Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Itogavya / Mikrobiologia_1_itogovaya.docx
Скачиваний:
325
Добавлен:
03.12.2020
Размер:
94.94 Кб
Скачать

42. Методы культивирования анаэробов.

Для культивирования анаэробных микроорганизмов необходимо создание бескислородных условий, достигаемое различными методами. Различают четыре вида таких метода:

Физические методы. Основаны на выращивании микроорганизмов в безвоздушной среде, что достигается:

1) посевом в среды, содержащие редуцирующие и легко окисляемые вещества;

2) посевом микроорганизмов в глубину плотных питательных сред;

3) механическим удалением воздуха из сосудов, в которых выращиваются анаэробные микроорганизмы;

4) заменой воздуха в сосудах каким-либо индифферентным газом;

5) регенерации ПС кипячением.

Химические методы. Основаны на поглощении кислорода воздуха в герметически закрытом сосуде (анаэро-стате, эксикаторе) такими веществами, как пирогаллол или гидросульфит натрия Na2S2О4.

Биологические методы. Основаны на совместном выращивании анаэробов со строгими аэробами. Для этого из застывшей агаровой пластинки по диаметру чашки вырезают стерильным скальпелем полоску агара шириной около 1 см. Получается два агаровых полудиска в одной чашке. На одну сторону агаровой пластинки засевают аэроб, а другую сторону засевают анаэроб. Края чашки заклеивают пластилином или заливают расплавленным парафином и помещают в термостат. При наличии подходящих условий в чашке начнут размножаться аэробы. После того, как весь кислород в пространстве чашки будет ими использован, начнется рост анаэробов (через 3-4 суток). В целях сокращения воздушного пространства в чашке питательную среду наливают возможно более толстым слоем.

Комбинированные методы. Основаны на сочетании физических, химических и биологических методов создания анаэробиоза.

43. Определение подвижности бактерий по Пешкову.

При помощи внесения бактерий уколом в столбик полужидкого агара – подвижные растут по всей толще среды, неподвижные – по уколу.

Пешкова среда - дифференциально-диагностическая полужидкая питательная среда для определения у микроорганизмов подвижности и способности сбраживать глюкозу; содержит агар, глюкозу и индикатор бромтимоловый синий.

Среда Пешкова: мазок фиксируют, окрашивают метиленовой синью с подогревом, смывают водой, докрашивают раствором нейтрального Красного 10 сек, смывают водой, высушивают фильтровальной бумагой. Споры синие, клетка - красная.

44. Как у бактерий определяют способность выделять индол?

Индол — ароматическое соединение — выделяют гнилостные бактерии. При добавлении к колонии, которая выделяет индол, щавелевой кислоты колония приобретает розовый цвет, а при добавлении лакмуса — синий (индикатор на кислоту). Зачастую в пробирку вносят фильтровальную бумагу, смоченную одним из индикаторов (не касаясь среды) и оценивают изменение её цвета.

45. Как у бактерий определяют способность выделять сероводород?

Характерный запах, и появление на индекаторной бумажке, пропитанной ацетатом свинца черного цвета, за счет образования FeS.

46. Состав среды Эндо, как на ней растут разные кишечные бактерии?

Среда Эндо - состоит мясопептонного агара с 1 % лактозы и индикатора — карболовый фуксин Циля, обесцвеченного сульфитом натрия, соли (фосфаты), фосфат. буф. система. Свежеприготовленная среда бесцветна или бледно-розовая. При росте лактозоположительных бактерий (кишечная палочка) их колонии окрашиваются в темно-красный цвет с металлическим блеском; лактозоотрицательные (энтеробактерии) бактерии образуют бесцветные колонии.

Селективно-дифференцировочная среда для кишечной палочки. На среде Эндо лактозаположительные эшерихии образуют фуксиново-красные колонии с металлическим блеском, лактоза-отрицательные – бледно-розовые или бесцветные с темным центром.