- •Работа № 1. Микрофлора зубного налета Цель: изучить микрофлору зубного налета.
- •Памятка: " Правила забора материала на бактериологические методы исследований"
- •Способы забора материала для исследования микрофлоры полости рта
- •Исследование зубной бляшки
- •Методика дисперсии материала бляшки
- •Микроскопический подсчет, подсчет выживаемости микробов при культивировании
- •Исследование десневого кармана
- •При абсцессах, флегмонах и фасциитах
- •Характеристика микрофлоры ротовой полости
Исследование зубной бляшки
Состав зубной бляшки изучается с помощью бактериоскопического и бактериологического методов.
Перед снятием зубного налета проводят тщательную гигиеническую обработку полости рта, используя механические методы и контролируя определением индекса гигиены. С этой целью пользуются специальными красящими растворами, определяя зону зубного налета.
Бляшка (щечная, язычная, наддесневая) может быть снята путем соскабливания экскаватором, скейлером. Бляшку из ямок, фиссур можно получить острым зондом или заостренной ортодонтической проволокой. Для изучения начальной стадии колонизации микробов на эмали материал берут маленькими стерильными ватными тампонами.
Методика дисперсии материала бляшки
Конгломераты бляшки разбивают путем встряхивания со стеклянными бусами в гомогенизаторе, обработкой материала в ультразвуковых дезинтергаторах (не более 10 секунд, т.к. ультразвук может вызвать гибель некоторых бактерий).
Микроскопический подсчет, подсчет выживаемости микробов при культивировании
Прямой микроскопический подсчет микробов можно осуществлять в камере Горяева.
Подсчет жизнеспособных клеток из взятого образца проводят методом серийных разведений в стерильном NaCl (1:10, 1:20 и т.д.). Из каждого разведения определенный объем засевают на поверхность плотной среды. После инкубации подсчитывают количество КОЕ (колониеобразующих единиц) и пересчитывают количество их на исходный объем.
Исследование десневого кармана
Забор материала проводят на стерильные целлулоидные узкие пластинки, которые осторожно вводят в карман и прижимают к поверхности корня со стороны десны. С внутренней стороны пластинки прилипают микробы с корневой части зуба, с наружной - свободно находящиеся в десневой жидкости микробы.
Материал можно также брать с помощью стерильной кюретажной ложечки или проволокой с ложбинкой. С удаленных зубов делают соскобы или готовят гистологические срезы.
Для бактериологического исследования материал сразу после забора должен быть помещен в транспортную питательную среду с целью сохранения жизнеспособности микробов.
Исследование ротовой жидкости
Материал берут у больных утром (в 9-11 часов) через 2 часа после приема пищи, собирая ее в течение 10 минут в стерильные пробирки (нестимулированная слюна).
Стимулированную слюну получают после нанесения на спинку языка 1-2 капель стерильного 2% раствора лимонной кислоты или жевания 5 г парафина в течение 30 секунд.
Исследование кариозной полости
В первую очередь из кариозной полости стерильным бором убирают поверхностные слои размягченного дентина. Не допуская попадания в исследуемый материал слюны, другим стерильным бором обрабатывают полость и помещают дентин в транспортную среду.
Исследование корневых каналов
Материал берут корневыми иглами, на которых находятся стерильные ватные турунды. Предварительно на 4-5 корневых игл накручивают тонкие ватные турунды, упаковывают их в бумажные пакетики и стерилизуют в автоклаве.
Исследование десневой жидкости
Из десневого желобка, патологического десневого кармана материал берут маленькой стерильной кюретажной ложечкой, скейлером. Десневую жидкость можно собирать стерильной микропипеткой, стерильными фильтровальными полосками, стерильными нитками.
Исследование соскобов со слизистой оболочки
Соскоб со слизистой оболочки спинки языка делают стерильным шпателем, гладилкой. Перед взятием материала из эрозий, язв необходимо удалить поверхностный налет сухим или смоченным изотоническим раствором тампоном, не применяя антисептических препаратов.
В некоторых случаях делают мазки-отпечатки со слизистой оболочки или из элементов поражения. Для этого сухое обезжиренное стекло с зашлифованными краями прикладывают несколько раз к исследуемому участку.
