23. Серологическое исследование: цель и принципы проведения. Рпга как серологическое исследование

Серологическое исследование- самостоятельный метод диагностики инфекционных заболеваний, основанный на использовании реакций иммунитета по обнаружению инфекционных антител.

Принципы серологического исследования:

1)В реакциях используются стандартные антигены

2)Реакции ставятся с разведением парных сывороток от одного и того же больного, взятые в разные периоды болезни

Первую сыворотку обычно берут на 5-8 день болезни, вторую на 10-16 день

3)Подтверждением диагноза является нарастание титра антител, что говорит об их инфекционном происхождении.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) является разновидностью РА.( Реакция агглютинации (РА) – это прямая, простая реакция иммунитета, при которой происходит склеивание корпускулярных АГ под действием АТ и осаждение комплекса АГ-АТ присутствии электролита)При её использовании для серологического исследования стандартным антигенным препаратом является эритроцитарный диагностикум – взвесь эритроцитов барана с адсорбированными на их мембране микробными АГ. Корпускулярность препарату придают эритроциты, поэтому микробный антиген может быть любым, в том числе вирусным, анатоксином, т.е. некорпускулярным. Это позволяет использовать РПГА для диагностики не только бактериальных, но и вирусных инфекций, а также для определения напряженности антитоксического иммунитета. Феномен пассивной гемагглютинации наблюдается только в том случае, если АТ в сыворотке больного образуют комплекс с микробными АГ, адсорбированными на мембране эритроцитов. Реакцию ставят с разведениями сыворотки от ½ до 1/64 в лунках иммунологического планшета, т.к. она более чувствительна, чем РА. Результатом образования комплекс АГ-АТ на эритроцитах является феномен пассивной гемагглютинации. В случае положительной реакции эрироциты оседают на дне лунки в виде ровного слоя клеток со складчатым или зазубренным краем (перевернутый зонтик), в отрицательном – оседают в виде пуговки или колечка.

24. Практические навыки. Оценка чувствительности к антибиотикам методом индикаторных дисков. С какой целью и как ставится?

В диско-диффузионном методе в качестве носителя антибиотика используют бумажный диск. Образование зоны подавления роста происходит в результате диффузии антибиотика из носителя в питательную среду. В определенных пределах величина диаметра зоны подавления роста обратно пропорциональна МПК( Минимальная подавляющая концентрация антибактериальных препаратов) Однако диско-диффузионный метод позволяет лишь косвенно судить о величине МПК, а результатом исследования является отнесение микроорганизма к одной из категорий чувствительности (чувствительный,промежуточный или резистентный). №7

25. Цмп, мезосомы, рибосомы: строение и функции.

Бактерии имеют типичную цитоплазматическую мембрану. 2 слоя липидов+ белки

ЦПМ является жизненно необходимым структурным компонентом бактериальной клетки. Она ограничивает протопласт, располагаясь непосредственно под клеточной стенкой. ЦПМ – это липопротеин. Является сложно организованной структурой, состоящей из нескольких слоев. Двойной фосфолипидный слой пронизан белковыми глобулинами, которые обеспечивают транспорт веществ в бактериальную клетку. ЦПМ выполняет жизненно важные функции , нарушение которых приводит бактериальную клетку к гибели.- это прежде всего регуляция поступления в клетку метаболитов и ионов, участие в метаболизме, репликации ДНК, а у ряда бактерий в процессах спорообразования

Мезосомы – являются производными ЦПМ. Они имеют неодинаковое строение у разных бактерий, располагаясь в разных частях клетки либо в в виде концентрических мембран, либо пузырьков, инвагинаций, либо в виде петли. Мезосомы связаны с нуклеоидом. Они участвуют в процессе деления и спорообразования , дыхании клетки.

Дыхательные мезосомы содержат дыхательную цепь ферментов.

Септальные мезосомы- участвуют в процессах синтеза перегородки при делении бактериальной клетки и для спорообразующих бактерий-в септальных мезосомах идет образование оболочек у спорообразующих бактерий

Рибосомы у бактерий представляют собой рибонуклеопротеиновые частицы размером 20 нм, состоящие из двух субъединиц 30S и 50 S. в отлдичии от клеток эукариотов рибосомы бактерий не объединены в эндоплазматическую сеть. Бактериальные рибосомы являются белоксинтезирующими система