1.3 Физико-химические свойства витамина а

Применяют ретинола ацетат и ретинола пальмитат (табл.1). Их синтезируют путём ацилирования ретинола соответственно уксусной или пальмитиновой кислотой. Они очень легко окисляются под действием кислорода воздуха и света. Ретинола ацетат и пальмитат практически нерастворимы в воде, растворимы (ацетат) или умеренно растворимы (пальмитат) в абсолютном этаноле, легко или очень легко растворимы в этаноле и хлороформе.

Таблица 1 – Свойства ретинолов ацетата и пальмитата

№№ п/п	Лекарственное вещество	Химическая структура	Описание
	Retinol Acetate – ретинола ацетат	транс-9,13-диметил-7-(1,1,5-триметилциклогексен-5-ил-6)-нонатетраен-7,9,11,13-ола-15 ацетат	Белые или бледно-желтые кристаллы со слабым запахом. Т. пл. 54–58°C. Чрезвычайно неустойчивы к кислороду воздуха и свету
	Retinol Palmitate –ретинола пальмитат	транс-9,13-диметил-7-(1,1,5-триметилциклогексен-5-ил-6)-нонатетраен-7,9,11,13-ола-15 пальмитат	При комнатной температуре аморфная масса светло-жёлтого цвета без запаха или со слабым запахом. При температуре около 28°C — прозрачная маслянистая жидкость от светло-жёлтого до жёлтого цвета. Неустойчив на воздухе и на свету

1.4 Качественный анализ витамина а

Подлинность ретинола ацетата и пальмитата устанавливают также цветной реакцией с хлоридом сурьмы (III) в хлороформном растворе. Образуется межмолекулярный комплекс, окрашенный в интенсивно-синий цвет с максимумом светопоглощения в области 620 нм. С помощью этой цветной реакции не только идентифицируют, но и определяют количественное содержание ретинолов фотоколориметрическим методом.

1.5 Количественное определение витамина а

В 1937 г. из печени морских рыб был выделен витамин А2. Его биологическая активность составляет 40% активности ви­тамина А. Они имеют близкую молекулярную массу и хими­ческие свойства. Структурная формула витамина А2 отличается от витамина А тем, что в риононовом кольце имеется еще одна двойная связь, поэтому его называют дегидроретинолом.

Методы количественного определения ретинола ацетата основаны либо на реакции его с хлороформным раствором хлорида сурьмы (III) (фотоколориметрический метод), либо на измерении поглощения ультрафиолетовой части спектра спиртовых или хлороформных растворов витамина. ГФ X рекомендует спектрофотометрическое определение ретинола ацетата в спиртовом растворе. В этом случае измеряют оптическую плотность спиртового раствора препарата (приго­товленного из точной навески) на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 326 нм. При этой длине волны выполняют количественное определение. Раствором сравнения служит изопропиловый спирт. Расчёт содержания проводят по удельному показателю поглощения, который у ретинола ацетата равен 1530, а у ретинола пальмитата 956. Активность 1 мг ретинола ацетата соответствует 2907 МЕ, а 1 мг ретинола пальмитата — 1817 МЕ. Те же растворы ретинолов используют для спектрофотометрического определения поглощающих примесей. Измеряют их оптические плотности при 300, 310, 320, 326, 330, 340 и 350 нм, а затем каждую делят на величину оптической плотности при 326 нм. Полученные отношения не должны отличаться более, чем на ±0,03 от значений, приведённых в ФС. Используя сочетание метода ТСХ на пластинках Силуфол и УФ-спектрофотометрии, определяют наличие в ретинола пальмитате примеси ретинола (не более 3%). Измерение оптической плотности элюата, содержащего ретинол, выполняют при длине волны 326 нм.

Спектрофотометрическое количественное определение ретинола выполняют также в хлороформном растворе с использованием в качестве реактива 50%-ного раствора хлорной кислоты (при 543 нм). Спектрофотометрическое определение можно выполнять после превращения ретинола в ангидровитамин А (для дегидрирования используют n-толуолсульфокислоту).