2. Элективные и дифференциально-диагностические питательные среды
отличительной чертой является получение роста только того из микроорганизмов, который на данный момент представляет интерес для исследования.
К элективным средам относят:
пептонную воду; (для исследования холерного вибриона)
щелочной агар; (для исследования холерного вибриона)
среду Мюллера; (для исследования сальмонелл)
среду Леффлера; (для исследования коринебактерий дифтерии)
желточно-солевой агар; ( для исследования стафилококка)
селенитовую среду. (для исследования сальмонелл)
При помощи дифференциально-диагностических питательных сред проводится максимально точная идентификация отдельно взятых категорий, групп и типов бактерий.
Выделяют два основных типа ДДПС:
среда Сабуро, для которой характерно добавление антибиотика;
среды Гисса, известные под названием «пестрый ряд».
Способы и техники посева
Принято различать несколько техник и методов посева.
В основном данный процесс осуществляется при помощи специальных микробиологических петель.
При посеве на специальные чашки Петри применяются особые иглы или шпатели, изготовленные из стекла или металла.
Для жидких материалов применяют специальную петлю в сочетании с пипетками – пастеровскими или градуированными.
Чашка Петри предназначена специально для осуществления посева на плотные питательные среды. Изобретен в 1877 году знаменитым немецким бактериологом Юлиусом Ризардом Петри, который являлся ассистентом микробиолога Роберта Коха.
Для изготовления чашки Петри, как правило, используют стекло либо полистирол с прозрачной текстурой.
Самый широко используемый размер чашки Петри – высота до 15 миллиметров и диаметр от 50 до 100 миллиметров.
Немного приоткрывают крышку чашки Петри, а затем наносят на поверхность плотной питательной среды – агара – требуемое количество посевного материала.
После того как произойдет инкубация бакпосева, бактерии начнут расти густо и равномерно, превращаясь в полноценную культуру и подразделяясь на отдельные колонии.
В данном процессе можно использоваться как стеклянные, так и пластмассовые чашки Петри. Стеклянные предназначается для многоразового, пластиковые – для одноразового применения. Пластиковые чашки Петри являются стерильными, а поставляют их в специальных надежных герметических упаковках. Стеклянные сосуды, в свою очередь, требуют тщательной стерилизации перед осуществлением каждого нового посева.
Если при бакпосеве на плотные среды применяются чашки Петри, то в случае с жидкими средами можно использовать пробирки.
Бактериальный посев позволяет быстро вырастить культуру бактерий с определенными свойствами и характеристиками.
Методы обнаружения и идентификации микроорганизмов
Методы микробиологического исследования
1.Микроскопический (бактериоскопический) метод - используют для изучения окрашенных мазков и мазков из нативного материала при помощи различных микроскопов. Метод позволяет характеризовать морфологию возбудителя, его отношнение к красителям, подвижность бактерий и простейших.
2.Микробиологический (культуральный) метод – применяют для установления этиологии заболевания, при этом выделяют и изучают чистую культуру возбудителя.
3.Серологический метод - позволяет выявить в сыворотке крови антитела.
4.Биологический (экспериментальный) метод - основан на введение подопытным животным чистой культуры микроорганизмов, их токсинов (ядов, выделяемых микроорганизмами), или исследуемого материала с целью получения характерных для данной инфекции изменений.
5.Аллергологический метод - заключается в постановке кожных аллергологических проб с соответствующими аллергенами. При этом методе выявляется инфекционная аллергия на диагностический микробный препарат (аллерген).
6.Вирусоскопический метод - состоит в обнаружении вируса в исследуемом материале под электронным микроскопом
Культивирование вируса осуществляется только на уровне подопытного животного или живой клетки, выращиваемой вне организма.
Культивирование вируса в развивающихся эмбрионах имеет ряд преимуществ – скорлупа надежно защищает от микроорганизмов, метод прост и доступен для любых вирусологических лабораторий.