- •Раздел 1. Цитология
- •Тема1. Ведение в курс гистологии, цитологией и эмбриологией. Гистологическая техника.Приготовление гистологического препарата. Микроскопы и их разновидности.
- •1.Формальдегид (формалин)
- •2. Этиловый спирт
- •3.Ацетон.
- •Для парафиновых срезов — предназначенный для получения серийных срезов материала, залитого в парафин;
- •Замораживающий — микротом, имеющий специальное устройство для замораживания объекта, позволяющее резать нефиксированный, свежий материал.
- •1.Взятие и фиксация материала
- •3. Уплотнение (заливка в парафин)
- •4. Приготовление срезов
- •6.Заключение срезов в консервирующую среду
- •Тема 2. Уровни структурно-функциональной организации живого. Цитология I.Структурные компоненты мембранные органелы.
- •Раздел 2. Общая эмбриология
- •Тема 4. Половые клетки, оплодотворение, дробление
- •2. Полное неравномерное (амфибии).
- •3.Непольные дискоидальное
- •4.Полное неравномерное асинхронное
- •Тема 5. Гаструляция, образование осевых зачатков органов и зародышевых оболочек
- •20. Где происходит оплодотворение яйцеклетки: а. В теле матки.Б. В полости матки.
- •Раздел 3. Гистология 1.
- •Тема 6. Эпителиальные ткани
- •Тема 7. Кровь и лимфа
- •Тема8. Органы кроветворения и иммуногенеза
- •Тема 9. Собственно соединительные ткани
- •Тема 9. Скелетные ткани
- •1.Перихондральное окостенение
- •2. Эндохондральное окостенение
- •Тема 10. Мышечные ткани
- •Тема 11. Нервная ткань
- •Межнейрональные синапсы:
- •Эффекторные окончания:
- •III. Чуствительные нервные окончания (рецепторы):
- •1 Тело нейрона
- •2 Дендрит
- •3 Аксон
- •Тема 12. Органы чувств
1.Формальдегид (формалин)
Формалин является самым дешевым и распространенным фиксатором. В чистом виде представляет, светлую, сильно пахнущую жидкость, состоящую из 40% водного раствора формальдегида. Применяют преимущественно в виде 10% водного раствора, для чего часть формалина (т. е. 40% раствора формальдегида) разводят 9 частями воды. Приготавливают раствор
обязательно на водопроводной воде, так как дистиллированная вызывает набухание тканей.
Широкое применение формалин получил благодаря ряду свойств: а) высокой степени диффузии;
б) способности хорошо сохранять форму, окраску и структуру исследуемого объекта; в) оказывать длительное фиксирующее действие (до нескольких лет),
существенно не ухудшая при этом качество материала; г) хорошо сохранять жиры и липоиды.
Высокая диффузионная способность и незначительное осаждающее действие позволяют формалину довольно быстро и глубоко проникать в ткани, что позволяет фиксировать кусочки органа размером от 1 см и более, а при необходимости и довольно крупные органы целиком.
Срок фиксации тканей в формалине 24—48ч. Обычный формалин, как правило, содержит примесь метилового спирта и муравьиной кислоты, количество которой увеличивается под влиянием света.
При охлаждении формалина в растворе появляется муть, оседающая в виде белого осадка (параформальдегид). Такой же осадок наблюдается на стенках сосуда и при испарении формалина. Поэтому формалин следует хранить в темной плотно закрывающейся стеклянной посуде при температуре не ниже 9°С.
Нейтрализация формалина. Примесь в формалине муравьиной кислоты придает раствору слабокислый характер, что нежелательно при применении ряда методов исследования (некоторые гистохимические реакции, серебрение раствором нитрата серебра). Способ нейтрализации формалина довольно
прост: в сосуд засыпают карбонат кальция (или карбонат магния) в
таком количестве, чтобы на дне образовался слой толщиной 1,5—2 см. Затем наливают формалин, несколько раз энергично встряхивают и оставляют стоять 24—48 ч. В течение этого времени происходит нейтрализация раствора.
Побочные действия формалина. Длительное хранение препаратов в
концентрированном растворе формалина придает тканям чрезмерную плотность, затрудняющую дальнейшую обработку и ухудшающую качество препарата. Устранить этот недостаток можно путем помещения материала на 2 недели в 1% раствор нитрата серебра или 10% раствор лимонной кислоты. Длительное хранение в 10% растворе формалина приводит также к набуханию объекта, что необходимо помнить при его измерении после фиксации. При фиксации формалином в препаратах нередко появляется темно-коричневый кристаллический осадок — результат взаимодействия формалина с находящимся в тканях гемоглобином. Его удаляют путем помещения неокрашенных срезов в 1—5% раствор аммиака или 70% этиловый алкоголь на различные сроки (от 5 мин до 4 ч). Затем препарат тщательно промывают и ведут дальнейшую обработку.
Следует постоянно помнить, что длительное действие паров формалина сильно раздражает слизистые оболочки. Смачивание кожи формалином оказывает дубящий эффект, а при повторных частых контактах вызывает сухую экзему. Поэтому перед препарированием формалиновые препараты помещают в слабо аммиачную воду (для устранения запаха) и работают в резиновых перчатках (при возможности под вытяжным устройством).
