МЕЖДУНАРОДНЫЙ	HOCA AHMET YESEVI
КАЗАХСКО-ТУРЕЦКИЙ	ULUSLARARASI KAZAK-TURK
УНИВЕРСИТЕТ	UNIVERSITESI
ИМЕНИ Х.А.ЯСАВИ

С.Н. ЖУМАШОВ

Туркестан 2016

УДК 611-018(075)

ББК 28.86+74.58я73

Ж-88

Жумашов Сайдулла Нурахович – доктор медицинских наук; профессор

Рецензенты:

Сисабеков К.Е- доктор медицинских наук, зав. кафедрой морфологической дисциплины Южно- Казахстанской Государственной Фармацевтической Академии

Темирбеков А.Н-доцент кафедры патологии человека Международного Казахско-Турецкого Университета имени Х. А. Яссави

ISBN 9965-732-79-5

Настоящий учебник облегчает понятие гистологического строения органов. Учебник написан в соответствии с типовой программой по гистологии, утвержденном Министерством Здравоохранения РК.

Учебник ориентирован на эффективное освоение курса гистологии, цитологии и эмбриологии и предназначен для студентов медицинских ВУЗов, интернов, клинических ординаторов, аспирантов и врачей различных специальностей. Учебник также может быть полезен и студентам зооветеринарных ВУЗов, биологических факультетов университетов и специалистов смежных специальностей.

Автор выражает благодарность, в подготовке данного учебного пособия научным редакторам и профессору И.А.Ишигову, которые внесли ценные предложения по переработке учебника и вместе с титульными редакторами активно готовили учебник к изданию, также глубоко признателен сотрудникам кафедры морфологии и физиологии человека Международного Казахского-Турецкого Университета им Х.А.Ясави.

ISBN 9965-732-79-5

Все права автора защищены. Ни одна часть этого издания не может быть занесена в память компьютера либо воспроизведена любым способом без предварительного письменного разрешения автора.

Обсуждено и согласовано учебно-методическим советом МКТУ. Протокол №8 от «28» апреля 2016 г.

Утверждено и рекомендовано советом Сената МКТУ. Протокол № 5 от «29» апреля 2016 г.

Жумашов С.Н. ©

СОДЕРЖАНИЕ
РАЗДЕЛ 1. Цитология I
ТЕМА 1. Ведение в курс гистологии с цитологией и эмбриологией.
Гистологическая техника, приготовление гистологического преперата.
Строение микроскопа и их разновидности.		4
ТЕМА 2.Структурно-функциональной организации живого.Цитология -1.
Структурные компоненты мембранные органеллы.........................................	.	9
Тема 3.Цитология -2. Структурно-функциональные компоненты немебраные
органеллы.Ядро и ядерная оболочка		10
РАЗДЕЛ 2. Общая эмбриология
ТЕМА 4. Половые клетки, оплодотворение, дробление...................................		28
ТЕМА 5. Гаструляция, образование осевых зачатков органов.
и зародышевых оболочек.Провизорные органы	……	34
РАЗДЕЛ 3. Общая гистология
ТЕМА 6. Эпителиальные ткани.....................................................................
ТЕМА 7. Кровь и лимфа......................................................................................		48
ТЕМА 8. Органы кроветворения.......................................................................		59
ТЕМА 9. Собственно соединительные ткани	....... .	75
ТЕМА10. Склетные ткани…...........................................................................		85
ТЕМА 11. Мышечные ткани.............................................................................	.	96
ТЕМА 12. Нервная ткань.................................................................................	.	115
ТЕМА 13. Органы чувств.................................................................................		126

Раздел 1. Цитология

Тема1. Ведение в курс гистологии, цитологией и эмбриологией. Гистологическая техника.Приготовление гистологического препарата. Микроскопы и их разновидности.

Гистология - наука о строении, развитии и жизнедеятельности тканей животных организмов.

Гистология вместе с другими фундаментальными медико-биологическими науками изучает закономерности структурной организации живой матери. В отличие от других биологических наук основным предметом гистологии являются именно ткани, представляющие собой систему следующей за клеточным уровнем организации живой матери в целостном организме. Тканям присущи общие биологические закономерности, свойственные живой материи и вместе с тем собственные особенности строения, развития, жизнедеятельности, внутритканевые (внутри уровневые) и межтканевые (межуровневые) связи. Ткани служат элементами развития, строения и жизнедеятельности органов и их морфофункциональных единиц.

Ткани представляют собой систему клеток и неклеточных структур, объединившихся и специализировавшихся в процессе эволюции для выполнения важнейших функции в организме. Для каждой из 5 основных тканевых систем (нервной, мышечной, эпителиальной, соединительной ткани и крови) характерны присущие особенности строения, развития и жизнедеятельности.

Предметом общей гистологии, или собственно учение о тканях, являются общие закономерности, характерные для тканевого уровня организации и отличительные особенности конкретных тканей: предметом частной гистологии является закономерности строения, жизнедеятельности и взаимодействия различных тканей в органах на более высших уровнях организации. Частная гистология служит основой для изучения микроскопического строения морфофункциональных единиц органов в целом. Курс гистологии включает в себя также цитологию - учение о клетке и эмбриологию - учение о зародыше. Эти самостоятельные в какой-то степени курсы предшествуют общей и частной гистологии.

Цитология - наука о клетке. Она включает рассмотрение вопросов о строении и функциях клеток и их производных, их воспроизведении и взаимодействиях.

Цитология составляет необходимую часть гистологии, так как клетки являются основой развития, строения и функции тканей. В разделе общей цитологии рассматриваются общие принципы строения и физиологии клеточных структур.

Цитология в последние годы обогатилась многими научными открытиями.

Новые данные о структуре ядра, его хромосомного аппарата легли в основу цитодиагностики наследственных заболеваний, опухолей, болезней крови и многих других болезней. Раскрытие особенности ультраструктуры и

химического состава клеточных мембран является основой для понимания закономерностей взаимодействия клеток в тканевых системах защитных реакциях и др.

В медицинской практике широко используется цитодиагностика. Клетка здорового и больного организма изучаются в мозге, в крови и костном мозге, цереброспинальной жидкости, слюны, мочи в образцах различных органах, взятых при биопсии.

Эмбриология-(от-греч.-зародыш)-учение о зародыше, закономерностях его развития, строения и функции. В курсе эмбриологии, преподаваемом в медицинском вузе, основные внимания

обращаются	назакономерностиэмбриональногоразвитиячеловека.
Знакомство	будущего врача	с особенностями	эмбриогенеза человека
имеет большое значение для		формирования его	научного мировоззрения

• для практической деятельности. Сравнительная эмбриология дает

богатый фактический материал для понимания развития человека. Особое значение в курсе эмбриологии придается источникам развития и механизмам образования тканей (гистогенез) на определенном этапе эмбриогенеза. Закономерности гистогенеза определяют морфофункциональные особенности тканевых структур в постнатальном онтогенезе в частности их способности к регенерации. Поэтому изучение основных этапов эмбрионального развития предшествует изучению тканей. Таким образом, объединение гистологии, цитологии и эмбриологии в один предмет не формально, а отражает внутренние естественные связи между ними.

Курс гистологии с цитологией и эмбриологией тесно связан с преподаванием других медико-биологических наук: биологии, анатомии, физиологии, биохимии, патологической анатомии, а также клинических дисциплин. Так, раскрытие основных закономерностей структурной организации клеток является основой для изложения вопросов генетики в курс биологии. Изучение закономерностей развития и строения органов в курсе анатомии базируется на данных гистологического анализа. В настоящее время, когда исследования клеточных и тканевых структур ведутся на субклеточном и молекулярном уровнях с применением биохимических методов, отмечается особенно тесная связь гистологии, цитологии и эмбриологии с биохимией и молекулярной биологией. В преподавании научных исследований и клинической диагностике широкое применение нашли цито- и гистохимические данные. Значение нормальной структуры клеток, тканей и органов является необходимым условием для понимания механизмов изменений в них в патологических условиях.

Поэтому гистология с цитологией и эмбриологией тесно связана с патологической анатомией и многими клиническими дисциплинами (внутренние болезни, акушерство и гинекология и др.)

Таким образом, гистология с цитологией и эмбриологией занимает важное место в системе медицинского образования. Закладывая основы научного структурно-функционального подхода в анализе жизнедеятельности организма человека в норме и при патологии.

Методы исследования в гистологии, цитологии и эмбриологии. Для процесса гистологии, цитологии и эмбриологии большое значение имеет-внедрение достижения физики и химии, новых методов сложных наук-биохимии, молекулярной биологии, генной инженерии.

Современные методы исследования позволяют изучать ткани не только как единое целое, но и выделять из них отдельные типы клеток для изучения их жизнедеятельности в течение длительного времени, выделяемые отдельные клеточные органеллы и составляющие их макромолекулы (например ДНК), исследовать их функциональные особенности. Также возможности открылись в связи с созданием новых приборов и технологии различных типов микроскопов, компьютерной техники, рентгеноструктурного анализа, применения метода ядерно-магнитного резонанса (ЯМР), радиоактивных изотипов и авто - радиографии,электрофореза и хромоцитографии, фракционизирования клеточного содержимого с помощью ультрацентрифугирования, разделения и культивирования клеток, получение гибридом и моноклональными антителами, рекомбинантными ДНК и др.

Таким образом, биологические объекты можно изучить на тканевом, клеточном, субклеточном и молекулярном уровнях.

Объектами исследования служат живые и фиксированные клетки и ткани, их изображения, полученные в свойствах и электронных микроскопах или на телевизионном экране дисплея.

• Световая микроскопия.

• Ультрафиолетовая микроскопия.

• Флюоресцентная (люминесцентная) микроскопия.

• Фазово-контрастная микроскопия.

• Микроскопия в темном поле.

• Интерференционная микроскопия.

• Поляризационная микроскопия.

ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА Рабочий стол.

При отсутствии специального стола с успехом может быть приспособлен любой стол (желательно с ящиками) с площадью рабочей поверхности не менее 60*120 см.

Если крышка стола не имеет специального покрытия, то его следует сделать из какого либо влагоустойчивого материала. Однако участок стола, предназначенный для непосредственной работы по приготовлению препаратов, в любом случае необходимо накрыть стеклом и расположить под ним небольшие (9*12см) листы белой или черной бумаги. Этим создается соответствующий фон, облегчающий работу с окрашенными (белый лист) и не окрашенными (черный лист) объектами. Рекомендуется также на оба листа нанести контуры предметного стекла с обозначением места расположения и размеров покровного стекла. Это простой прием позволяет рационально разместить на предметном стекле срезы в процессе из заключения.

Для того, чтобы удобнее расположить необходимое оборудование, следует иметь двухъярусную полку для реактивов, растворов и посуды, которая устанавливается либо перед работающим (вдоль заднего края стола), либо сбоку в зависимости от расположения стола относительно источника света.

ЛАБОРАТОРНАЯ ПОСУДА

В настоящем разделе дается описание лишь самых необходимых образцов.

ШИРОКОГОРЛЫЕ БАНКИ С ПРИТЕРТЫМИ ПРОБКАМИ различной вместимости от 50 до 200 мл–используют для составления гистологических батарей, предназначенных для подготовки кусочков тканей к заливке различными средами. Более крупные банки применяют для фиксации и хранения кусочков тканей в фиксирующих жидкостях, обработки предметных стекол, приготовления нейтрального формалина и пр.

Вместо банок с притертыми пробками можно использовать небольшие хозяйственные банки с жестяными завинчивающимися крышками разного объема.

БЮКСЫ—небольшие круглые стеклянные стаканчики различного диаметра и высоты с шлифованными крышками

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СТАКАНЧИКИ-круглые,овальные или четырехугольные(как и высокие бюксы) применяют для проводки гистологических срезов, монтированных на предметных стеклах. Для придания устойчивости и обеспечения порядка в расстановке их помещают в специальные стойки, изготовленные из дерева или пластмассы, по несколько штук в ряд в зависимости от методики обработки.

ЧАШКИ ПЕТРИ-широкие, плоские стеклянные чашки с крышками– пригодны для различных манипуляций ( окраска свободно плавающих и наклеенных на предметные стекла срезов, использование в качестве подставок под бюксы и т.д.).

МЕРНАЯ ПОСУДА– цилиндры и мензурки различной емкости (от 10 до 250-500 мл) воронки различных размеров.

ХИМИЧЕСКИЕ СТАКАНЧИКИ—круглые стеклянные стаканчики без

крышек вместимостью 50-100 мл– находят широкое применение при проведение гистохимических реакций, окраски срезов наклеенных на стекла и т.д.

КОЛБЫ (плоскодонные) вместимостью от 50 мл до 2 л. Малые колбы применяют для приготовления и хранения растворов различных красителей, большие—под дистиллированную воду и прочие жидкости, расходуемые в больших количествах.

ПИПЕТКИ обычные (предназначенные для закапывания лекарств) используют для накапывания на срезы красителей и различных жидкостей, градуированные (вместимостью 0,1-100 мл) применяют для отмеривания малых количеств различных жидкостей. Можно использовать в настоящее время широко используемые автоматические пипетки различной вместительности.

ПРЕДМЕТНЫЕ СТЕКЛА - прямоугольные пластины размером 76*25 мм толщиной 1 мм предназначенные для размещения гистологических срезов в процессе приготовления постоянных препаратов.

ПОКРОВНЫЕ СТЕКЛА представляют собой тонкие (0,15-0,2 мм толщины) пластинки различных размеров. Служат для покрытия обработанных срезов, расположенных на предметных стеклах. Размеры покровных стекол выбирают в зависимости от площади объекта.

ИНСТРУМЕНТЫ

Инструменты, используемые в гистологической лаборатории, включает пинцеты, скальпели, кровоостанавливающие зажимы, корнцанг, шпатели, препаровальные иглы– прямые и изогнутые, металлические и стеклянные. Стеклянные иглы необходимы при импрегнации серебром, когда металлические иглами пользоваться нельзя,

Так же необходимо иметь спиртовку, волосяную кисточку для снятия срезов с микротомного ножа, фильтровальную бумагу, иголки, нитки, плотную бумагу для этикетирования материала, лейкопластырь и карандаш по стеклу.

ТЕХНИКА ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

Взятие материала, его фиксация и уплотнение.

Умерщвление экспериментальных животных

В лабораторной практике применяют ряд методов умерщвления экспериментальных животных: отсечение головы (декапитация), умерщвление при помощи наркоза, пропускание электрического тока через тело животного, введение в кровеносное русло воздуха (укол в сердце или внутривенно) или в плевральную полость эфира(хлороформа)

Выбор метода диктуется видом животного и целями исследованиями, но наибольшее распространение в лабораторной практике получили два первых способа умерщвления.

Отсечение головы (декапитация) является основным способом умерщвления мелких лабораторных животных (лягушки, мыши, крысы) и осуществляется с помощью ножниц.

Взятие материала.

Материалом для гистологического исследования могут служить кусочки органов экспериментальных животных. Полученный путем прижизненного иссечения у человека кусочков тканей( биопсия), трупный материал, мазки жидких исследуемых материалов (крови, костного мозга).

После умерщвления тело животного быстро фиксируют в положении на спине. Лягушек, тритонов, мышей и других мелких лабораторных животных фиксируют на дощечках, восковых или пробковых пластинках, прикалывая за растянутые в стороны лапки. Для фиксации средних и крупных лабораторных животных используют специальные станки или же изготовленные для этих целей доски (оцинкованные или окрашенные с вбитыми по краям крючками или гвоздиками для привязывания конечностей)

Техника вскрытия брюшной и грудной полостей для всех лабораторных животных одинакова. Однако у животных имеющих шерстный покров, вначале следует иссечь достаточно широкий кожный лоскут, чтобы избежать загрязнение внутренних органов. Для этого, захватив и приподняв ( с помощью хирургического пинцета) кожу нижней части стенки живота по средней линии, подрезают ножницами образовавшуюся складку по направлению к голове, срезая кожный лоскут на нужном протяжении.

Затем следует сменить ножницы (или очистить их от прилипшей шерсти) и удалить влажным тампоном шерсть, попавшую на образовавшуюся «дорожку».

ВСКРЫТИЕ БРЮШНОЙ ПОЛОСТИ.

Нижнюю часть стенки живота приподнимают пинцетом по средней линии ( что бы не повредить органы), прорезают ножницами вход в брюшную полость, ввода туда одну из браншей( но обязательно тупую) и разрезают стенку кверху до грудины. Затем берут кровоостанавливающие зажимы, захватывают ими внутренние слои стенки живота вместе с брюшной и отворачивают кнаружи, раскрывая брюшную полость.

ВСКРЫТИЕ ГРУДНОЙ ПОЛОСТИ

Вскрытие производиться двумя разрезами через реберные хрящи по обе стороны от грудины снизу вверх. Образовавшийся костно-хрящевой лоскут удаляют.

У мелких лабораторных животных следует вскрыть одномоментно брюшную и грудную полости для обеспечения достаточно свободного доступа к внутренним органам, у крупных же вскрывать только ту полость, откуда необходимо брать органы для исследования.

ВЗЯТИЕ МАТЕРИАЛА

Главным требованием при взятии материала являются: максимальное сокращение сроков взятия, минимальное травмирование тканей, создание оптимальных условий для фиксации.

Первое и второе требование обеспечивается хорошим освоением техники умерщвления и вскрытия, а также применением очень острых режущих инструментов (скальпель, бритва, ножницы).

При иссечении материала необходимо максимально бережно обращаться с тканями: участки органов, подвергшихся травмированию (например, при зажиме пинцетом) не следует оставлять для исследования.

Благоприятные условия для фиксации создаются правильным выбором размера фиксируемого материала, ибо необходимо обеспечить равномерное и сравнительно быстрое проникновение фиксирующей жидкости во всю его толщину. Поэтому нужно вырезать кусочки толщиной не более 5-10 мм. Поперечные же и продольные размеры не имеют столь важного значение и определяются задачами исследования.

Вырезание кусочков для фиксации является одним из ответственных этапов в приготовлении качественных микропрепаратов и исследовательской практике и, как правило, должно производиться самим исследователем.

Если орган состоит из участков, различных по своему строению, необходимо проводить разрез таким образом, что бы все они попали в кусочек, а при не возможности - брать кусочки отдельно из каждого участка. Например, при взятии кусочков мозга человека или крупных лабораторных животных приходиться вырезать участки из определенных отделов. Из почки можно вырезать один кусочек, охватывающий всю толщину органа от капсулы до лоханки, что обеспечивает попадание в него всех слоев. Если орган имеет однородное строение (большинство желез, мышцы), то выбор места для вырезания кусочка не имеет большого значения.

Если необходимо приготовить гистологические препараты из стенки кишечника, иссекают нужный отрезок органа, ополаскивают его в изотоническом растворе хлорида натрия (что бы не высохла серозная оболочка), разрезают вдоль (напротив брыжейки) и накалывают с помощью игл на восковую или пробковую подушку в расправленном состоянии слизистой оболочкой кверху.

Взятие материала из легкого также имеет некоторые особенности, ибо легкое всегда содержит воздух и ткань его плавает, не погружаясь полностью в фиксирующую жидкость. Для полного погружения необходимо кусочек органа завернуть в марлю в месте с каким-либо грузом.

ФИКСАЦИЯ

Задачи и правила фиксации

Цель фиксации - убить клетку, прекратить происходящие в ней процессы (прежде всего ферментативные) и, по возможности, сохранить ее прижизненное строение.

Существует ряд общих правил фиксации: 1) объем фиксирующей жидкости должен не менее чем в 20 раз превышать объем фиксируемого кусочка ткани; 2) фиксатор должен иметь доступ к фиксируемому материалу со всех сторон, по этому на дно сосуда кладут вату или кусочек фильтровальной бумаги или подвешивают кусочек на нитке; 3) продолжительность фиксации зависит от свойств фиксатора, прежде всего от скорости проникновения фиксатора в ткань; 4) различные фиксаторы

сохраняют различные структурные и химические компоненты клетки.
Большинство	фиксаторов	оказывает	уплотняющее	действие	на

обрабатываемый материал. Размер исследуемых кусочков должен быть таким, чтобы произошло полное его пропитывание в оптимальные для данного фиксатора сроки. В среднем для большинства фиксаторов берут кусочки толщиной 5-10 мм.

Различают фиксирующие средства (простые фиксаторы)и фиксирующие смеси (сложные фиксаторы)

ПРОСТЫЕ ФИКСАТОРЫ