Бабьева И. П., Чернов И. Ю. Биология дрожжей. М. Товарищество научных изданий КМК, 2004

Cryptococcus

Колонии белые или кремовые, некоторыекрасные, желтые, оранжевые или бледно-розовые, у большинствавидовслизистые. Клеткипреимущественнокруглые, овальныеилиудлиненные, обычно капсулированные (рис. 116). Вегетативное размножение полярным или многосторонним почкованием. Могут формировать псевдомицелийилиистинныймицелий. Все виды ассимилируют инозит (илиD-глюкуроновую кислоту), большинство видов образует крахмалоподобные соединения. Ксилоза присутствует в гидро-

лизатах клеток. Преобладающий убихинон Q-9 или Q-10. Распространены повсеместно, один из наиболее часто встречающихся родов дрожжей в почвах и на растениях во всех природных зонах. В роде Cryptococcus классифицируются анаморфы родов Filobasidium,

Filobasidiella, Cystofilobasidium и других телеоморфных родов из порядков Tremellales

и Filobasidiales, а также виды снеизвестнымителеоморфными стадиями.

Fellomyces

Клеткикруглыедоэллипсоидальных. Почкиобразуютсяпо одной на концах стеригм и отделяютсяпослезакладкисепты на дистальном конце стериг-

мы (рис. 20, 117). Длина сте- Рис. 117. Fellomyces penicillatus: клетки

ригм может достигать 4 мкм. с почками на выростах.

211

Может формироваться истинный мицелий. Баллистоспоры не образуют. Не бродят. В гидролизатах клеток присутствует ксилоза. D-глюкуроно- вую кислоту и инозит ассимилируют. Преобладающий убихинон Q-10.

Kockovaella

Колонии сероватые, серовато-желтые, серовато-оранжевые. Клетки круглые, короткоовальные илипочковидные, способны к трем типам размножения: обычнымпочкованием(редко), образованиемпочекнатонких выростах(стеригмах) иформированиембаллистоспор (рис. 118). Баллистоспорыкруглые, реповидные, почковидные или эллипсоидальные. Мицелийипсевдомицелийне образуют. Сахара не сбраживают.

Ксилозаприсутствуетвгидролизатах клеток. Преобладающий убихинон Q-10.

Kurtzmanomyces

Клеткикруглые, овальныеили цилиндрические. Конидии(почки) образуются по одной на вершинах стеригм и отделяются после закладки септы на дистальном конце стеригмы. Иногда стеригмы удлиняются и ветвятся, в этом случае могут формироваться дополнительные почки. Образуют истин-

ный мицелий. Баллистоспоры не образуют. Не бродят. Инозит не ассимилируют. Крахмалоподобные соединения не образуют. Ксилоза в гидролизатах клеток отсутствует. Преобладающий убихинон Q-10. ВыделенизродаFellomyces наоснованииотсутствияксилозывгидролизатах клеток.

Pseudozyma

Колонии серовато-белые, розовые, оранжевые или коричневатые, обычно с центральной дрожжевой частью и субстратным и воздушным мицелием по краю. Клетки вариабельны по форме, чаще овальные или

212

удлиненные. Мицелий с перетяжками в районе септ. Часто наблюдается отделение цитоплазмы внутри лизирующихся клеток. На мицелии формируются веретеновидные бластоконидии на длинных зубчиках и акропетальныецепочкиконидий. Могутприсутствоватьхламидоспоры. Баллистоспорынеобразуют. Сахаранесбраживают. Ассимилируютинозит. Крахмалоподобные соединения не образуют. Ксилоза в гидролизатах клеток отсутствует. Преобладающий убихинон Q-10. Виды Pseudozyma ранееклассифицировалисьвразличныхродахнесовершенныхдрожжей

(Sporobolomyces, Candida, Sterigmatomyces, Stephanoascus), нобылиобъе-

динены в одном роде на основании более детальных сравнительных исследований и молекулярно-биологических характеристик. Сравнение нуклеотидныхпоследовательностейрРНКпозволяетпредположить, что они являются анаморфными стадиями головневых грибов.

Rhodotorula

Колониикрасные, розовые, оранжевыеилибелыеикремовые. Клетки круглые, овальные или удлиненные, у некоторых видов веретеновидные, сигаровидные (рис. 119). Вегетативное размножение многостороннимилиполярнымпочкованием. Могутформироватьпсевдомицелийили истинный мицелий. Баллистоспоры не образуют. Не бродят. Инозит не ассимилируют или ассимилируют инозит, но не D-глюкуроновую кислоту. Крахмалоподобные соединения не образуют. Ксилоза в гидролизатах клеток отсутствует. Преобладающий убихинон Q-9 или Q-10. Сборный полифилетический род, известные телеоморфы некоторых видов классифицируются в родах Rhodosporidium, Leucosporidium.

Рис. 119. Rhodotorula: клетки разных видов.

213

Sporobolomyces

Колонии розовые, оранжево-красные, кремовые или желтовато-ко- ричневые. Клеткиовальные, веретеновидныеилиудлиненные. Почкование в основном полярное, реже многостороннее, почки сидячие или на коротких зубчиках. Образуют баллистоспоры, иногда очень активно. Баллистоспоры двусторонне симметричные, аллантоидные, фасолевидные, миндалевидные, каплевидные, серповидные. Могут образовывать псевдомицелий или истинный мицелий. Не бродят. Ксилоза в гидролизатах клеток отсутствует. Преобладающий убихинон Q-10. Ряд видов - анаморфы рода Sporidiobolus (см. рис. 106).

Sterigmatomyces

Колонии белые или кремовые. Клетки круглые или овальные, при вегетативном размножении образуют 1-2 конидиогенные стеригмы до 3 мкм длиной. Конидии (почки)

развиваются на концах этих стеригм. Почки также могут образовыватьстеригмысконидиями, что приводит к формированию коротких разветвленных цепочек клеток (рис. 120). Отделение почки происходит после закладки септы в центральной части стеригмы. Мицелий отсутствует. Баллистоспорынеобразуют. Небродят. Инозит ассимилируют. Ксилоза в гид-

Рис. 120. Sterigmatomyces halophilus: ролизатахклетокотсутствует. Пре-

Trichosporon

Колониикремовые, слизистыеилисухие. Образуютобильныйсептированный мицелий, распадающийся на артроспоры(рис. 121). На мицелии могут формироваться также бластоконидии, разветвленные апрессории, в клетках мицелия - эндоспоры. Почкующиеся клетки ипсевдомицелий, как правило, отсутствуют. Септы мицелия с долипорами. Не бродят. Преобла- дающийубихинонQ-9 илиQ-10. Вгидролизатахклетокприсутствуетксилоза. Филогенетическигетерогенныйрод, которыйранеевключалвидыкак

214

Рис. 121. Trichosporon: 1 – почкующиеся клетки, 2 – мицелий, распадающийся на артроспоры.

аскомицетового, такибазидиомицетового аффинитета. Внастоящее время объединяет только анаморфные виды базидиомицетового аффинитета, характеризующиеся обильным образованием артроконидий.

Tsuchiyaea

Род создан для единственного вида T. wingfieldii, ранее классифицировавшегосявродеSterigmatomyces. Вотличиеотвидовпоследнегорода, T. wingfieldii способен к вегетативному размножению как с помощью формирования конидий на специальных выростах (стеригмах), так и с помощьюэнтеробластического почкования, атакжехарактеризуетсяналичием ксилозы в гидролизатах клеток.

Udeniomyces

Родсоздандлянесколькихвидов, ранееклассифицировавшихсявроде Bullera, ноотличающихсяотдругихвидовэтогородарядомсущественных фенотипическихпризнаковинуклеотиднымипоследовательностямирРНК. Колониибледноокрашенные, кремовыеилирозоватые. Клеткиовальныеили удлиненные, могут вытягиваться в короткие гифы. Образуют очень крупные двусторонне симметричные (каплевидные, булавовидные) баллистоспорыдо15 мкмвдиаметре. Вгидролизатахклетокприсутствуетксилоза.

215

Идентификация дрожжей

Определение видовой принадлежности дрожжей - сложная процедура, требующая не только большого опыта, но и, как правило, достаточно длительных лабораторных исследований, связанных с постановкой серии тестов для определения рассмотренных выше морфологических, физиологических ибиохимических признаков. Лишьпослесоставления достаточно полного описания штамма возможна его надежная видовая идентификация. В последнее время для идентификации дрожжей по таким описаниям, наряду с традиционными дихотомическими ключами, широко используются компьютерные технологии нумерической идентификации. Такая идентификация может осуществлятьсянаосновелюбойСУБД (средствоуправлениябазамиданных), в которую внесены стандартизованные признаки всех видов дрожжей. В процессе идентификации программа поочередно сравнивает описание идентифицируемого штамма с описанием каждого вида и высчитывает уровень сходства (долю совпавших признаков от общего количества использованныхпризнаков). Результирующаяинформацияпредставляет собой список видов, ранжированный по уровню сходства с идентифицируемымштаммом. Существуютспециализированныепрограммыдля идентификации дрожжей. Некоторые коллекции дрожжей предоставляют возможность поиска наиболее сходных штаммов с использованием Интернета (например, http://www.cbs.knaw.nl). В последние годы бурно развивается система генобанков, доступных через Интернет (например, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/), позволяющих искать наиболее сходные нуклеотидные последовательности. Однако следует помнить, что при идентификации с использованием таких формальных процедур возможны серьезные ошибки, поэтому для надежного определения вида дрожжей необходима консультация со специалистом-систе- матиком, имеющим большой опыт изучения разнообразия этих организмов. В первую очередь это относится к идентификации штаммов, выделенных из природных местообитаний.

Приведенныенижеидентификационныеключидляопределениярода составлены на основе существующих определителей дрожжей и основаныглавнымобразомнаиспользованииморфологическихинекоторыхфизиологических признаков. Определение аскомицетовых и базидиомице-

216

товых дрожжей проводится по разным критериям, поэтому первое, что необходимоустановитьприидентификациидрожжевойкультуры - ееаффинитет, то есть принадлежность к аскоили базидиомицетовым грибам. Для этого исследуется совокупность признаков аффинитета, рассмотренная выше (см. табл. 3). Для определения видов внутри найденного рода следует обратиться к определителям.

бВнутриклеточные паразиты в клетках эпителия кишечника дрозофил. Образуют удлиненные аски с веретеновидными аскоспорами .......

бВегетативное размножение преимущественно почкованием или

бПреимущественно мицелиальные, дрожжевые колонии возникают

бАски цилиндрические, открываются отверстием на вершине, содержат

7а Вегетативное размножение исключительно биполярным почкованием на широком основании (почкующееся деление), клетки апикулят-

бВегетативное размножение многосторонним истинным почкованием

217

9а Аскоспоры круглые, гладкие, обычно 4 в аске, при созревании копулируют попарно непосредственно в аске, клетки крупные..................

....................................................................................... Saccharomycodes

бАскоспоры круглые, поверхность покрыта шипами, аски обычно содержат одну спору и образуются после педогамной копуляции,

вАскоспоры с асимметричным смещенным ободком (кепковидные),

гАскоспоры шляповидные или сферические, аски образуются без

бИстинного мицелия не образуют или он скудный, аски

17а Аскоспоры игловидные, с хлыстовидными придатками, иногда с поперечной септой или вздутием в центральной части .......................

218

19 а Аски круглые, с одной стерильной клеткой на вершине, содержат

2-4 шляповидные аскоспоры........................................... Stephanoascus

бАски круглые или обратнояйцевидные, содержат 1-4 аскоспоры

вАски цилиндрические или игловидные, открываются отверстием на вершине; в аске множество овальных или бобовидных аскоспор.......

............................................................................................ Dipodascopsis

20а Аски овальные собраны в мутовки на вершине прямых неветвящихся гиф, открываются отверстием на вершине, аскоспоры шляповид-

бАски содержат множество аскоспор, которые освобождаются через отверстие на вершине аска; новые аски образуются, прорастая через остатки старого; аскоспоры овальные, со смещенным ободком .........

..................................................................................................... Ascoidea

вАски одиночные, не собранные в пучки, на мицелии или свободные,

21а Аски на мицелии или свободные, быстроразрушающиеся, содержат 1-4 круглые или шляповидные аскоспоры, интенсивно разжижают

бКолонии слизистые, аскоспоры янтарного цвета, аски мешковидные,

219

26а Аскоспоры игловидные, аски булавовидные или овальные, обычно образуются из хламидоспор, ........................................... Metschnikowia

гАскоспоры шляповидные или сферические с субэкваториальным

аАскоспоры овальные, по одной в аске, освобождаются через отверстие

30а Активно сбраживают глюкозу, инозит не ассимилируют

Kluyveromyces

бГлюкозу не сбраживают или сбраживают слабо,

220