечения.
Лампы открытого типа не используют в присутствии людей;
лампы закрытого типа
можно использовать в присутствии людей.
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Установка гамма-стерилизации
Процесс облучения протекает в специальной установке. Необходимые для этой процедуры гамма-лучи возникают вслед-
ствие распада радиоактивного изотопа – кобальта 60. В ходе процедуры стерилизации система подачи располагает обрабатываемые изделия вокруг источника излучения.
Большим преимуществом гамма-излучения является его хорошая проникающая способность, благодаря которой изделия можно стерилизовать в раздельных упаковках. Это обстоятельство упрощает производственный процесс и гарантирует отсутствие загрязнений вследствие последующей упаковки изделий.
Преимущества стерилизации гамма-лучами:
-надёжная и эффективная процедура стерилизации,
-гибкие и разнообразные возможности применения,
-хорошая проникающая способность позволяет производить облучение в упаковке,
-щадящая процедура для изделий, поскольку она не требует повышения температуры,
-никаких остатков химикалий или токсичных веществ
визделии,
-изделия можно использовать сразу же после облучения
Стерилизация инструментов и материала осуществляется в гер-
метичных упаковках в заводских условиях. При целостности
упаковки стерильность предметов сохраняется до 5 лет.
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Термическая стерилизация
прокаливание на пламени
(так стерилизуют бактериологическую петлю, скальпель, пинцет и т.п.);
кипячение в 2% содовом растворе
(стеклянная посуда и пипетки, отработанные предметные стекла);
стерилизация горячим воздухом;
стерилизация паром под давлением
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ