Стоматологический факультет

ЗАНЯТИЕ № 1.1.4

ФИЗИОЛОГИЯ МИКРОБОВ. МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР АЭРОБОВ

Цель занятия:

изучить культуральные и биохимические свойства бактерий; основные биологические свойства аэробов, методы выявления чистых культур аэробов с целью их идентификации.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:

1. Метаболизм бактерий.

2. Питание бактерий.

3. Ферменты бактерий. Идентификация бактерий по ферментативной активности.

4. Рост и размножение бактерий. Фазы размножения.

5. Основные принципы культивирования.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:

• описать культуральные и биохимические свойства бактерий.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ВЛАДЕТЬ:

алгоритмом лабораторной диагностики инфекционных болезней;

методами анализа и оценки результатов лабораторной диагностики по выявлению возбудителей.

Работа № 1. Методы выделения и идентификации аэробных бактерий

Цель: изучить основные методы выделения и идентификации аэробов (см. теоретическую справку).

I

II

III

А)

IV

*

Ж)

Б)

)

Е)

В)

Д)

Реакция агглютинации

Г)

I. Сбор исследуемого материала

II. Посев исследуемых микроорганизмов на простые, ДДС и элективные питательные

среды с целью получения изолированных колоний

III. Накопление чистой культуры на скошенной питательной среде

IV. Идентификация выделенной чистой культуры

А) изучение морфологических и тинкториальных свойств

Б) изучение культуральных свойств

В) изучение антигенной структуры возбудителя с помощью постановки реакции агглютинации на стекле с поливалентными и монорецепторными сыворотками

Г) изучение биохимических свойств возбудителя по результатам посева на среды Гисса

Д) определение чувствительности микробов к антибиотикам, с помощью метода бумажных дисков

Е) проба с бактериофагами (реакция фаголизабельности)

Ж) биопроба на лабораторных животных – изучают клинику и патогенез заболевания

* проведение внутривидовой идентификации для выявления источников инфекции (фаготипирование)

Работа № 2. Питательные среды

Цель: ознакомиться с питательными средами, используемыми для культивирования микроорганизмов в лабораторных условиях.

Самостоятельная работа: классифицировать предложенные питательные среды; результаты оформить в виде таблицы (см. теоретическую справку).

среда	происхождение		консистенция			назначение
	естест-венное	искусст-венное	жидкая	полу- жидкая	плотная	общего	ДДС	электив- ные
Мясо- пептонный агар (МПА)
Мясо- пептонный бульон (МПБ)
Среда Эндо
Кровяной агар
Тиогликолевая среда
Среды Гисса
Среда Сабуро
Свернутая сыворотка
Желточно- солевой агар (ЖСА)

В ывод:

Работа № 3. Характер роста бактерий на плотных питательных средах

(культуральные свойства)

Цель: изучить культуральные свойства микроорганизмов на плотных питательных средах.

Самостоятельная работа: по предложенным критериям описать колонии микроорганизмов, выросших на МПА (посев воздуха); результаты внести в таблицу; сделать вывод.

Критерии	Описание	Колонии
Форма	Округлая, овальная
Размер	Мелкий – 1-2 мм; средний – 3-4 мм; крупный 5 мм и более
Характер края	Ровный (S-форма); неровный (R-форма): зубчатый, звездчатый, фестончатый, волнообразный и др.
Пигмент (цвет)	Пигментированные колонии – цвет колоний отличается от цвета питательной среды (пигмент м.б. малиновый, белый, желтый, зеленый, золотистый и др.). Непигментированные – колонии под цвет питательной среды
Поверхность	Плоская, выпуклая, куполообразная, с выпуклым центром, с вогнутым центром, шероховатая, бугристая и т.д.
Прозрачность	Непрозрачные, полупрозрачные, прозрачные
Структура	Гомогенная, негомогенная
Консистенция (вязкость)	Сухая, вязкая, слизистая, маслообразная, сметанообразная и т.д.

Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 4. Характер роста микроорганизмов на жидких питательных средах

Цель: изучить особенности роста микроорганизмов на жидких питательных средах.

Самостоятельная работа: описать культуральные свойства бактерий на МПБ и 1% ПВ, зарисовать, сделать вывод.

Опыт № 1 Опыт № 2 Опыт № 3

МПБ МПБ 1% пептонная вода

(кишечная палочка) (возбудитель газовой гангрены) (возбудитель холеры)

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 5. Биохимическая активность аэробов (дифференциально-диагностические признаки)

Цель: изучить ферментативную активность микроорганизмов.

Самостоятельная работа:

А) оценить сахаролитическую и протеолитическую активность бактерий на средах Гисса, зарисовать; на основании полученных данных определить вид микроорганизма (см. теоретическую справку).

Вид м/о	Сахаролитическая активность					Протеолитическая активность
	лактоза	глюкоза	мальтоза	маннит	сахароза	индол	Н2S

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Б ) поставить опыт по определению каталазной активности чистой культуры микроорганизмов; определить тип дыхания исследуемой культуры (см. теоретическую справку).

Результат:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Подпись преподавателя______________________________________________________________

Самостоятельная работа студента во внеурочное время:

1. Дать определение:

Рост бактерий ______________________________________________________________

____________________________________________________________________________

Размножение бактерий _______________________________________________________

____________________________________________________________________________

Факторы роста (определение и перечислить)________________________________________________________________

____________________________________________________________________________

Прототрофы________________________________________________________________

____________________________________________________________________________

Ауксотрофы________________________________________________________________

____________________________________________________________________________

Пути поступления питательных веществ в клетку______________________________

____________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________