Семипалатинская государственная медицинская академия методические рекомендации для практических занятий

Специальность: 051301

Дисциплина: Микробиология

Кафедра: Курс микробиологии,вирусологии с основами иммунологии.

Курс 2__

Тема № _3__Кислотоустойчивые бактерии и их окраска по Цилю-Нильсену.

Исследование бактерий в живом состоянии. Морфология спирохет,актиномицетов,

риккетсий,микоплазм,грибов,вирусов. Принцип работы фазовоконтрастного,

люминесцентного и электронного микроскопов. Рубежный контроль:коллоквиум.

Составитель:Абишева М.Т., Объедкова Э.В.

должность,

ученая степень,

звание, _________________________Ф.И.О.

(для подписи)

Семей – 2008_ г.

1. Тема: Кислотоустойчивые бактерии и их окраска по Цилю-Нильсену.

Исследование бактерий в живом состоянии. Морфология спирохет,актиномицетов,

риккетсий,микоплазм,грибов,вирусов.Принцип работы фазовоконтрастного,люминесцентного и электронного микроскопов.

Рубежный контроль: коллоквиум.

2. Цель:

-приобрести и закрепить знания студентов по технике окрашивания мазка по методу Циля-Нильсена.;

- закрепить навыки по приготовлению препарата «раздавленная капля» и « висячая капля» и исследованию бактерий в живом состоянии;

-приобрести и закрепить знания по правилам фазовоконтрастной,люминесцентной и электронной микроскопии.;

3. Задачи обучения:

- изучить химический состав кислотоустойчивых бактерий;

- обучить механизму окраски по Цилю-Нильсену;

- изучить морфологию спирохет,актиномицетов,риккетсий, микоплазм,грибов,вирусов;

-изучить подвижность микроорганизмов методом висячей и раздавленной капли.

- сформировать представления о фазовоконтрастной,люминесцентной,электронной микроскопии.

4. Основные вопросы темы

1.Кислотоустойчивые бактерии, особенности их выявления.

2.Механизм и техника окраски по Цилю-Нильсену.

3.Исследование бактерий в живом состоянии.Препараты « висячая капля»,

« раздавленная капля».

4.Морфология спирохет, методы выявления.

5.Морфология актиномицет,методы выявления.

6.Морфология риккетсий.

7.Морфология микоплазм.

8. Классификация и структура грибов,методы выявления.

9.Особенности строения вирусов.

10.Фазовоконтрастная микроскопия.Принцип работы,применение.

11.Принцип работы люминисцентного микроскопа,применение.

12.Принцип работы и устройство электронного микроскопа,применение.

5. Методы обучения и преподавания : Лабораторное занятие.

Работа в малых группах под руководством преподавателя. Освоение навыков окраски

по Цилю-Нильсену. Приготовление препаратов « висячая капля», «раздавленная капля» .

Оформление тетрадей.

Презентация по морфологии спирохет, актиномицетов,риккетсий,микоплазм, грибов,вирусов.

Проведение рубежного контроля по морфологии микроорганизмов.

6. Литература

Основная:

1.Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология.- М.: МИА, 2001.- 734 с.

2. Коротяев А.И, Бабичев С.Л. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. - СПб.: Спец. лит, 2000.- 591 с.

3.Медицинская микробиология /Гл.ред В.И. Покровский, O.K. Поздеев. - М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1998, 2001, 2006. — 1200 с.

4.Тец В.В. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии – М.:Медицина, 2002. - 352 с.

5.Компьютерная программа "Диаморф" - "Медицинская микробиология" - атлас-руководство по бактериологии микологии, протозоологии и вирусологии под редакцией акад.проф.Воробьева А.А.

Дополнительная:

1. Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.В., Фрейдлин И.С. Руководство к лаборатор-ным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии, иммунологии. - М.: Медицина, 1993.

2.Н.Красилыников А II. Справочник по антисептике. - Минск. - Вые |нк..- 1995.367с.

3.Галактионов В.Т. Иммунология. - М. - Изд. "РИЦ МДК". - 2000. -487

4. Воробьев А.А. "Микробиология, иммунология" М.: МИА,2002

5. Воробьев А.А., Кривошейн Ю.С., Широбоков В.П. Медицинская и санитарная микробиология М.: Издательский центр "Академия" – 2003. – 464 с.

6.Аравийский Р.А., Горшкова Г.И.. Практикум по медицинской микологии. - С-Пб. - 1995. - 50 с.

7.Всант P., Мосс У., Уивер Р. Определитель нетривиальных патогенных грамотрицательных бактерий (аэробных и факультативно-анаэробных). - М.: Мир, 1999. – 791 с.

8.Внутрибольничные инфекции //Под ред. Р.П.Венцелла - М.:Медицина, 1990.-

656 с.

9.Д. Саттон, А.Фотергилл, М.Ринальди. Определитель патогенных и условно-

патогенных грибов. - Изд. Мир.-2001. 470 с.

10.Маянский А.Н. Микробиология для врачей.-Нижний Новгород: Издательство

11.Нижегородской государственной медицинской академии, 1999. — 400 с.

12.Котова А.Л. Клиническая микробиология: Методические указания.-Алматы, 2004.-162

13. Тец В.В. Справочник по клинической микробиологии – СП Стройлеспечать.

7. Контроль

Контрольные вопросы для оценки исходного уровня знаний:

1.В чем особенности химического состава кислотоустойчивых бактерий?

2.Какой метод применяется для окраски кислотоустойчивых бактерий?

3.Способы изучения подвижности бактерий.

4.Морфология актиномицетов.

5.Особенности морфологии спирохет.

6.Особенности строения и биологические свойства риккетсий.

7.Строение и свойства микоплазм.

8.Классификация грибов, особенности морфологии.

9.Классификация вирусов.Особенности изучения их морфологии.

10.Электронный микроскоп. Принцип работы.

Тесты для оценки исходного уровня знаний:

См. приложение №1

Контрольные вопросы для заключительного уровня знаний:

1.Какая кислота применяется при окраске по Цилю-Нильсену?

2.Цель исследования микроорганизмов в живом состоянии.

3.В чем состоит опасность работы с препаратами раздавленной и висячей капель.

4.Отличие риккетсий от других бактерий.

5. Методы изучения спирохет.

6.Строение плесневых грибов.

7.Морфологическая характеристика микоплазм.

8.Что такое вирион?

9.Отличие структуры и химического состава вирионов от бактерий.

10.Где применяется темнопольная, фазовоконтрастная и электронная микроскопия.

Контрольные задачи для оценки заключительного уровня знаний:

1.Определить последовательность при окраске по Цилю-Нильсену:

1.наносят 5% раствор серной кислоты для обесцвечивания,промывают водой

2.на фиксированный мазок наносят карболовый раствор фуксина на фильтровальную бумагу и подогревают 3-5 мин.

3.докрашивают водным раствором метиленового синего 3-5 мин

3.Промывают водой,высушивают и микроскопируют

4.Снимают бумагу с краской и промывают водой

2.В препарате « раздавленная капля» видны нити мицелия от которого отходят

одноклеточные конидиеносцы,заканчивающиеся веерообразным расширением

(конидиями).Какой вид грибов представлен?

Приложение № 1

Тесты для оценки исходного уровня знаний.

Тема: Кислотоустойчивые бактерии и их окраска по Цилю-Нильсену.

Исследование бактерий в живом состоянии. Морфология спирохет,актиномицетов,

риккетсий,микоплазм,грибов,вирусов.Принцип работы фазовоконтрастного,люминесцентного и электронного микроскопов.

Рубежный контроль: коллоквиум.

1.В основу классификации вирусов положен:

1.тип азотистых оснований

2.тип НК

3.тип белка

4.тип болезни

5.тип штамма

2.Грибы делятся на:

1.высшие и средние

2.низшие и средние

3.высшие и низшие

4.сложные и простые

5.простые и низшие

3.Для темнопольной и фазово-контрастной микроскопии используют:

1.фиксированные мазки

2.мазки окрашенные по Граму

3.препараты изготовленные на пленках

4.препараты окрашенные флюорохромами

5.нативные препараты висячая и раздавленная капли

4.Микоплазмы:

1.имеют клеточную стенку

2.имеют жгутики

3.полиморфные микроорганизмы

4.грамположительные микроорганизмы

5.размеры – 0,1-0,2 нм

5.Характеристика риккетсий:

1.окрашиваются по Здродовскому в красный цвет

2.образуют споры

3.размеры в нм

4.окрашиваются по граму положительно

5.образуют капсулу

6.Показатели электронного микроскопа:

1.максимальное увеличение - 150 раз

2.разрешающая способность – 0,2 нм

3.общее увеличение – 900 раз

4.разрешающая способность – 0,2 мкм

5.общее увеличение – 90 раз

7.Систематика грибов основана на:

1.наличии или отсутствии клеточной стенки

2.наличии или отсутствии ядра

3.различных способах размножения

4.наличии или отсутствии митохондрий

5.разном способе питания

8.Окраска по Цилю-Нильсену используется для выявления:

1.капсулы

2.спор

3.ресничек

4.жгутиков

5.волютиновых зерен

9.Кислотоустойчивость микроорганизмов связана с наличием:

1.нуклеиновых кислот

2.жировосковых веществ

3.капсул

4.углеводов

5.цитоплазматической мембраны

10.С помощью темнопольной микроскопии изучают:

1.тинкториальные свойства микробов

2.выявляют реснички

3.подвижность микробов

4.расположение спор

5.ядерное вещество

11.Основные признаки вирусов:

1.наличие ядра и белковой капсулы

2.размеры в микронах

3.наличие ДНК и РНК,внутриклеточный паразитизм

4.наличие ДНК или РНК,внутриклеточный паразитизм

5.культивирование на плотных средах

12.Морфологию грибов изучают:

1.в люминесцентном микроскопе

2.в препарате «раздавленная « капля

3.по Леффлеру

4.в темном поле зрения

5.окраской по граму

13.Принцип фазово-контрастной микроскопии:

1.прохождение потока электронов

2.разности показателя преломнения

3.явление дифракции света

4.превращение фазовых изменений световых волн в амплитудные

5.явление фотолюминесценции

14.Подвижность бактерий определяют методом:

1.Грама

2.Гинса

3.»висячей «каплей

4.Нейссера

5.Леффлера

15.Для приготовления препарата «висячая капля» требуется:

1.простое стекло

2.простое стекло и покровное стекло

3.предметное стекло с лункой и покровное стекло

4.чашка Петри

5.иммерсионное масло