Приготовление препарата-мазка
1.Тщательно обезжиривают предметное стекло.
2.Наносят каплю воды и суспендируют в ней агаровую культуру бактерий.
3.Размазывают культуру тонким слоем в центре стекла бактериологической петлёй.
4.Просушивают мазок на воздухе.
5.Фиксируют мазок либо в пламени спиртовки, либо химической (жидкостной) фиксацией.
Приготовление препарата-мазка
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
МИКРОСКОПИЯ ОКРАШЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ
Окрашивают
препараты-мазки,
которые перед окраской должны быть обязательно
зафиксированны
(закреплены на стекле, а
микробы убиты).
ВИДЫ ФИКСАЦИИ
Термическую фиксацию
осуществляют путем проведения предметного стекла мазком вверх через пламя 3-4 раза.
Химическую фиксацию
мазков проводят 96%-ным этанолом, формалином или
специальными фиксационными смесями (смесь Никифо-
рова, жидкость Корнуа и т.п.).
При фиксации препарата
микроорганизмов решаются 3 важнейшие задачи:
-микроорганизмы погибают и перестают быть опасными,
-они закрепляются на предметном стекле,
-начинают хорошо прокрашиваться
красителями.
2.Аналитический этап включает методы МБ диагностики :
Микроскопический
(бактериоскопический),
Бактериологический (культуральный)
Серологический,
Биологический,
Аллергологический (аллергический)
Молекулярно-генетический
(молекулярно-биологический)
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
2. Аналитический этап включает методы МБ диагностики :
Микроскопический метод заключается
в приготовлении окрашенных препаратов
из материала и установления диагноза на
основании морфологических и тинкториальных свойств микроорганизмов;
Бактериологический метод заключается в
выделении чистой культуры возбудителя и её идентификации (определение до вида);
Серологический метод заключается в
обнаружении в сыворотке крови человека
специфических антител к возбудителю заболевания и определении их титра
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
2. Аналитический этап включает методы МБ диагностики :
Биологический метод заключается в
заражении материалом лабораторного животного, воспроизведении у него картины заболевания, обнаружении и выделении возбудителя при вскрытии;
Аллергологический метод заключается в
выявлении повышенной чувствительности
организма к возбудителю или продуктам его жизнедеятельности (аллергенам) путем постановки кожно-аллергичесих проб;
Молекулярно-генетический метод
заключается в выделении ДНК возбудителя и
доказательства её гомологии с эталонными молекулами
(ПЦР, ДНК-зонды и др.)
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Бактериологический метод заключается в
выделении чистой культуры возбудителя и её идентификации (определение до вида)
Признаки, используемые для идентификации бактерий:
- морфологические (форма, размер, взаиморасположение клеток, споры, капсулы, жгутики),
-тинкториальные (способность к окрашиванию);
-культуральные (характер роста на питательных средах);
-биохимические (способность расщеплять сахара и др.
соединения, а также выделять различные продукты);
- антигенные (антигенное строение бактерий);
- биологические (токсигенность); - чувствительность к бактериофагам (фаготип)
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Рисунки к занятию № 1
Х 8 |
Х 40 |
Х 90 |
|
Дрожжевые клетки окраска метиленовым синим
Препарат |
Дрожжи капсулы |
Исследуемый микропрепарат |
|
«раздавленная капля» |
|||
окраска по Бури |
окраска фуксином |
||
|
|||
|
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ |
|