Работа 1. Приготовление нервно-мышечного препарата
Чаще всего обездвиживание лягушки производят путем разрушения ЦНС
— спинного и головного мозга. Которое производят двумя способами:
В обоих случаях лягушку завертывают в марлевую салфетку так, чтобы передние лапки оказались прижатыми к туловищу, а задние находились в вытянутом состоянии, голова остается свободной.
1. Первый способ (с сохранением головы). Для обездвиживания лягушку держат в левой руке, указательным пальцем которой сгибают голову лягушки так, чтобы между головой и позвоночником образовался некоторый угол (рис. 1, а). Затем препаровальной иглой с небольшим нажимом проводят по средней линии головы сверху вниз пока игла не соскользнет в небольшую ямку, соответствующую атлантозатылочной мембране. Проколов кожу и мембрану в этом месте, иглу вводят в полость черепа и несколькими движениями разрушают головной мозг (рис. 1, б). Затем слегка извлекают иглу, направляют ее в позвоночный канал и вращательными движениями разрушают спинной мозг (рис. 1, в).
2.Второй способ (путем декапитации.) Декапитацию производят введением одной бранши ножниц в ротовую полость и отсечением челюсти и переднего отдела мозга. Разрез должен пройти сразу же за глазными буграми. В открывшийся позвоночный канал вводят препаровальную иглу и разрушают спинной мозг.
Рис. 1. Обездвиживание лягушки.
Работа 1. Приготовление нервно-мышечного препарата
Цель работы: Научиться готовить нервно-мышечный препарат, приготовленный из задних лапок лягушки для изучения физиологических свойств мышц и нервов.
Для работы необходимо: препаровальный набор инструментов, лоток, салфетки, операционный столик, раствор Рингера, лягушка.
Ход работы.
1. Обездвиживают лягушку. Берут ее за заднюю часть туловища и большими ножницами перерезают позвоночник на один сантиметр выше проксимального конца копчика (рис. 2, а). Далее, держа лягушку за задние лапки, ножницами разрезают кожу, мышцы, внутренности и удаляют вместе с передним отделом туловища.
2. Снимают кожу с задних лапок. Для этого берут две марлевые салфетки, одной удерживают остаток позвоночника, другой захватывают кожу и быстрым движением руки удаляют ее с лапок. Получают препарат задних
лапок лягушки, который используется в некоторых экспериментах (рис. 2, б).
3. Препарат задних лапок берут в левую руку за остаток позвоночника так, чтобы хвостовая кость (уростиль) выдавалась вверх, срезают ее ножницами (рис. 2, г).
Рис. 2. Этапы приготовления нервно-мышечного препарата.
4. Переворачивают препарат на вентральную поверхность и под контролем зрения, чтобы не повредить нервные стволы крестцового сплетения, разрезают позвоночник и лонное сращение на две половины и получают препараты двух задних лапок (рис. 2, в, д). Один препарат помещают в стаканчик с раствором Рингера, а другой используют для приготовления нервно-мышечного препарата.
5. Препаровку икроножной мышцы начинают с области пяточного (ахиллова) сухожилия. Под сухожилие подводят браншу ножниц, отделяют его по всей длине и перерезают ниже сесамовидной косточки. Захватив конец пяточного сухожилия пинцетом, отводят икроножную мышцу в сторону, разрывая фасции, соединяющие ее с другими тканями.
При препаровке нерва переворачивают препарат дорсальной поверхностью кверху. Двумя большими пальцами рук раздвигают мышцы бедра и обнажают лежащий в глубине седалищный нерв. С помощью стеклянных крючков препарируют нерв на всем протяжении до коленного сустава. Затем берут кусочек позвоночника, отрезают его от тазовой кости и ножницами подрезают все веточки седалищного нерва. Отпрепаровав нерв до коленного сустава, перерезают конечность выше и ниже коленного сустава (рис. 2, ж) и получают нервно-мышечный препарат (рис. 2,з). Для приготовления препарата изолированной мышцы от нервно-мышечного препарата отсекают нерв (рис. 2, е).
Рекомендации к оформлению работы. Зарисуйте нервно-мышечный препарат, обозначьте его части и укажите, для каких целей он используется.