МИНОБРНАУКИ РОССИИ

­­­­­­_______________________________________________

федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

Санкт-Петербургский государственный технологический институт (Технический университет)

___________________________________________

Кафедра технологии микробиологического синтеза

Т.Б.Лисицкая методы изучения морфологии и цитологии микромицетов

Методические указания

к лабораторным работам

Санкт-Петербург

2012

УДК 576.8

Лисицкая Т.Б. Методы изучения морфологии и цитологии микромицетов: методические указания к лабораторным работам / Т.Б.Лисицкая.- СПб.: СПбГТИ(ТУ), 2012.- 69 с.

В методических указаниях представлены лабораторные работы по курсу «Общая биология и микробиология». В методических указаниях излагаются: методы работы с микроорганизмами, строение вегетативного тела грибов, цитология клетки грибов, способы их размножения.

Методические указания предназначены для бакалавров I курса, обучающихся по направлению 240700.62 «биотехнология» и соответствуют рабочей программе по дисциплине "Общая биология и микробиология". Процесс изучения дисциплины направлен на формирование следующих компетенций в соответствии с ФГОС ВПО по направлению «Биотехнология»:

– владеть культурой мышления, быть способным к обобщению, анализу, восприятию информации, постановке цели и выбору путей ее достижения (ОК-1);

– стремиться к саморазвитию, повышению своей квалификации и мастерства, приобретать новые знания в области техники и технологии, математики, естественных, гуманитарных, социальных и экономических наук (ОК-7);

– быть способным и готовым использовать основные законы естественнонаучных дисциплин в профессиональной деятельности (ПК-1);

– владеть основными методами и приемами проведения экспериментальных исследований в своей профессиональной области (ПК-7).

Рис.28 , табл.3 , библиогр. 12 назв.

Рецензент:

Д.О.Виноходов, д-р.биол.наук,

профессор кафедры молекулярной

биотехнологии СПбГТИ(ТУ)

Утверждено на заседании учебно-методической комиссии факультета химической и биотехнологии 04.04.2012

Рекомендовано к изданию РИСо СПбГТИ(ТУ)

ВВЕДЕНИЕ

Основными объектами в биотехнологии являются микроорганизмы, в основном относящиеся к царствам бактерий и грибов. В данном курсе объектом изучения являются микроскопические грибы – микромицеты. Малые размеры организмов диктуют специальные правила и методы работы с ними.

Целью лабораторных работ является овладение навыками работы с микромицетами: способами изучения их строения, правилами работы с соблюдением условий стерильности, методами выращивания. В результате студенты будут знать правила микроскопирования, способы приготовления различных видов препаратов, морфологию одно- и многоклеточных грибов, строение клетки грибов, способы размножения грибов.

ПРАВИЛА РАБОТЫ

В МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ

Все работы с микроорганизмами осуществляются в специально оборудованном помещении, которое называется микробиологической лабораторией. Специфику устройства микробиологической лаборатории и правила работы в ней определяют требования безопасной работы персонала и необходимость сохранения чистоты культур микроорганизмов.

В состав микробиологической лаборатории входят: лабораторные комнаты для исследований, помещения для подготовки питательных сред и реактивов, мытья посуды, стерилизации (автоклавная), посевов микроорганизмов (бокс), выращивания микроорганизмов (термокомната, качалочная), музей микроорганизмов.

К основному оборудованию лаборатории относятся: микроскопы, термостаты (или термокомнаты) и качалки для выращивания микроорганизмов; автоклавы и сухо-жаровые стерилизаторы; сушильные шкафы; холодильники.

Основное правило безопасной работы в микробиологической лаборатории заключается в том, что работа должна осуществляться в условиях стерильности, то есть должна обеспечить предупреждение загрязнения внешней среды и персонала микроорганизмами из исследуемого материала.

В микробиологической практике используют главным образом чистые культуры микроорганизмов, то есть культуры, содержащие микроорганизмы только одного вида. Ввиду того, что в воздухе и на поверхности предметов (столах, одежде, руках, волосах, инструментах) всегда имеется большое количество разнообразных микроорганизмов, то важной задачей является также предупреждение загрязнения чистых культур микроорганизмов посторонней микрофлорой из внешней среды.

Рабочую поверхность столов и пол всех лабораторных помещений покрывают легко моющимся материалом - пластиком или линолеумом, а стены на высоту 170 см от пола окрашивают в светлые тона масляной краской. Пол и стены периодически моют с мылом.

Воздух помещений, в которых производят пересевы микроорганизмов (бокс, лабораторная комната для исследований) дезинфицируют облучением ультрафиолетовыми лучами с помощью бактерицидных ламп.

В учебной микробиологической лаборатории за каждым студентом закрепляется индивидуальное рабочее место. Рабочее место снабжено: биологическим микроскопом с накладным осветителем, штативом для пробирок, подставкой для красок и реактивов, ванночкой для окраски препаратов, промывалкой с водой, спиртовкой, бактериологической петлей, карандашом по стеклу, сосудом для грязных пипеток и шпателей.

Рабочее место, где проводится работа с культурами микроорганизмов, требует дезинфекции не только до начала работы, но и после ее окончания. Для протирания поверхности стола можно использовать 70% растворы изопропилового или этилового спирта, 2-3% раствор соды, 0,5-3% водный раствор хлорамина.

Правила работы:

1. В лаборатории следует находиться в чистом рабочем халате и сменной обуви.

2. Рабочее место должно содержаться в порядке. На рабочем столе не должно находиться никаких предметов, не имеющих отношения к лабораторной работе. Перед началом работы следует проверить исправность микроскопа, наличие необходимого оборудования и материалов на рабочем месте, продезинфицировать стол. Обо всех неисправностях и недостатках сообщать преподавателю или лаборанту.

3. Во время работы необходимо:

а) бережно обращаться с микроскопом и другими предметами лабораторного оборудования;

б) соблюдать тишину, избегать излишнего хождения по лаборатории;

в) отработанные препараты из живых культур, пипетки, шпатели опускать в сосуд с дезинфицирующим раствором, а петли с остатками культуры обезвреживать прожиганием в пламени горелки;

г) по ходу работы вести записи и делать зарисовки микроскопической картины рассматриваемых препаратов в рабочем журнале;

д) не курить и не принимать пищу в лаборатории;

е) не выносить за пределы лаборатории какие бы то ни было материалы и культуры микроорганизмов.

4. По окончании занятий необходимо:

а) поместить все грязные предметные и покровные стекла в раствор для дезинфекции;

б) привести рабочее место в порядок: убрать спиртовку и ванночку в стол, очистить объективы микроскопа от иммерсионного масла, накрыть микроскоп, продезинфицировать стол, вымыть руки;

в) сдать рабочее место дежурному;

г) подписать у преподавателя протокол исследования в рабочем журнале.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 1.

ПРАВИЛА МИКРОСКОПИРОВАНИЯ