52. Практические навыки: этапы окраски мазка по Граму, какие свойства изучаются, интерпретация результатов

Этапы окраски по Граму: - генцианвиолет (40 сек) - раствор люголя - спирт 96˚ (20-25 сек) - промывка водой - фуксин (2-3 мин) - капля масла

Тинкториальные свойства – отношение к окраске по Граму. Различают Грам +(синего цвета) и Грам – (красного цвета) Из-за многослойного муреинового каркаса Грам+ не успевают обесцветиться спиртом и окрашиваются в синий цвет, а Грам – обесцвечиваются спиртом и докрашиваются фуксином в красный цвет. №14

53. Основные методы диагностики инфекционных болезней

1. Бактериоскопия (микроскопия), вирусоскопия(электроннаямикроскопия)

2. Бактериологическое (выделение чистой культуры).

3. Паразитологическое исследование (микроскопия и гельминтоовоскопия).

4. Биологический метод (заражение животных).

5. Вирусологическая диагностика (выделение вирусов и токсинов):

А) цитопатическое действие на культуру клеток (ЦПД);

Б) реакция нейтрализации летального эффекта на чувствительных животных и куриных эмбрионах;

6. Серологическая диагностика (идентификация при помощи иммунной диагностической сыворотки):

A) реакция агглютинации развернутая (РА);

Б) ориентировочная (пластинчатая) реакция агглютинации;

B) реакция непрямой гемагглютинации (РНГА);

Г) реакция гемагглютинации (РГА) и реакция гемадсорбции (РГАдс);

Д) реакция торможения гемагглютинации (РТГА) и гемадсорбции (РТГАдс);

7. Иммунологическая диагностика (идентификация антигенов и антител):

A) имуноферментный анализ (ИФА);

Б) иммуноферритиновая реакция;

В) реакция преципитации (РП):

Г) иммуноблотинг;

8. Метод генной диагностики:

· полимеразная цепная реакция (ПЦР) или специфическая амплификация

9. Экспресс-методы:

А) иммунологический (МФА,.РНТА, ИФМ);

Б) бактериоскопический.

10. Алергологическая диагностика:

А) Кожные пробы со специфическими аллергенами (тулярин, туберкулин, бруцеллин, дизентерии).

54. Семейство Энтеробактерий: общая характеристика, роль в патологии человека. Методы диагностики оки

Классификация энтеробактерий:

· p. Escherichia, в. E. coli

· p. Salmonella, в. S. typhi, S. paratyphi A, S. paratyphi B, S. enteritidis, S. typhimurium, S. anatum, S. infantis, S. Haifa, S.panama

· p. Shigella, в. S. dysenteriae, S. sonnei, S. flexneri, S. boydii

· p. Klebsiella, в. K. pneumoniae, K. rhinoscuromatis, K. ozaenae

· p. Proteus, в. P. vulgaris, P. mirabilis

· p. Yersinea, Y. pestis, Y. enterocolitica, Y. psevdotuberculosis

Условно-патогенные токсико-пищевые инфекции:

· p. Citrobacter

· p. Enterobacter

· p. Hafnia

Общая характеристика энтеробактерий.

1. Главное место обитания – кишечник человека и животных. При определенных условиях могут покидать данный биотоп и вызывать другие заболевания.

2. Сохраняют жизнеспособность во внешней среде на протяжении определенного срока.

3. Гр-, ФАН, мезофиллы, оптимум роста 37°С. Хорошо растут на простых питательных средах. Формируют R- или S-формы колоний.

4. Биохимические свойства вариабельны у разных родов и видов. Различия используются для классификации энтеробактерий. Чем менее выражены биохимические свойства, тем более патогенен.

5. АГ структура:

а) О-АГ – ЛПС КС, термостабилен, имеется у всех представителей семейства (эндотоксин)

б) Н-АГ – есть у подвижных видов, белковый, термолабильный, обладает высокой иммуногенностью, но не токсичен.

в) К-АГ – гетерополисахарид, АГ структура используется для систематики энтеробактерий для выделения родов, видов, сероваров, субсероваров.

6. Патогенность: 1) облигатно-патогенные – способны вызывать заболевания у здорового человека 2) условно-патогенные – вызывают заболевания при попадании в большом количестве в нехарактерный для них биотоп и у лиц со сниженным иммунитетом 3) непатогенные.

Представители семейства Enterobacteriaceae (энтеробактерии) играют важнейшую роль в инфекционной патологии человека. Из внебольничных инфекций энтеробактерии чаще всего вызывают инфекции мочевыводящих путей. Их роль в заболеваниях дыхательных путей, кожи и мягких тканей незначительна. При госпитальных же инфекциях энтеробактерии вызывают тяжелые инфекции дыхательных и мочевыводящих путей, раневые и интраабдоминальные инфекции. При любой локализации первичного очага возможна генерализация инфекционного процесса. Кишечные инфекции у человека могут вызывать только представители родов Escherichia, Shigella, Salmonella, Yersinia.

К ОКИ относятся: эшерихиозы, вызываемые условно-патогенными и патогенными кишечными палочками, брюшной тиф, паратифы А и Б, сальмонеллезы, дизентерия, кишечные клебсиеллезы и кишечные иерсиниозы.

Методы их микробиологической диагностики включают следующие принципы:

1. Микроскопический метод диагностики, как правило, не приемлем, так как патогенные и непатогенные энтеробактерии имеют общие морфологические характеристики.

2. Для диагностики применяют бактериологический и серологический методы. Выбор метода диагностики зависит от клинических проявлений, места локализации возбудителя и фазы патогенеза болезни