47. Как изучают развернутые биохимические свойства бактерий?

Способы изучения биохимических свойств бактерий:

1) среды Гисс (пестрый ряд) — дифференциально - диагностические среды, используемые для выявления сахаролитической активности бактерий. Содержат 1% пептонную воду, 0,5% раствор определенного углевода (глюкоза, лактоза, мальтоза, манит, сахароза и др.) и индикатор Андреде (кислый фуксин в растворе NaOH). Среда при рН 7,2-7,4 – бесцветна, при ферментации углеводов приобретает красный цвет. В пробирки со средой помещают поплавок (небольшая трубочка, один конец которой запаян) для улавливания газообразных продуктов, образующихся при расщеплении углеводов. ;

2) система индикаторных бумаг (СИБы)Бумажные индикаторные системы представляют собой полоски или диски хроматографической бумаги, пропитанные соответствующими субстратами и индикаторами и покрытые для стабилизации пленкообразующим полимером

- водным раствором поливинилового спирта.

СИБ №1 – для идентификации холерного вибриона из 13 тестов, 50 анализов;

СИБ №2 – для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий из 13 тестов, 50 анализов;

СИБ №3 – для для определения коки-индекса воды из 2-х тестов, 100 анализов;

СИБ №4 – для сан.-бактериологического анализа воды из 2-х тестов, 100 анализов;

СИБ №5 – для идентификации коринебактерий дифтерии из 4-х тестов, 50 анализов.

3) панели биохимической идентификации Принцип действия лунки пластиковой панели

содержат углевод + индикатор или аминокислоту + индикатор, вносят взвесь

микроорганизмов в физ. р-р - при разложении образуется К или КГ ;

4) автоматизированные системы идентификации микроорганизмов.

При некоторых исследованиях для более углубленного изучения биохимических свойств выделенного микроба ряд Гисса дополняют дульцитом, сорбитом, ксилозой, арабинозой и некоторыми другими сахарами. Название «пестрый» ряд обусловлено тем, что под действием ферментов микроба одни углеводы остаются неизменными и, следовательно, цвет питательной среды не меняется, в то время как другие сахара расщепляются, образуя кислые продукты распада, которые изменяют цвет индикатора и соответственно цвет питательной среды.

48. Какой состав имеют мпа и мпб?

Мясопептонный бульон (МПБ = мясная вода + 1% пептона + 0,5% NaCl), мясо-пептонный агар (МПА = МПБ + 2-3% агара) К 100 мл мясного бульона добавляют 1 % пептона Пептон- это продукт ферментативного гидролиза белков. Добавляют пептон в среду для увеличения ее питательности, для уплотнения среды в нее добавляют от 2 до 4 % агар-агара.

Мясопептонный бульон (МПБ) (для культивирования гетеротрофных микроорганизмов.). К мясной воде прибавляют 1% пептона и 0,5% х. ч. натрия хлорида, кипятят на слабом огне 10—15 мин для растворения веществ, устанавливают нужный рН и снова кипятят 30—40 мин до выпадения осадка. Фильтруют, доливают до первоначальною объема водой и стерилизуют 20 мин при 120°С.

Мясопептонный агар (МПА) (основная плотная питательная среда, используемая для выращивания хемоорганотрофных бактерий.). К готовому бульону (до стерилизации или после нее) добавляют 2—3% измельченного агар-агара и кипятят, помешивая, на слабом огне до; полного расплавления агара. МПА можно варить в автоклаве или аппарате Коха. Готовую среду, если нужно, осветляют, фильтруют и стерилизуют 20 мин при 120°С. Полужидкий агар содержит 0,4—0,5% агар-агара.