- •Государственный университет
- •А.Г.Золотарев, и.В.Дармов, н.С.Мокрушина практикум по цитологии
- •Введение
- •Правила оформления отчетов по лабораторным работам
- •Порядок проведения занятий
- •Техника безопасности
- •Микроскопическая техника.
- •Методики приготовления препаратов
- •Для цитологических исследований
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Оборудование и материалы
- •Лабораторная работа 1.1 Изучение устройства светового микроскопа
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёте по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 1.2 Освоение правил работы с микроскопом «микмед-1» и техники микроскопирования
- •Устройство микроскопа
- •Бинокулярная насадка
- •Окуляры
- •Объективы
- •Револьверное устройство
- •Конденсорное устройство
- •Конденсор
- •Фокусировочный механизм
- •Осветительное устройство
- •Зеркало
- •Встроенный осветитель
- •Правила работы с микроскопом на лабораторных занятиях
- •1. Установка микроскопа
- •2. Размещение препарата
- •3. Настройка освещения в микроскопе с зеркалом
- •4. Настройка освещения в микроскопе со встроенным в основание осветителем
- •5. Фокусировка микроскопа
- •6. Исследование препарата
- •7. Завершение работы
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Тема 2 Основы клеточной теории. Особенности строения прокариотических и эукариотических клеток
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Оборудование и материалы
- •Лабораторная работа 2.1 Изучение основ клеточной теории
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 2.2
- •Многоклеточного организма
- •Задание
- •Микроскопия мазка клеток крови лягушки
- •Микроскопия нервных клеток симпатического ганглия
- •Микроскопия клеток канальцев почки
- •Микроскопия клеток печени
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 2.3
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 2.4
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Тема 3 Общие принципы структурно-функциональной организации плазмолеммы эукариотической клетки
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Оборудование и материалы
- •Лабораторная работа 3.1 Изучение состава и тонкого строения плазмолеммы
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчете по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 3.2 Усвоение функционального значения плазмолеммы
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Тема 4 Структурно-функциональные особенности синтетического аппарата клетки
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Оборудование и материалы
- •Лабораторная работа 4.1 Изучение строения и функционального значения гранулярной и гладкой эндоплазматической сети
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчете по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 4.2
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Тема 5 Структурно-функциональные особенности аппарата внутриклеточного переваривания
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Оборудование и материалы
- •Лабораторная работа 5.1 Изучение тонкого строения и функционального значения гидролазных пузырьков, эндосом и лизосом
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 5.2 Изучение тонкого строения и функционального значения пероксисом
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчет по лабораторной работе
- •Тема 6 Структурно-функциональные особенности митохондрий
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Особенностей митохондрий
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 6.2 Изучение функционального значения митохондрий
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчет по лабораторной работе
- •Тема 7 Структурно-функциональные особенности цитоскелета и его производных
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Материалы и оборудование
- •Лабораторная работа 7.1 Изучение строения и функционального значения органелл, содержащих микротрубочки
- •Задание
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Тема 8 Структурно-функциональные особенности включений клетки
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Изучение структурно-морфологических особенностей
- •Материалы, представляемые в отчет по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 8.2 Изучение цитологических особенностей пигментных включений
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
- •Тема 9 Структурно-функциональные особенности ядра клетки
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Материалы и оборудование
- •Лабораторная работа 9.1 Изучение строения ядра и функционального значения его компонентов
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчет по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 9.2 Изучение уровней упаковки хроматина в ядре клетки и общей морфологии хромосом
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчет по лабораторной работе
- •Тема 10 Механизм клеточного деления
- •Цели занятия
- •Вопросы и задания для самоподготовки
- •Материалы и оборудование
- •Лабораторная работа 10.1 Изучение клеточного и митотического циклов
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчет по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 10.2 Изучение морфологии клеток, делящихся амитозом
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчёте по лабораторной работе
- •Лабораторная работа 10.3 Изучение мейотического деления
- •Задание
- •Материалы, представляемые в отчет по лабораторной работе
- •Библиографический список
- •Перечень вопросов, включённых в экзаменационные билеты по курсу общей цитологии
- •Перечень гистологических препаратов, выносимых на экзамен
- •Перечень электронограмм, включенных в экзаменационные билеты
Материалы, представляемые в отчёт по лабораторной работе
1. Схемы строения комплекса Гольджи и эндоплазматической сети.
2. Зарисовка комплекса Гольджи.
3. Заполненная табл. 4.1.
Тема 5 Структурно-функциональные особенности аппарата внутриклеточного переваривания
Аппарат внутриклеточного переваривания представлен мембранными пузырьками – эндосомами и лизосомами. Они содержат литические ферменты – кислые гидролазы и обеспечивают расщепление макромолекул внеклеточного и внутриклеточного происхождения до низкомолекулярных веществ, которые затем диффундируют через мембрану лизосом и могут использоваться клеткой. Непереваренные материалы накапливаются в остаточных тельцах. Они могут выделяться за пределы клетки или оставаться в цитоплазме длительное время. Другие мембранные пузырьки – пероксисомы защищают клетку от действия перекиси водорода и обезвреживают ряд веществ.
Цели занятия
Изучить особенности тонкого строения эндосом, лизосом и пероксисом.
Усвоить функциональное значение аппарата внутриклеточного переваривания.
Вопросы и задания для самоподготовки
Перечислите органеллы, образующие аппарат внутриклеточного переваривания.
Каковы структурные особенности мембран, эндосом и лизосом?
Каковы особенности содержимого эндосом, в чем заключается их функциональное значение?
Каковы особенности содержимого лизосом, в чем заключается их функциональное значение?
Объясните содержание терминов фаголизосома, аутофаголизосома, мультивезикулярное тельце, остаточное тельце.
Опишите путь транспорта и расщепления веществ в клетке.
В чем заключаются различия между ранними и поздними эндосомами?
В чем заключаются различия между гидролазными пузырьками и лизосомами?
Какой фермент является цитохимическим маркером лизосом?
В чем заключаются различия между ауто- и гетерофагией?
В чем состоит функциональное значение секреции лизосомальных ферментов за пределы клетки?
В каких структурах содержится пигмент старения?
Каковы особенности строения и в чем состоит функциональное значение пероксисом?
Каким образом образуются пероксисомы?
В клетках каких органов чаще всего встречаются пероксисомы?
Оборудование и материалы
Схемы тонкого строения и электронограммы эндосом, лизосом и пероксисом.
Схема работы аппарата внутриклеточного переваривания.
Лабораторная работа 5.1 Изучение тонкого строения и функционального значения гидролазных пузырьков, эндосом и лизосом
Гидролазные пузырьки, эндосомы и лизосомы представляют собой мембранные пузырьки с постепенно закисляющейся внутренней средой, содержащей около 40 гидролитических ферментов, которые осуществляют внутриклеточное расщепление как экзогенных, так и эндогенных биологических макромолекул. Некоторые клетки могут выбрасывать содержимое лизосом наружу, что обеспечивает внеклеточный протеолиз при воспалительных и резорбционных процессах.
Задание
1. Изучите и зарисуйте схему строения органелл, участвующих в процессе внутриклеточного переваривания (рис. 5.1).
Подпись под рисунком: Схема тонкого строения аппарата внутриклеточного переваривания.
На рисунке должны быть обозначены ранние и поздние эндосомы; гидролазные пузырьки (первичные лизосомы); лизосомы; фаголизосомы; автофаголизосомы; мультивезикулярные тельца; остаточные тельца.
2. Составьте таблицу с обобщенными характеристиками различных видов эндосом и лизосом с указанием pH содержимого и глубины переваривания макромолекул (см. табл. 5.1).
Таблица 5.1
Общая характеристика мембранных пузырьков
Вид мембранного пузырька |
Характеристика |
Ранняя эндосома |
|
Поздняя эндосома |
|
Гидролазный пузырек |
|
Лизосома |
|
Рис. 5.1. Аппарат внутриклеточного переваривания:
эндосомы и лизосомы; КГ – комплекс Гольджи; ГП – гидролазные пузырьки; ОЯ – окаймленная ямка; ОП – окаймленный пузырек; РЭ – ранняя эндосома; ПР – пузырек рециклирования; ПЭ – поздняя эндосома; Л – лизосома; ГФ – гетерофагосома; АФ – аутофагосома; ОТ – остаточное тельце; МВТ – мультивезикулярное тельце [3]
3. Изучите электронограмму и схему ультратонкого строения лизосомы и эндосомы.
Обратите внимание, что мембрана, ограничивающая эти органеллы, имеет однослойное строение, а не трехслойное, характерное для большинства биологических мембран.
Вспомните другие особенности строения мембраны лизосом и эндосом; сформулируйте устный ответ.
Зарисуйте 3 - 4 эндосомы и лизосомы.
Подпись под рисунком: Ультраструктура эндосом и лизосом.
На рисунке должны быть обозначены лизосомы и эндосомы.
