Этапы выделения чистой культуры микробов.

Культивирование бактерий применяют, в частности, для выделения и идентификации чистых культур.

Чистой культурой называется популяция бактерий одного вида или одной разновидности, выращенная на питательной среде. Примером чистой культуры может служить изолированная колония.

Колония представляет собой видимое изолированное сообщество микроорганизмов одного вида, образующееся в результате размножения одной бактериальной клетки на плотной питательной среде (на поверхности или в глубине ее).

Вид – совокупность микроорганизмов, имеющих единое происхождение и генотип, сходных по морфологическим и биологическим свойствам.

Штамм – культура бактерий одного вида, выделенная из разных источников в одно время.

Схема выделения и идентификации чистой культуры бактерий

Исследуемый материал

↓↓↓

I этап (посев нативного материала)

Микроскопия (ориентировочное представление о микрофлоре).

Подготовка материала к исследованию.

Посев на среды обогащения и (или) на плотные селективные питательные среды

(получение изолированных колоний).

↓↓↓

II этап (изолированные колонии)

Макроскопическое изучение культуральных свойств колоний

Микроскопическое изучение колоний под малым увеличением

микроскопа и в окрашенном мазке.

Постановка пробы на аэротолерантность.

Посев на скошенный питательный агар (выделение чистой культуры).

↓↓↓

III этап (чистая культура)

Идентификация выделенной культуры по комплексу биологических свойств*

↓↓↓

IV этап (учет результатов)

Заключение о выделенной культуре

*Идентификацию чистой культуры проводят по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим свойствам, антигенной структуре, факторам патогенности, чувствительности к бактериофагам (фаготипирование) и антибиотикам. Многие виды бактерий подразделяют по одному признаку на биологические варианты – биовары. Биовары, различающиеся по биохимическим свойствам, называют хемоварами, по антигенным свойствам – сероварами, по чувствительности к фагу – фаговарами и т.д. Культуры микроорганизмов одного и того же вида или биовара, выделенные из различных источников либо в разное время из одного и того же источника, называют штаммами, которые обычно обозначают номерами или какими-либо символами.

Примечание: при наличии небольшого числа микробов в исследуемом материале предварительно производят посев на среды обогащения. Некоторые микробы (пневмококки, возбудители туляремии) сначала вводят в организм восприимчивых животных (биологическая проба), затем выделяют чистую культуру.

11