Главные принципы и особенности посева бактерий
Посев различных бактерий представляет собой один из наиболее эффективных и широко распространенных способов, который в настоящее время активно применяется в сфере медицинской микробиологии.
Также данный метод незаменим в области биотехнологии, где он играет важную роль в изучении различных свойств как биологического, так и биохимического характера.
Под данным методом подразумевается процесс культивирования микроскопических организмов с использованием питательных сред, различающихся между собой по характеристикам и свойствам.
Бактериологические посевы могут проводиться с целью тщательного исследования отделяемых клеток глаз, половых органов человека, а также с целью максимально точного анализа крови, мочи или кала, бактериальные посевы спермы и мокроты для исследования. Довольно часто проводится посев на анаэробные бактерии.
Питательные среды для микроорганизмов
При выборе среды для осуществления посева в первую очередь следует ориентироваться на характер содержания, присущего бактериям, которые являются главным объектом исследования.
Питательные среды должны
содержать все макро и микроэлементы.
иметь достаточную влажность - не менее 20 % воды.
концентрация солей должна соответствовать концентрации солей в микробной клетке.
концентрация водородных ионов (ph среды) должна быть оптимальной – 4,5 – 8,5
окислительно - восстановительный потенциал (Еh) среды должен соответствовать потребностям микроорганизма – для анаэробов – 0,120-0,060 В; для аэробов – более 0 080 В.
питательная среда должна быть стерильной.
Для приготовления питательных сред используют мясо, рыбную муку, молоко, яйца, кровь картофель, дрожжи, сухие консервированные порошки.
Стерилизуют при темп. 120 гр. С.
Готовые стерильные среды подвергают контролю на стерильность путем выдерживания в термостате при температуре 37 гр. в течение 1 – 3 суток.
В том случае, если необходимо получить изолированные колонии бактерий, а также определить чистую культуру, следует выполнять посев на плотные питательные среды.
Но если материал, подверженный исследованию, содержит в себе не очень большое количество микроорганизмов, можно в этих целях использовать жидкую питательную среду.
Существует несколько разновидностей питательных сред, в которых осуществляется бактериальный посев.
Различают:
Простые и специальные среды,
Элективные и дифференциально-диагностические.
Каждая категория питательных сред отличается своими индивидуальными особенностями и характеристиками.
Простые и специальные питательные среды бывают
плотными,
жидкими.
Плотные - это мясопептонный агар,
Жидкие - мясопептонный бульон.
Главной особенностью специальных сред является абсолютная замена основы либо смешивание ее с другим компонентом, обладающим специфическими свойствами и характеристиками.
В результате такого процесса можно выделить следующие виды питательных сред:
агар на основе сыворотки;
агар на основе казеина и активированного угля;
яичная среда, открытая бактериологами Леванштейном и Йенсеном;
бульон на основе агара и стерильной дефибринированной крови кролика, лошади или барана.