3. Встановлення чистоти і морфологічних властивостей бактерій, переважаючих в досліджуваному об'єкті.

Морфологічна характеристика бактерій включає форму клітин, їх поєднання і розмір, рухливість, спороутворення. Вивчення морфологічних властивостей проводять, використовуючи методи мікроскопії. Для цього готують препарати живих і фіксованих забарвлених клітин.

Фіксований забарвлений препарат готують за способом «простого забарвлення». На готовий забарвлений препарат наносять краплю імерсійного масла і микроскопують з імерсійним об'єктивом.

У правильно забарвленому і добре промитому препараті поле зору залишається абсолютно світлим і чистим, а забарвленими виявляються тільки клітини мікроорганізмів. При мікроскопуванні забарвлених препаратів спори бактерій не фарбуються. Бактерії слід замалювати. Переконатися в чистоті культури. Про чистоту культури судять за однорідністю клітин. При мікроскопуванні різних ділянок препарату необхідно порівняти клітини бактерій. Схожість форми і розміру клітин і спор (при їх наявності) служить доказом чистоти культури.

4. Виділення чистої культури бактерій, переважаючих в досліджуваному об'єкті

Основним методом виділення чистих культур мікроорганізмів є метод, запропонований Кохом. Принцип методу полягає в отриманні чистої культури з окремої колонії, яку вважають за результат розвитку однієї клітини.

Щоб виділити чисту культуру з досліджуваного об'єкту, необхідно з описаних колоній вибрати одну, зростаючу найбільш ізольовано і переважаючу в посіві. Потім за допомогою стерильної бактеріологічної петлі взяти невелику кількість бактерійної маси з вибраної колонії, злегка до неї торкаючись. Необхідно уважно стежити, щоб не зачепити голкою сусідні колонії. Петлю з бактеріями ввести в пробірку з «косим» м’ясопептоновим агаром, торкнутися поверхні в його нижній частині та провести петлю вгору, ковзаючи по поверхні агару у вигляді штриха. При посіві необхідно дотримуватись правил асептики. Пробірку підписують і інкубують.

► ХІД РОБОТИ: ◄

1. Підрахувати колонії, що виросли на поживному середовищі в чашках Петрі.

2. Визначити мікробне число для досліджуваного об’єкта за відповідними формулами.

3. Вивчити культуральні властивості колоній, що виросли на МПА.

4. Вивчит морфологічні властивості бактерій, переважаючих у досліджуваному об'єкті, шляхом мікроскопування фіксованих препаратів. Зробити відповідні рисунки у лабораторному журналі.

5. Виділити чисту культуру бактерій, переважаючих в досліджуваному об'єкті.

Контрольні питання:

1. Існуючі методи обліку мікроорганізмів.

2. Мікробне число.

3. Які організми відносять до санітарно-показових?

4. Поняття «колі-титр», «колі-індекс».

5. Підрахунок мікроорганізмів за допомогою рахункових камер.

6. Підрахунок мікроорганізмів за допомогою мембранних фільтрів.

7. Відбір проби при дослідженні забруднення мікроорганізмами поверхні об'єкту.

8. Відбір проби при дослідженні мікробного забруднення рук.

9. Визначення кількості мікроорганізмів у повітрі.

10. Кількісний облік мікроорганізмів у продуктах харчування.

11. Суть методу підрахунку колоній мікроорганізмів.

12. Середовища, які використовують для кількісного обліку мікроорганізмів.

13. Переваги і недоліки методу підрахунку колоній.

РЕКОМЕНДОВАНА ЛІТЕРАТУРА:

1. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / Под ред. Н.С. Егорова – М.: Изд-во МГУ, 1995. – 224 с.

2. Практикум по микробиологии / Е.З. Теппер, В.К. Шильникова, Г.И. Переверзева – М.: Дрофа, 2004. – 256 с.

і

70