Добавил:
asya1488gg@gmail.com Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Вирусы кратко

.docx
Скачиваний:
4
Добавлен:
22.08.2020
Размер:
43.01 Кб
Скачать

Грипп

Семейство Orthomyxoviribae

Спиральная однонитевая минус РНК.

Суперкапсид +.

Н – гемагглютинин (связывается с рецепторами).

N – нейраминидаза (модицифирует рецепторы и обеспечивает эндоцитоз)

Экспресс: обнаружение АГ РИФ, ИФА, ПЦР.

Вирусологический: заражение собак, РКЭ, почек, макак => РСК, РТГА, ТФА.

Тип определ. в РСК, подтип в РТГА

Живая вакцины, инактивированная вакцина

Симптоматическое; ремантидин препятствует репродукции вируса гриппа А, ингибиторы нейраминидазы, противогриппозный донорский иммуноглобулин

Постинфекционный иммунитет длительный и стойкий.

Краснуха

Togaviridae – Rubivirus

Однонитчатая плюс РНК.

Сложный.

Белки С, Е1, Е2.

Смывы с носа, зева, крови, мочи, испражнений.

Зараж. культ. кл. => РН, РТГА, РИФ, ИФА.

Обнаруж. АТ: РН, РСК, РТГА, РИФ, ПЦР

Живая вакцина в 1, 6 и в 13 лет.

Симптоматическое

Пожизненный

Корь

Paramyxoviridae – Morbilliviridae

Однонитчатая минус РНК.

Суперкапсид +.

Нуклеокапсидный протеин NP, матриксный белок M, а также поверхностные гликозилированные белки липопротеиновой оболочки — гемагглютинин H, белок слияния F и гемолизин. В

Смыв с носоглотки, соскоб с сыпи, кровь, моча.

Зараж культ. кл. => РИФ, РТГА, РН.

Характерно наличие многоядерных клеток и АГ в них.

Сероиагностика: РСК, РТГА, РН.

Аттенуированная вакцина или ассоциативная (корь, паротит, краснуха). В 1 и 6 лет.

Симптоматическое

Пожизненный

Коронавирус

Coronaviridae – Coronavirus (Betacoronavirus)

РНК

Гликопротеины Е1 и Е2 (адсорбция и инфазия)

Смыва с носоглотки, кровь. ПЦР, РСК.

Не разработана

Симптоматическое

Не изучен

Респираторные аденовирусы

Семейство Adenoviridae, включают род Mastadenoviridae (человека и животных) и род Aviadenoviridae (птиц)

Двунитевая линейная ДНК

Белки: II-XII, Е1-Е4, L1-L5.

E1 – транспорт мРНК в цитоплазму и трансляцию;

Е2 – синтез ДНК-связывающего белка;

АГ-А – группоспецифический.

АГ-В – подгруппы;

АГ-С – типофспецифический.

АГ – в ИФА

Выявление вируса: отделяемое носоглотки, конъюнктивы, кровь, испражнения. Использ. клетки эмбриона человека =>РСК, РТГА, РН.

Против некоторых штаммов живые иммуногенные пероральные вакцины

Симптоматическое

Вирус натуральной оспы

Poxviridae, подсемейства Chordopoxviridae

Двунитевая линейная ДНК.

Содержит гемагглютинин.

Электронная мик-я пустул, световая мик-я пузырьков – крупные клетки с тельцами Гваринели.

В мазках по Морозову – тельца Пашена.

Заражение РКЭ.

Материал кровь, отдел. Носоглотки, соскоб сыпи.

РСК, ИФМ.

Вакцинация

Марборан (подавляет репродукцию вируса)

Пожизненный

Полиомиелит

Picornaviridae – Enterovirus- Poliovirus

Однонитевая РНК.

Белки VP1- VP4

Кал, отделяемое из носоглотки, биоптаты мозговой ткани, лимф. узл.

РН в культ. клеток.

РН, ИФА, ЦПД.

ПЦР, радиальная иммунодиффузия.

Убитая и чаще живая вакцина в 3, 4 с половиной, 6, 18, 20 мес и в 14 лет.

Гомологичный иммуноглобулин

Пожизненный

Ротавирус

Rotaviridae – rotavirus

Двунитевая + РНК.

VP1 – РНК-полимераза.

VP2 – формирует ядро вируса и связывает вирусный геном.

VP3 – гуанилил-трансфераза.

VP4 – связывается с рецепторами клеток и управляет внедрением.

VP6 – формирует толщу капсида, определяет вид.

VP7 – определяет тип.

Обнаружение вируса в испражнениях.

ИФА, иммунодиффузия, преципитация в агаре, РСК, коагглютинация, РНК-зонды.

Серо: РСК, ИФА, РН, ИФ,РПГА с антительным диагностикумом.

Вакцинация (не входит в календарь)

Прекращение дегидратации, восстановление водно-солевого баланса, нормальное питание

Нестойкий

Бешенство

Rabdoviridae – Lyssavirus

Пулевидная форма

Негативная однонитевая РНК

Суперкапсид+

Отпечатки мозговой ткани и слюнных желез. В пирамидных кл. – эозинофильные включения (тельца Бабеша – Негри).

АГ в тех же препаратах – прямая или непрямая иммунофлуоресценция.

Вирусологический: внутримозговое заражение б/мышей или внутримышечно кроликов (хомячков).

АТ: РН, РСК, иммунофлуоресценции, иммуносорбетные р-ции (РИМ, ИФМ).

Вакцинация и гамма-глобулин.

Антирабическая вакцина и антирабический гамма-иммуноглобулин

Поствакцинальный до года

Клещевой энцефалит

Flaviviridae – Flavivirus

Однонитчатая + РНК

Гликопротеин Е.

Белок М

Кровь, ликвор, культура клеток

РТГА, РН, РСК, РИФ.

Экспресс: обнаруж. АГ РНГА, ИФА, ПЦР

Прививка, специальный гомологичный Ig.

Прививка, специальный гомологичный Ig.

Стойкий

Вирус Эбола

Filoviridae – Filovirus

Одноцепочечная негативная РНК

Кровь, моча, геморр. экс.

Заражение культуры клеток обезьян => РН, РСК, ИФМ, РИФ.

Вакцина

Симптоматическое: поддержание водно-солевого баланса, функции почек и печени, борьба с геморрагическим синдромом, переливание плазмы, введение интерферонов.

ВИЧ

Retroviridae - Lentovirus

Две идентичные молекулы РНК

Gp120(125) –связь с СД4* (прикрепление)

Gp41(36) –вводит гидрофобные участки в мембрану и притягивает вирус.

P24 – образует капсид.

Ревертаза (RT) – обратная транскриптаза

Протеаза (PR) – разрезает длинные белки для создания вируса.

Интеграза (IN) – отрезает свободные концы ДНК, переносят ДНК в ядро.

ИФА, иммуноблоттинг, ПЦР

Нет

1. Ненуклеозидные ингибиторы обратной транскрипции – ингибируют обратную транскриптазу, а именно комформационную изменчивость обратной транскриптазы (ННИОТ).

2. Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы – подавляют активные центр фермента. (НИОТ).

Нет

Везикулярный стоматит

Rhabdoviridae – Vesicolovirus

РНК, похож на бешенство.

Из везикул на культ. кл или РКЭ. РИФ, РСК, ИФА.

Нет

Симптоматическое

Вирусы ЕСНО

Picornaviridae – Enterovirus

Одноцепочечная + РНК

Заражение клеток почек обезьяны из ликвора (фекалий).

АТ: РН, РСК, РТГА

Нет

Симптоматическое

Гуморальный, типоспецифический

Коксаки А и В

Picornaviridae – Enterovirus

Одноцепочечная + РНК

Заражение культуры клеток, мышей-сосунков (мазки носоглотки, испражнения).

Тип опред. в РТГА, серовар - РСК, РН

Нет

Симптоматическое

Вирус Норфолк

Caliciviridae – Norovirus

+РНК

Беок VP1 и VP2

ПЦР, ИФА (не оч чувств).

Нет

Симптоматическое

Временный

Простой герпес

Herpesviridae - Simplexvirus

ДНК вирус

Окрашенные мазки – гигантские многоядерные клетки (синцитий).

ЦПЭ.

РИФ, ИФА.

Серо: РСК, РИФ, ИФА.

ПЦР.

Инактивированная культуральная герпетическая вакцина.

Интерферон, ацикловир, фамцикловир, валацикловир, идоксуридин, видарабин, теброфеновая мазь.

Клеточный, ГЗТ

Ветряная оспа и опоясывающий лишай

Herpesviridae – Varicellovirus

ДНК

Содержимое высыпаний, отделяемое носоглотки, кровь.

В мазках по Роман-Гим: синцитий и внутриядерные включения (тельца Липшютца).

РИФ, ИФА, РСК, РН.

Живая вакцина для VZV

Ацикловир, видарабин, интерфероны, 1-2% KMnO4, зеленка.

Пожизненный

Вирус Эпштейна-Барр

Herpesviridae - Lymphocryptovirus

ДНК

Ядерные АГ 1, 2, 3А, 3В, 3С, латентные протеины, латентные мембранные протеины, LMPs – мембранный белок с онокогенноподобным действием

Обнаружение атипичных лимфоцитов, РА

Нет

Симптоматическое

Пожизненный

Вирус цитомегалии

Herpesviridae - Cytomegalovirus

ДНК

Кровь, моча, молоко, моча, слюна, отделяемое цервикального канала, ликвор. Клетки – «Глаза совы» - внутриядерные включения.

Вирусологич: в культ. кл.

ПЦР, РИФ, ИФА, РСК.

Нет

Аналоги нуклеозидов, иммуномодуляторы, индукторы интерферона, нормальный иммуноглобулин человека.

Гуморальный и клеточный.

Герпесвирусы типов 6,7,8

6 и 7 Herpesviridae –Roseolovirus

8 Herpesviridae -Rhadinovirus

ДНК

6 – внезапная экзантема младенцев и синдром хр. усталости с повыш. t и потливостью;

7 – у больных СПИД синдром хр. усталости;

8 – Саркома Капоши

6 и 7 – ко-культивирование лимфоцитов периферийной крови с митогенактивированными лимфоцитами.

Все – ПЦР.

Вирус гепатита А

Heparnovirus - Picornaviridae

Однонитевая + РНК

РСК, иммунофлуоресценция, РА, ИФМ, РИМ. В нашей стране для этой цели предложена тестсистема – «ДИАГН-А-ГЕП». Принцип работы этой тест-системы следующий. На стенках полистироловых луночек сорбируются вначале антитела к иммуноглобулинам класса М (антииммуноглобулины М), затем добавляется исследуемая сыворотка больного. Если в ней есть антитела класса IgM, они будут связываться анти-антителами М, затем добавляется специфический вирусный антиген (вирус гепатита А), который получают путем выращивания в культуре клеток. Система промывается, и к ней добавляются противовирусные антитела, меченные пероксидазой хрена. Если произошло взаимодействие всех четырех компонентов системы, возникает четырехслойный «сэндвич»: 1)  антииммуноглобулины М, 2) иммуноглобулины М (против вируса гепатита А – в исследуемой сыворотке больного), 3) вирусный антиген, 4) антивирусные антитела, меченные ферментом. Для обнаружения этого комплекса в луночки добавляют субстрат для фермента. Под влиянием фермента он разрушается, и образуется окрашенный продукт. Интенсивность окраски можно измерить количественно с помощью спектрофотометра или фотоколориметра.

Вакцина

Интерферон

Прочный и длительный

Вирус гепатита В

Hepadnaviridae – Orthohepadnavirus

ДНК

Сложный

HBsAg – поверхностный (superficial), или растворимый (soluble), или австралийский антиген. 2. HBcAg – сердцевинный антиген 3. HBeAg – антиген e, локализован в сердцевине вириона и, в отличие от HBcAg, не только присутствует в составе вириона, но и циркулирует в крови в свободном виде или в виде комплекса с антителом анти-HBeAg

РОПГА (обнаружение вируса или АГ HBsAg).

АТ: РСК, РПГА, РИМ, ИФМ.

ПЦР

Вакцинация в первый день, 1 и 6 месяц.

Интерферон, интерфероногены, ингибиторы ДНК-полимеразы.

Гуморальный, у хроников нет клеточного.

Вирус гепатита С

Flaviviridae – Hepacivirus

РНК+

Суперкапсид +

ПЦР, ИФА

Нет

Интерфероны

СД4 против NS3

Вирус гепатита D

Не классифицирован

Дефектный, без оболочки.

АТ в ИФА

Вакцина против ВГВ

Интерфероны

Вирус гепатита G

Flaviviridae - Hepacivirus

Одноцепочечная + РНК

ПЦР, ИФМ

Вирус гепатита E

Calciviridae – Hepavirus

Одноцепочечная + РНК

Специальная тест-система, для обнаружения АТ.

Цельновирионная вакцина

Интерферон

Пожизненный

Онкогенные вирусы.

РНК-содержащие

Сложные. Тип А, тип В (cr молоч железы у мышек), тип С (наибольш группа), тип Д (у обезьян), вирус бычьего лейкоза.

Две группы:

1. Эндогенные (составляют элементы генома всех органов и тканей организма и передаются вертикально. Не онкогенный для представителей, в клетках которого он постоянно.)

2. Экзогенные (передаются в популяции)

ОНКОГЕНЕЗ: onc-ген в норме неактивен. Scr-ген – Саркома Рауса в кур, ras-ген – саркома у крыс. Включение в геном кленки ДНК провируса – активация onc-гена – трансформация клетки. Исключение ДНК провируса из хромосомы – onc-ген встраивается в вирусный геном – транспорт в новые клетки в активном состоянии. Активация может быть, результатом увеличения транскрипционной активности в следствие действия трансактиватора. Помимо онковирусов активацию протоонкогена вызывают мутагены – подвижные генетические элементы.

Retroviridae - Deltaretrovirus

Вирусы Т-клеточного лейкоза человека:

Поражают СД4-лимфоциты

HTLV1 (возбудитель Т-клеточного лифолейкоза взрослых. Экзогенный)

HTLV2 (Волосисто-клеточный лейкоз)

Они оба: Передается половым, трансплацентарно, трансфузионно. Инкубация 20 лет, далее летальный исход. Поражают иммунную систему, в крови АТ, лечения и профилактики нет.

ДНК-содержащие

Вызывают трансформацию непермиссивных клеток (не реплицируются в формировании нового поколения вирионов). Экспрессия «ранних» генов – набор белков Т-АГ. Белок р53 – супрессор опухолевого роста (его синтез увеличивается при повреждении ДНК) – ограничивает клеточное деление. Рв – ген, кодирующий белок, контролирующий пролиферацию.

Papillomaviridaeвирус папилломы человека, кроликов, собак. Паразитирует в клетках плоского эпителия.Вызывает доброкачественные бородавки, папилломы, кандиломы в области половых органов, ануса, слизистой дыхательных путей, жКТ, коже. В ядре – в виде независимой двуцепочечной ДНК. Типы 2,5,8 –рак кожи, злокачественные опухоли полости рта, гортани. Типы 16, 18 – 100% рак шейки матки.

Polyomaviridaeпродуктивная инфекция в клетках природных хозяев. Стимулируют образование опухолей широкого гистологического спектра. Экспрессирует ранние белки, препятствует образованию р53. JC-лейкоэнцефалопатия – опухоль мозга у новорожденных хомячков.

SV-40 – не патогенен для человека.

Adenoviridae – серотипы 12, 18, 31 –саркомы у новорожденных хомячков и трансформация культуры клеток грызунов. Для еловека не опасен.

Вирус гепатита В – первичный рак печени – интеграция вирусной ДНК в район сильного промотора – синтез и накопление HВx-АГ – связывание супрессора р53.

Poxviridaeэритематозные узелки на коже лица, шеи, век, половых органов. Передается при прямом или половом контакте.

Herpesviridae

ВПГ2 – рак шейки матки

ВЭБ – лимфома Бэркитта (опухоль верхней челюсти), карцинома носоглотки.

Антигенная структура гриппа.

Гликопротеины гемагглютинин (Н) и нейраминидаза  (N)— ключевые белки для размножения вируса типов «A» и «B». Гемагглютинин используется для проникновения в клетку, нейраминидаза — для выхода из неё

H1N1 – испанский и свиной

H2N2 – азиатский

H3N2 – гонконский

 H5N1 - птичий

Вакцинация

Вирус гепатита В первые 24 часа, 1 месяц, [группа риска: 2 мес и в 12 мес], 6 месяц.

Полиомиелит 3 мес, 4,5 мес, 6 мес, 18 мес, 20 мес и 14 лет.

Корь, краснуха, паротит – 12 мес, 6 лет.

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ)

Основана на использовании меченых красителями антител. При наличии вирусного антигена он связывается с мечеными антителами, и под микроскопом наблюдается специфическая окраска, которая говорит о положительном результате. При этом методе, к сожалению, невозможна количественная интерпретация результата, а только лишь качественная.

Различают три разновидности метода прямой, непрямой, с комплементом.

Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминесцирующей сывороткой, светятся по периферии клетки в виде каймы зеленого цвета. Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген - антитело с помощью антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на микробах антитела выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами. В результате образуется комплекс микроб + антимикробные кроличьи антитела + антикроличьи антитела, меченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдают в люминесцентном микроскопе, как и при прямом методе.

ИФА иммуноферментный анализ

Похож на РИФ, однако в качестве маркеров используют не красители, а ферменты, превращающие бесцветные субстраты в окрашенные продукты, что и дает возможность количественной оценки содержания как антигенов, так и антител.

- Отмывают не связавшиеся антитела и антигены.

- Добавляют бесцветный субстрат, и в лунках с антигеном, который мы определяем, произойдет окрашивание, т.к. там будет связанный с антигеном фермент, после чего на специальном приборе оценивают интенсивность свечения окрашенного продукта.

По похожей схеме происходит и выявление антител.

Реакция непрямой(пассивной) гемаглютинации (РПГА).

В РНГА выявляют антитела сыворотки крови с помощью антигенного эритроцитарного диагностикума, который представляет собой эритроциты с адсорбированными на них антигенами.

Эритроциты (или частицы латекса) с адсорбированными на них антигенами взаимодействуют с соответствующими антителами сыворотки крови, что вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде пуговки.

РПГА ставят в пластиковых планшетках или в пробирках с разведениями сыворотки крови больного, к которым добавляют эритроцитарный диагностикум.

Иногда применяют антительный эритроцитарный диагностикум - эритроциты, на которых адсорбированы антитела. Например, можно обнаружить ботулинический токсин, добавляя к нему эритроцитарный антительный ботулинический диагностикум (такую реакцию называют реакцией обратной непрямой гемагглютинации (РОНГА).

РТГА

Если стоит задача выявления антител, то сделать это возможно при помощи реакции торможения гемагглютинации (РТГА). В лунку с вирусом и эритроцитами закапывают различные пробы. При наличии антител они свяжут вирус, и эритроциты упадут на дно с образованием «пуговки».

Для проведения РТГА с гриппозными антителами используют диагностикумы из штаммов, резистентных к неспецифическим сывороточным ингибиторам. Перед постановкой реакции парные сыворотки крови взятые в острой фазе инфекции и в период реконвалесценции, разводят в 10 раз физиологическим раствором (ФР) и прогревают в водяной бане при 56 °С в течение 30 мин.

При проведении РТГА с вирусами гриппа используют эритроциты кур или человека 0(1) группы крови, с вирусами парагриппа - эритроциты морской свинки.

Предварительно в реакции гемагглютинации (РГА) определяют титр антигена. Для этого вряду лунок планшета, содержащих по 0,1 мл ФР, готовят двукратные разведения антигена (начиная с 1:2 до титра, указанного на этикетке). После этого в каждую лунку вносят дополнительно по 0,1 мл ФР и 0,2 мл 1% суспензии эритроцитов. Для контроля оседания эритроцитов в отсутствие антигена в дополнительном ряду смешивают по 0,2 мл ФР и 0,2 мл эритроцитов. Через 45-60 мин инкубации при полном оседании эритроцитов в контрольном ряду учитывают результаты реакции.

ПЦР ( Полимеразная Цепная Реакция)

Суть этого метода заключается в обнаружении специфического фрагмента ДНК или РНК вируса путём его многократного копирования в искусственных условиях. ПЦР можно проводить только с ДНК, то есть для РНК-вирусов предварительно необходимо произвести реакцию обратной транскрипции.

Непосредственно ПЦР проводят в специальном приборе, под названием амплификатор, или термоциклер, который поддерживает необходимый температурный режим. ПЦР-смесь состоит из добавленной ДНК, которая содержит интересующий нас фрагмент, праймеров (короткий фрагмент нуклеиновой кислоты, комплиментарный ДНК-мишени, служит затравкой для синтеза комплиментарной цепи), ДНК-полимеразы и нуклеотидов.

Стадии цикла ПЦР:

- Деннатурация-первая стадия. Температура повышается до 95 градусов, цепочки ДНК расходятся друг относительно друга.

- Отжиг праймеров. Температуру понижают до 50-60 градусов. Праймеры находят комплиментарный участок цепи и связываются с ним.

- Синтез. Температуру вновь повышают до 72, это рабочая температура для ДНК-полимеразы, которая, отталкиваясь от праймеров, строит дочерние цепи.

Цикл многократно повторяется. Через 40 циклов из одной молекулы ДНК получается 10*12 степени копий копий искомого фрагмента.

Реакция связывания комплемента (РСК) заключается в том, что при соответствии друг другу антигенов и антител они образуют иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), те происходит связывание комплемента комплексом антиген - антитело. Если же комплекс антиген - антитело не образуется, то комплемент остается свободным. PCK проводят в две фазы 1-я фаза - инкубация смеси, содержащей антиген + антитело + комплемент, 2-я фаза (индикаторная) - выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана, и гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. В 1-й фазе реакции при образовании комплекса антиген - антитело происходит связывание им комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет (реакция положительная). Если антиген и антитело не соответствуют друг другу (в исследуемом образце нет антигена или антитела), комплемент остается свободным и во 2-й фазе присоединится к комплексу эритроцит - антиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз (реакция отрицательная).

На чувствительных клетках: полиомиелит вызывает ЦПД

HeLa, культура почек обезъян: Коксаки A,B ECHO, Грипп, Корь,

Культура клеток: вирус гепатита А без ЦПД, Грипп, ОРВИ

Культура клеток (спец среды ВНК-21, Vero, RK-21, SIRC), Краснуха без ЦПД, Корь, Бешенство (Тельца Бабеша)

Куриный эмбрион Грипп, вирус простого герпеса, вирус натур. оспы

Почки собаки: Грипп

Почки человека: Корь

Почки хомячка: бешенство

Фибробласты человека: бешенство, Цитомегалия

Т-лимфоциты: ВИЧ

Культура клеток первичного рака печени: гепатит В

Диплоидные фибробласты: Ветряная оспа

Соседние файлы в предмете Микробиология