Цели занятия

• Изучить цитологические особенности включений.

• Усвоить функциональное значение включений.

Вопросы и задания для самоподготовки

• Какие компоненты клетки называют включениями?

• Приведите классификацию включений.

• Приведите примеры различных видов включений.

• Какие включения используются в качестве энергетических субстратов?

• В каких участках клетки наиболее часто располагаются гранулы гликогена?

• Какие продукты содержат секреторные включения?

• Какие продукты содержат экскреторные включения?

• Приведите примеры эндогенных и экзогенных пигментных включений.

• Какие пигментные включения накапливаются в клетках в процессе старения макроорганизма?

• В чем состоит функциональное значение накопления включений меланина при загаре?

• Какие пигментные включения накапливаются в макрофагах, поглощающих погибающие эритроциты?

Оборудование и материалы

• Демонстрационные микропрепараты (гистологические срезы) – жировые включения в клетках печени аксолотля, гранулы гликогена в клетках печени аксолотля, пигментные включения в коже головастика.

• Электронограммы включений жира, гликогена.

• Микроскопы «МИКМЕД-1».

Лабораторная работа 8.1

Изучение структурно-морфологических особенностей

трофических включений

В зависимости от природы запасаемого вещества среди трофических включений выделяют жировые (липидные), желточные (желток), а также гранулы гликогена, представляющего собой полимер глюкозы. Включения жира и гликогена клетки используют в качестве энергетических субстратов. Включения желтка запасаются в яйцеклетке и расходуются в процессе развития эмбриона.

Задание

1. Изучите микроскопическую картину включений гликогена в клетках печени. Для этого используют демонстрационный микропрепарат – гистологический срез печени аксолотля, окрашенный по методу Беста. Метод включает предварительное депарафинирование срезов, заключение их в целлоидин, окрашивание ядер в гемалауне, а затем окрашивание включений гликогена аммиачным раствором кармина.

Рассмотрите микропрепарат под микроскопом с объективами 9× и 40×. При слабом увеличении найдите ярко окрашенный участок печени. Найдите при большом увеличении клетки печени. Они имеют прямоугольную и многоугольную форму и соединены в тяжи. В центре находится одно или два ядра, окрашенные в фиолетовый цвет и содержащие черные ядрышки. Вокруг ядер располагаются глыбки гликогена ярко-красного цвета.

Зарисуйте 3 - 4 печеночные клетки с включениями.

Подпись под рисунком: Включения гликогена в клетках печени. Демонстрационный микропрепарат. Окраска: по методу Беста. ×600.

На рисунке должны быть обозначены ядра клеток, цитоплазма и включения.

2. Изучите электронограмму включений гликогена. Они представляют собой скопления электроно-плотных гранул размером 20 - 30 нм, не имеющих ограничивающей мембраны. Скопления по внешнему виду напоминают розетки и нередко расположены вблизи от аЭПС.

Зарисуйте участок цитоплазмы клетки с 2 - 3 скоплениями гликогена.

Подпись под рисунком: Ультраструктура включений гликогена.

На рисунке должны быть обозначены включения гликогега, аЭПС, плазмолемма, часть ядра.

3. Изучите микроскопическую картину включений жира в клетках печени. Для этого используют демонстрационный микропрепарат – гистологический срез печени аксолотля, окрашенный сафранином и осмиевой кислотой.

Рассмотрите микропрепарат с объективами 9× и 40×. При слабом увеличении вы увидите объединенные в тяжи клетки с красными ядрами и черными включениями жира.

При большом увеличении найдите полигональные клетки с центрально или эксцентрично расположенным ядром, окрашенным сафранином в красный цвет. В розовой (осифильной) цитоплазме видны округлые различной величины включения жира, которые осмиевой кислотой окрашены в черно-коричневый цвет.

Зарисуйте 2 - 3 клетки.

Подпись под рисунком: Включения жира в печени. Демонстрационный микропрепарат.

На рисунке должны быть обозначены ядро, цитоплазма, жировые включения, плазмолемма.